反相高效液相色谱法测定阿霉素在小鼠血清中的含量

目的 :对小鼠血清中阿霉素的含量进行了测定 ,以便对其进行血药浓度监测及药物动力学研究。方法 :建立了以α 萘酚为内标的反相高效液相色谱法 (HPLC) ,并对用药后小鼠血清中的阿霉素的含量进行了测定。结果 :血清样品用氯仿 甲醇 ( 4∶1)混合液 1ml提取后进样。色谱柱 :Nova pakC1 8柱 ( 3 .9mm× 15 0mm) ,流动相 :甲醇 乙腈 0 .0 1mol·L- 1 NH4H2 PO4 冰HAc( 4 0∶10∶5 0∶0 .6 ) ,检测波长 :2 33nm。线性范围 :0 .1～ 10 .0 μg·ml- 1 ,r =0 .9994。结论 :该法快速、简便 ,内标价廉、易得 ,适于临床药物浓度监测及药物动力学研究。     

脱氢水飞蓟宾的溶解度及大鼠在体肠吸收特性考察

目的： 测定脱氢水飞蓟宾（DHS）的溶解度并探讨DHS在小肠的吸收动力学特征。方法： 采用HPLC测定DHS含量,流动相甲醇-0.2%甲酸水溶液（60:40）,检测波长255 nm。应用大鼠在体肠循环模型考察DHS在大鼠十二指肠、空肠、回肠的吸收特性。结果： DHS于20,37℃振荡24 h的溶解度分别为0.46,1.23 mg·L^-1。DHS在十二指肠、空肠及回肠中单位时间吸收率（n=3, ±s）分别为（17.81±6.37）%,（8.41±2.43）%,（12.95±5.06）%,吸收速率常数（K_a）依次为（0.176±0.069）,（0.089±0.053）,（0.158±0.058）h^-1;DHS在十二指肠的K_a随药物质量浓度的增加基本保持不变。结论： 温度对DHS溶解度存在一定影响。DHS在十二指肠、空肠、回肠均有吸收,在十二指肠段吸收量和K_a显著高于空肠段。DHS在小肠的吸收机制以被动扩散为主。     

姜酮纳米混合胶束的制备及其对高脂血症的调节作用#br#

目的: 研究纳米混合胶束包载姜酮后对高脂血症的影响。方法:采用薄膜分散法制备姜酮纳米混合胶束（zingerone nano mixed micelles, ZNMs）,通过单因素和正交试验对处方进行优化筛选,测定其表观形态、粒径、载药量和包封率。用油酸诱导人肝癌细胞脂质蓄积以及高脂饲料喂养小鼠建立高脂模型,分析ZNMs对高血脂的调节作用。结果:ZNMs的最优处方是投药量为40 mg,m磷脂 ∶m胆酸钠=2 ∶3,聚乙烯吡咯烷酮K3（PVP K30）用量为30 mg,维生素E聚乙二醇琥珀酸酯（TPGS）用量为22 mg。制得的ZNMs粒径为（50.62±0.25）nm,包封率（94.71±2.02）%。体外释放实验表明,ZNMs累计释放率明显高于原料药。ZNMs能降低高脂饲料引起的高脂血症小鼠血脂代谢,也能影响油酸诱导的细胞脂质蓄积,与姜酮组相比,ZNMs组血脂水平明显改善（P<0.05）。结论:纳米混合胶束对姜酮起到良好的增溶作用,提高抗高血脂效能,且能在生物体内发挥作用。     

HPLC - 荧光检测法研究半乳糖化阿霉素白蛋白纳米粒在小鼠体内的药动学分布

 目的 建立反相高效液相色谱 - 荧光检测法研究 半乳糖化阿霉素白蛋白纳米粒在小鼠体内的药动学 。 方法 α - 萘酚为内标,采用 C₁₈ 色谱柱,流动相为甲醇 - 乙腈 -0.02 mol·L^-1 磷酸二氢铵 - 冰醋酸（ 52 ∶ 5 ∶ 43 ∶ 0.6 ）,流速： 0.9 mL · min^-1 ;荧光检测器 <> λ (Ex)=246 nm ; <> λ (Em)=555 nm 。 结果 小鼠尾静脉给药后,在规定时间取样,测定阿霉素在小鼠血浆、心、肝、脾、肺、肾中的浓度。与普通阿霉素注射剂相比, 半乳糖化 阿霉素白蛋白纳米粒对肝的靶向性明显提高。 结论 所建 HPLC 用于阿霉素体内分布研究结果良好, 阿霉素白蛋白纳米粒 和 半乳糖化阿霉素白蛋白纳米粒 具有良好的肝脏靶向性;与白蛋白纳米粒相比,半乳糖化白蛋白纳米粒的肝脏靶向性进一步提高,具有自身被动靶向和受体介导的主动靶向的“双靶向”特征。     

薄层色谱 - 生物自显影技术测定绵茵陈提取液中绿原酸的含量并评价其抗氧化活性

 目的 建立绵茵陈中绿原酸的含量测定方法并采用薄层色谱 - 生物自显影法研究绵茵陈提取液的抗氧化活性。 方法 薄层 扫描法测定绵茵陈提取液中绿原酸的含量,随后用 二苯代苦味肼基自由基 溶液显色,双波长扫描,获得其抗氧化成分的峰面积。 结果 常规薄层扫描与生物自显影扫描测定得到的 绿原酸 含量具有一致性, 由 生物自显影扫描法测得 色谱峰 总积分值明显大于绿原酸单峰面积,表明 绵茵陈中除了绿原酸外,还存在其它抗氧化能力较强的活性成分。 结论 以 DPPH 作显色剂,双波长扫描,可利用 TLC- 生物自显影技术对天然提取物中具有自由基清除及抗氧化活性的活性成分进行快速筛选与评价 。     

亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展

亲和色谱法(affinity chromatography)是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。利用化合物和固定相表面之间的某种特异性亲和力,将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来。该方法可同时进行色谱分离和活性筛选,作为一种高通量筛选方法广泛应用于各种活性药物的筛选。该文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。并就其应用前景进行讨论,以期更好地发挥亲和色谱在药物筛选中的应用。     

半乳糖化阿霉素白蛋白纳米粒的制备及其质量评价

目的:制备半乳糖化阿霉素白蛋白纳米粒,并考察了其形态、粒径、载药量、包封率和体外释药特性.方法:采用相分离法制备阿霉素白蛋白纳米粒,并在其表面偶联半乳糖苷,使之成为半乳糖化白蛋白纳米粒.激光扫描电子显微镜观察纳米粒的形态,马尔文激光粒度仪测定其粒径分布.采用紫外分光光度法测定纳米粒的载药量和包封率,并初步研究其体外释药特性.结果:电镜结果显示阿霉素纳米粒呈类球型,平均粒径为316.3 nm,纳米粒载药量为3.12%,包封率达91.82%,48 h体外累积释药率为55.71%.结论:本方法制备阿霉素纳米粒工艺简单且包封率较高.体外释药结果显示半乳糖化阿霉素白蛋白纳米粒具有明显的缓释作用.     

氟尿嘧啶半乳糖化白蛋白微球的制备

通过在氟尿嘧啶白蛋白微球的表面偶联 2 -亚氨基 - 2 -甲氧基乙基 - 1-硫代 - β- D-半乳吡喃糖苷 ,制备了氟尿嘧啶半乳糖化白蛋白微球 ( Fu- GBM)。以糖密度、载药量为指标 ,考察了偶联反应时间、p H、反应比、超声分散时间对制备工艺的影响。制得的 Fu- GBM多呈规则的球形 ,粒径范围为 0 .35～ 2 .17μm,跨距为 0 .80 ,平均粒径 0 .90μm ,糖密度为 2 3.7,载药量为 4 .86%     

NGF及其活化受体p-TrkA在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式

为了探讨神经生长因子(NGF)及其活化受体磷酸化的酪氨酸蛋白激酶A(p-TrkA)在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式及其生物学意义,采用免疫荧光双标记技术对处于细胞周期不同时相细胞内的NGF和p-TrkA的动态分布进行亚细胞定位,并观察了抗癌药物羟基脲、紫杉醇和秋水仙素及抗NGF-β中和血清对NGF和p-TrkA在细胞分布的影响;用免疫印迹技术检测细胞核和细胞质内NGF和p-TrkA的相对含量以及细胞培养液内的分泌性NGF。免疫荧光染色结果表明:分裂相细胞在重新贴壁生长6h后,NGF主要分布于核周区,p-TrkA主要定位于细胞膜;培养12h后,NGF和p-TrkA共同转位至细胞核内;在M期,NGF主要定位于中心体,p-TrkA主要定位于纺锤丝;用羟基脲将细胞阻滞于G1/S期后,NGF和p-TrkA主要积聚在细胞核内;用紫杉醇或秋水仙素处理后,NGF与γ-Tubulin仍然共定位于中心体,p-TrkA与α-Tubulin共定位于异形纺锤丝上或弥散分布于细胞质内。用兔抗人NGF-β抗血清中和培养基中分泌性的NGF后,细胞内NGF和p-TrkA免疫荧光强度明显减弱。免疫印迹结果显示:G1/S期细胞核内的NGF和p-TrkA蛋白条带明显浓于细胞质内的蛋白条带。上述结果提示:人脑胶质瘤U251细胞高表达NGF及其高亲和力受体TrkA,并将NGF分泌至细胞外;胞外NGF与细胞膜上TrkA结合后形成NGF/p-TrkA复合物内化入胞内;NGF/p-TrkA在细胞内的分布具有细胞周期性特征;NGF/p-TrkA可通过多靶点作用模式调控U251细胞的生物学行为。上述多靶点分布模式为研制NGF修饰的抗肿瘤靶向药物提供了细胞生物学基础。