祛湿化瘀方通过调节AMPK活性改善高脂饮食诱导的实验性脂肪肝肝脏脂肪代谢

目的:研究祛湿化瘀方对高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝AMPK蛋白活性及其相关脂肪代谢靶蛋白活性的影响,以探讨该方防治实验性脂肪肝的作用机制。方法:采用高脂饲料饮食诱导大鼠脂肪肝模型,造模大鼠给予高脂饮食4周后,按随机数字表随机分为模型组及祛湿化瘀方组,分别灌胃给予饮用水及中药祛湿化瘀方4周。实验8周末取材后观察:1)肝组织三酰甘油(Triglyceride,TG)、游离脂肪酸(Free Fatty Acid,FFA)含量,2)肝组织病理变化(HE染色、油红染色),3)肝组织腺苷酸活化的蛋白激酶(AMP-Activated K inase,AMPK)及磷酸化AMPK、肝组织总蛋白及核蛋白固醇调节元件结合蛋白-1c(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1c、SREBP-1c)、肝组织总蛋白及核蛋白碳水化合物反应元件结合蛋白(Carbohydrate Response Element Binding Protein、ChREBP)含量、肝组织乙酰辅酶A羧化酶(Acety1 Co A Carboxylase,ACCase)及磷酸化ACC蛋白含量,4)肝组织AMPKα1、AMPKα2、SREBP-1、ACCα、SREBP-1c及ChREBP基因表达水平。结果:1)模型组肝组织TG、FFA含量显著升高,肝组织出现明显大泡样脂肪变性;模型组肝组织AMPK蛋白磷酸化水平降低、核蛋白SREBP-1与ChREBP表达增加、ACC蛋白磷酸化水平降低蛋白活性升高。2)祛湿化瘀方组肝组织TG、FFA含量较模型组显著降低,肝组织炎症及脂肪变性程度减轻;祛湿化瘀方能显著升高肝组织AMPK、ACC蛋白磷酸化水平、降低核蛋白SREBP-1及ChREBP含量。结论:祛湿化瘀方通过调节AMPK活性及其相关靶蛋白活性改善高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝肝脂肪代谢,这可能是该方有效防治实验性脂肪肝的重要作用机制之一。     

柔肝固肠方改善慢性酒精性肝损伤大鼠肠道通透性的机制研究

目的:从肠道紧密连接及黏附连接角度探讨柔肝固肠方改善慢性酒精性肝损伤大鼠肠道通透性的作用机制。方法:Lieber-De Carli酒精液体饲料饲养6周诱导大鼠慢性酒精性肝损伤模型。30只SD雄性大鼠,随机分无酒精液体饲料对照组(对照组,n=10)和酒精液体饲料造模组(n=20),造模第4周将造模组大鼠随机分模型组(n=10),柔肝固肠方组(n=10),并开始灌胃给柔肝固肠方或蒸馏水直至6周末,取材前3.5 h各组以10 mg/kg的内毒素(LPS)灌胃。取材后检测:1)血清AST、ALT活性变化;2)通过门脉血浆内毒素含量测定判断小肠通透性变化;3)小肠组织电镜超微结构观察;4)小肠紧密连接蛋白ZO-1、Occludin蛋白与mRNA表达变化;5)小肠黏附连接蛋白β-Catenin和E-Cadherin蛋白表达。结果:1)柔肝固肠方可显著降低模型大鼠显著升高的AST水平(P<0.05);2)柔肝固肠方可降低模型大鼠显著升高的小肠通透性,柔肝固肠方组血浆内毒素含量显著低于模型组;3)电镜结果显示柔肝固肠方可显著改善Lieber-De Carli酒精饲料喂养大鼠小肠黏膜表面微绒毛局灶性减少、变短、稀疏,排列不规则,同微绒毛相连的细胞终末网变性模糊等病理改变;4)柔肝固肠方可显著升高酒精饲料喂养肝损伤大鼠小肠组织紧密连接蛋白ZO-1、Occludin蛋白与mRNA表达及黏附连接蛋白β-Catenin和E-Cadherin蛋白表达。结论:柔肝固肠方通过改善肠上皮紧密连接及黏附连接改善慢性酒精性肝损伤大鼠肠道通透性改变。     

系统生物学——非酒精性脂肪性肝病中医药研究的新途径

系统生物学是系统论与生物学的结合。它包括基因组学、蛋白质组学、转录组学和代谢组学等。利用系统论的思维方法研究生命现象,从多学科、多视角认识中医证候和中医药疗效机制,为中医研究提供了重要的方法学基础和技术条件;系统生物学与中医学系统观和整体观念的核心思想不谋而合。因此,将系统生物学作为非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的现代中医药研究平台和支点,必将加速中医药防治NAFLD的现代化研究,也为中医药研究NAFLD 提供新思路和新途径。     

以晨起血痰,血性鼻涕为主要症状的慢性牙周炎一例

患者男性，65岁。因左下后牙脚疼来诊治疗。检查：为全冠修复的无髓牙，松动Ⅲ°，倾侧龈红肿，牙周袋达根尖。进一步作全口牙周检查，发现全口牙龈中度肿胀，G1为2，PL1为3，龈裂，牙周袋探诊深度。询问病史，患者自1981年起经常出现晨起血痰或血性鼻涕，在外院多次检查，曾怀疑为扁桃体、副鼻窦疾患,血小板减少甚至癌症等。每年查痰癌细胞，多次进行血液系统检查，甚至作CT，核磁共振等检查，均未能确诊．患者思想负担沉重。1989年在外院口腔科作过牙周治疗，但因不彻底．未见效果。根据临床检查和病史分析，认定其患者有慢性牙周炎。为…     

侧枝根管的处理原则和方法

侧枝根管是主根管的细小分校,常与主根管呈接近垂直的角度,贯穿牙本质和牙骨质,通向牙周膜。侧枝根管也常称为副根管或侧副根管。侧枝根管可出现在根分叉(髓室底、根上1/3),根中1/3和根尖1/3。根尖端主根管常发生分歧现象,(?)为根尖分歧。完全的根尖分歧常称为副根管,可看作是侧根管的一种特殊类型。侧枝根管的发生率自从Hess于1921年报告根管具有分枝现象以来,陆续对侧枝根管的发生率做过一些解剖学的研究。     

慢性肝病湿热证与肠道微生态的关联性

湿热证是常见临床证候,伴见特定胃肠道症状,提示湿热证患者潜在独特的肠道微生态特征,阐释湿热证的物质基础和病理机制对于阐释中医证候的内涵具有重要意义。现以常见慢性肝病为例,提出湿热证肠道微生态的研究要立足于临床,设立好对照,通过同病异证、异病同证的比较探求湿热证的特性和共性;并借助无菌小鼠菌群移植等现代科技手段,探讨肠道微生态与湿热证候的因果关系。以期抛砖引玉,为证候研究探索有效方法。     

肝肾阴虚证与病毒性肝炎、肝炎后肝硬化关系之探讨

肝肾阴虚证是病毒性肝炎、肝炎后肝硬化的重要证候之一。(1)肝肾阴虚证的辨证;(2)病毒性肝炎、肝炎后肝硬化的诊断;(3)病毒性肝炎、肝炎后肝硬化肝肾阴虚证的病因病机;(4)肝肾阴虚证与病毒性肝炎的病情、病程有关;(5)肝肾阴虚证贯穿于肝炎后肝硬化的始终。     

健脾活血方抗内毒素诱发大鼠急性肝损伤的主效应中药筛选验证及药理作用环节点分析

目的:探索中药复方"健脾活血方"中抗内毒素攻击作用的主效应中药及其主要药理作用环节点。方法:采用均匀设计法及尾静脉注射内毒素诱导的大鼠肝损伤模型,以血浆TNF-α含量为指标筛选主效应中药,并再次以该模型验证其药效;进一步检测肝组织CD68、CD14、TLR4、P-IκB蛋白表达及LBP、TLR2、TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达。结果:健脾活血方中抗内毒素攻击的主效应中药为枳壳、白芍、泽泻、五味子的组合;主效应中药可显著降低大鼠血浆TNF-α含量;主效应中药可显著降低大鼠肝组织CD68、CD14、TLR4、P-IκB蛋白表达,且其降低肝组织CD68蛋白有优于健脾活血方的优势;主效应中药可显著降低LBP、TLR2、TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达,均有优于全方的优势。结论:枳壳、白芍、泽泻、五味子组合是健脾活血方中对抗内毒素诱发大鼠急性肝损伤的的主效应中药;主效应中药抗内毒素攻击的主要药理环节在于抑制肝脏库普弗细胞的活化。     

中药组分复方“BZL”的筛选及其对实验性脂肪肝大鼠的作用

目的：运用均匀设计方法,从“祛湿化瘀方”中的5 个中药组分或成分中筛选出中药组分复方“BZL”,并验证其对实验性脂肪肝大鼠的作用疗效。方法：采用高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝模型,将“祛湿化瘀方”中5 种有效组分或单体（绿原酸、栀子苷、姜黄素、虎杖苷、白术多糖）作为研究对象,运用均匀设计方法进行分组设计,并且灌胃给药4 周,筛选指标为肝组织甘油三酯（TG）含量,通过均匀设计和回归分析而筛选出中药组分复方“BZL”方。再以同样的脂肪肝动物模型,用母方“祛湿化瘀方”和罗格列酮作为对照,测定实验大鼠的肝组织TG 含量和血清ALT 活性变化,观察其肝组织病理变化（HE 染色和油红O 染色）,并进行Ridit 分析,以此来验证其作用疗效。结果：经过筛选,从而得到回归方程：Y=15.083X1+5.321X2-5.186X3-16.157X4+9.35X5+17.667X3X4-8.422X1X2-6.617X3X5+16.571 （X1 绿原酸、X2 虎杖苷、X3 白术多糖、X4 栀子苷、X5 姜黄素）,根据此方程,当绿原酸、白术多糖、栀子苷取最大剂量时出现降TG 最佳效应,表明对肝组织TG 含量抑制作用最佳组分组合为白术多糖（X3）、栀子苷（X4）、绿原酸（X1）组合（即“BZL 方”）;在相同的高脂饮食诱导的脂肪肝大鼠模型中,筛选出的中药组分BZL 均能可显著降低其肝组织TG 含量和血清ALT 活性（P＜0.01）,明显改善大鼠肝脏的脂肪变性。结论：通过均匀设计方法筛选出来的中药组分复方“BZL”方有显著防治高脂肪饮食诱导大鼠肝脂肪沉积和损伤的作用。     

瘦素与肝纤维化

瘦素（leptin）是1994年首次通过定向克隆技术成功克隆的一种代谢性激素,由肥胖（OB）基因编码,人OB基因位于7号染色体的长臂（7q31．3）,由3个外显子和2个内含子构成。瘦素是一种分泌蛋白,由167个氨基酸组成,相对分子质量为16000。瘦素必须与相应受体（ob—R）结合才能发挥作用。目前发现ob-R有a、b、c、d、e和f6种亚型,其中ob-Rb为长型受体,也是功能性受体,ob—Re是可溶性受体,与循环中的瘦素形成复合物,通过调节游离与结合的瘦素比例可改变其生物学活性,其余为短型受体叫。