新生大鼠心肌细胞原代培养分离方法的改进

目的 探索并改进乳鼠的心肌细胞原代培养方法。方法 以混合消化酶（0．08％胰蛋白酶加0．04％～0．06％Ⅱ型胶原酶等量加入的混合液）消化心肌组织,差速贴壁分离纯化后,加入5-溴脱氧尿嘧啶抑制成纤维细胞分裂增殖。结果 本方法培养的心肌细胞12h后即出现单个细胞搏动,2d～5d可见明显搏动的心肌细胞和心肌细胞团,成纤维细胞无明显增殖。结论 本方法是一种较为理想的乳鼠心肌细胞原代培养方法。     

TNF-α+308、TNF-α+489基因态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究

目的探讨TNF-α+308、TNF-α+489基因态性及环境因素与慢性阻塞性肺疾病(COPD)发生的相关性。方法根据患者的年龄、性别,病例组与对照组按1∶2配对设计的病例对照研究方法,调查180例住院COPD患者和360例健康体检者的基本信息,并应用PCR-RFLP技术检测研究对象的TNF-α+308、TNF-α+489的基因型,采用Logistic回归分析TNF-α+308、TNF-α+489基因型和吸烟因素与COPD的关系及其两者间的交互作用。结果①病例组与对照组患者的年龄、性别差异无统计学意义,吸烟、肺癌家族史、FEV1/Pre、FEV1/FVC 2组间差异有统计学意义。②病例组TNF-α+308的等位基因A频率为15.6%,对照组为8.2%,等位基因A发生COPD的风险OR值为2.06(95%CI(1.39,3.05));病例组与对照组的TNF-α+489的等位基因A频率分别为16.1%和6.9%,TNF-α+489等位基因A发生COPD的风险OR值为2.55(95%CI(1.71,3.09))。③以显性遗传模式估计,TNF-α+308(+)联合吸烟因素发生COPD的OR值5.36(95%CI(2.81,10.23)),TNF-α+489(+)联合吸烟因素发生COPD的OR值为8.18(95%CI(4.08,16.38))。④TNF-α+308联合TNF-α+489(+)发生COPD的OR值为4.02(95%CI(1.89,8.52)),高于TNF-α+308、TNF-α+489基因型独立作用。结论 TNF-α+308、TNF-α+489基因多态性与COPD相关,与吸烟因素存在相加正交互作用。TNF-α+308、TNF-α+489基因多态性可增加吸烟患者发生COPD的风险。     

环氧合酶-2蛋白在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义

环氧合酶 2 (ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ 2 ,ＣＯＸ 2 )是前列腺素生物合成过程中的一个重要限速酶 ,它将花生四烯酸代谢成各种前列腺素产物。近年研究表明 ,ＣＯＸ 2在多种肿瘤中过度表达。ＣＯＸ 2与卵巢肿瘤的关系国内外报道尚少。本研究应用免疫组织化学 (组化 )法进行ＣＯＸ 2蛋白检测 ,以探讨ＣＯＸ 2蛋白表达与卵巢浆液性肿瘤发生、发展的关系及其临床意义。一、材料与方法1 标本来源 :选择中国医科大学第一、第二临床学院2 0 0 0年 3月至 2 0 0 1年 1月间收治的患者 6 4例。其中 ,卵巢浆液性肿瘤 (良性肿瘤 9例 ,交界性肿瘤 9例…     

我国已上市治疗用单抗类产品分析

目的：分析我国已上市治疗用单抗类产品存在的差距,明确努力方向。方法：基于我国已上市治疗用单抗类产品批准数据进行统计分析和对比分析。结果：对我国单抗类药物的发展历程、上市时间、批准品种以及我国已批准上市的单抗类药物与FDA单抗类药物的批准情况进行了对比梳理。结论：单抗类药物在生物技术制药中占有重要地位,并逐渐成为生物医药领域发展的主要方向。我国单抗类药物中国产品种与进口品种存在差距,整体上与FDA存在差距。但随着近年来的改革,发展潜力及势头良好。     

抗肿瘤金属配合物药物及其药理作用的研究进展

自从顺铂作为抗肿瘤药物被开发利用以来,无机金属配合物药物已成为新的一类抗癌化疗药物。该文参阅国内外相关文献,介绍抗肿瘤铂及其它金属配合物药物的抗肿瘤机制及其药理作用,对抗肿瘤金属配合物药物的研究进展进行综述。     

高胆固醇血症患者LDL—R基因第4外显子XspI位点多态性与血清Hs-CRP的关系及意义

目的探讨高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体（LDL．R）基因第4外显子XspI住点多态性与血清超敏C反应蛋白（Hs-CRP）的关系及意义。方法用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术结合DNA测序技术检测1250例高胆固醇血症患者和1200例健康体检者LDL．R基因第4外显子的XspI酶切位点多态性;按基因型分组,用动态定时散射比浊法检测各基因型Hs—CRP的浓度,对两者关系进行分析;同时检测各组的血脂指标。结果与健康对照组比较,高胆固醇血症组血清Hs-CRP明显升高,HDL-C降低（P均〈0．05）;根据LDL—R第4外显子处是否有XspI酶切位点,分为X＋X＋、X＋X-、X-X-3种基因型,X-X-组、X＋X-组、X＋X＋组血清Hs—CRP水平依次升高（P均〈0．05）;多元线性回归分析显示,基因型和胆固醇水平是Hs—CRP水平的独立影响因素。结论高胆固醇血症患者血清Hs-CRP水平升高,LDL-R基因X＋X＋基因型Hs—CRP水平升高,LDL-R基因第4外显子的XspI位点多态性可能通过影响Hs-CRP水平促进高胆固醇血症。     

基于老年人生理心理特征的互联网医疗应用适老化改造设计

聚焦老年用户的使用体验,通过分析老年人的生理心理特征,提出了互联网医疗应用的可感知性、可操作性、可理解性、兼容性、安全性、可及性和可依赖性7个适老化改造需求。参照国家工业和信息化部发布的相关适老化通用设计规范,从前端应用和后端支持两方面提出了涵盖操作界面、设备兼容、系统安全、应用渠道拓展、服务支持系统建设的互联网医疗应用适老化改造设计思路。     

基于WGCNA鉴定子宫颈鳞状细胞癌CD8+T细胞浸润相关的生物标志物

目的 应用生物信息学的方法构建促进子宫颈鳞状细胞癌（CSCC）中CD8+T细胞浸润的相关基因共表达网络,并鉴定出相应的预后生物标志物。方法 应用加权基因共表达网络分析（WGCNA）和PPI网络探索TCGA数据库中CSCC的基因表达数据,并筛选出与CD8+T细胞浸润相关hub基因,系统分析hub基因的免疫特征及预后价值。结果 通过WGCNA和PPI网络分析鉴定出10个hub基因（CCL5、CCR5、CD2、CD3D、CD3E、CD8A、CXCR3、IFNG、PDCD1、PRF1）。在TISIDB数据库中查询10个基因与免疫细胞之间的相关性,发现这些基因的表达与免疫细胞,尤其是CD8+T细胞显著正相关。通过Kaplan-Meier分析、单因素和多因素Cox回归分析验证后选择CD3E作为CSCC预后生物标志物。基因集富集分析（GSEA）显示CD3E在细胞黏附分子、趋化因子信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用和T细胞受体信号通路显著富集。结论 通过生物信息学验证,CD3E被确定为CSCC免疫治疗的潜在生物标记物和免疫治疗靶点。     

治伤巴布剂影响辣椒素受体表达的机制探讨

目的 探讨治伤巴布剂影响辣椒素受体（vanilloid receptor 1, VR1）表达的机制。方法 SD大鼠随机分成4组,分别为：正常组、模型组、治伤巴布剂组、云南白药膏组,每组9只,每组分3个亚组。正常组大鼠足底贴敷空白膏剂;其余3组大鼠采用经典福尔马林溶液进行造模,造模成功后用所需膏剂对应外敷于各组大鼠足底。各组大鼠的3个亚组分别给予足底连续贴敷相应膏药1、3、7 d。在3个时间点取L3～L6节段背根神经节（dorsal root ganglia, DRG）,运用RT-PCR、Western blot检测各组大鼠在3个时间点DRG中VR1的表达水平,运用免疫组化法检测各组大鼠在3个时间点足底肌肉中神经生长因子（nerve growth factor, NGF）以及DRG中p-p38MAPK蛋白的表达水平。结果 与模型组相比,治伤巴布剂组和云南白药膏组中不同时间点VR1的mRNA和蛋白水平均下降（P<0.05）,足底肌肉中NGF水平和DRG中p-p38MAPK蛋白水平均下降（P<0.05）;与云南白药膏组比较,治伤巴布剂组不同时间点VR1的mRNA和蛋白水平均下降（...