PARP1对黑素瘤细胞克隆形成的影响及其作用机制

目的:探究聚二磷酸腺苷核糖多聚酶1［poly (ADP-ribose) polymerase 1,PARP1］对黑素瘤细胞克隆形成的影响及可能的作用机制。方法:在黑素瘤A2058细胞系中利用小干扰RNA干涉PARP1表达水平,利用平板克隆形成实验观察干涉PARP1对黑素瘤细胞克隆形成的影响。提取PARP1干涉片段及对照片段转染细胞的总RNA进行全基因组表达谱芯片检测。Realtime RT-PCR对部分差异性基因进行验证。应用DAVID数据库对差异性基因进行GO及KEGG通路富集分析。Realtime RT-PCR对富集分析结果中可疑靶基因进行验证。结果:干涉PARP1表达可显著抑制黑素瘤细胞克隆形成。全基因组芯片结果显示干涉PARP1表达可引起128个基因表达上调,77个基因表达下调。通过Realtime RT-PCR对部分差异表达基因进行验证,结果表明与芯片筛选结果一致。GO和KEGG富集分析结果显示PARP1调控的差异性表达基因在生物学功能及参与的信号通路中存在部分交集,即MAPK信号通路及其正向调控机制。双特异性磷酸酶5（DUSP5）作为MAPK通路中的抑制分子,Realtime RT-PCR证实干涉PARP1可促进其表达水平升高。结论:干涉PARP1可能通过促进DUSP5表达从而抑制MAPK信号通路活性,进而发挥抑制黑素瘤细胞克隆形成的作用。     

胆道术后并发胰腺炎及重型化的原因初探

胆道手术后并发急性胰腺炎及重型化的原因尚不十分清楚.我们于1990至1999年收治8例胆道术后并发胰腺炎的患者,报告如下.     

周围神经损伤及其转基因治疗

修复周围神经损伤的技术迄今已得到很大的改进,但神经功能仍停留在部分恢复的状态,人们对神经损伤修复中所涉及的神经、化学因素及其相互作用的复杂关系所知尚少。已经证明许多神经营养因子在神经功能的发育、维持和调节等作用中至关重要,这些因子包括神经生长因子和近年来分离鉴定出的神经营养因子家族成员。本文综述了周围神经损伤和再生的过程及雪旺细胞和各种营养因子的作用．并展望病毒载体及细胞介导的DNA链技术在周围神经损伤治疗中的潜在用途。     

周围神经损伤与再生研究的回顾与展望

骨科临床中四肢开放性损伤伴有周围神经损伤的发生率为59／5,修复后功能完全恢复仅占10％～259／5(Luridborg),因此如何修复周围神经损伤,促进周围神经损伤后的再生就成为骨科基础与临床研究的重要课题。周围神经损伤修复与再生的研究已经有100多年历史,早在1873年,Hueter就开始用外膜缝合进行损伤神经的端端     

一期后路全脊椎切除治疗胸腰椎恶性肿瘤

目的:探讨一期后路全脊椎切除治疗胸腰椎恶性肿瘤的可行性、安全性和疗效。方法:回顾分析2004年5月至2009年12月复旦大学附属中山医院骨科收治的40例胸腰椎恶性肿瘤患者的临床资料。均采用一期后路全脊椎切除治疗,其中分块切除23例,整块切除17例。比较两组患者手术时间、术中出血量、术中输血量和临床治疗效果等。结果:分块切除组手术时间4.8～7h,平均5.8h,术中出血量1500～5000ml,平均2705ml,术中输血量平均1769ml,术后随访6～68个月,平均18个月,随访期内死亡5例,8例肿瘤复发,骨水泥陷入椎体和移位各1例;整块切除组手术时间6.5～8h,平均7.3h,术中出血量1000～2000ml,平均1678ml,术中输血量平均1087ml,随访期间未发现肿瘤复发,除1例钛网轻度移位外,余内固定可靠。两组术后VAS评分有明显下降,与术前相比有显著性差异(P0.05),两组间VAS改善无统计学差异(P0.05)。两组在手术时间、术中出血量和术中输血量比较有显著性差异(P0.05)。脊髓神经功能Frankel分级32例患者均有1级以上恢复。结论:一期后路全脊椎切除治疗胸腰椎恶性肿瘤安全有效。整块切除法在术中出血量、术中输血量和局部复发率方面明显优于分块切除法。     

小细胞肺癌伴皮肌炎、低钠血症1例

1 临床资料 患者,男,60岁,主因皮肤红斑4个月,意识淡漠一天于2009年1月2日入院.缘于4个月前,患者无明显诱因出现眼睑部、面部皮肤红斑,逐渐加重,扩及颈部、胸部、腹部及双上肢,曾在当地以"过敏性皮炎"治疗,皮肤症状时轻时重.于一个月前,出现咳嗽、咳痰,无痰中带血,查胸片示左肺门肿块,后到北京协和医院检查,胸部CT:左肺中心型肺癌,纵隔淋巴结肿大.气管镜取病理:左肺小细胞癌.病变皮肤活检,确诊为皮肌炎.由于家属不配合,未予治疗.     

小细胞肺癌伴皮肌炎、低钠血症1例

1临床资料 患者,男,60岁,主因皮肤红斑4个月,意识淡漠一天于2009年1月2日入院。缘于4个月前,患者无明显诱因出现眼睑部、面部皮肤红斑,逐渐加重,扩及颈部、胸部、腹部及双上肢,曾在当地以“过敏性皮炎”治疗,皮肤症状时轻时重。于一个月前,出现咳嗽、咳痰,无痰中带血,查胸片示左肺门肿块,后到北京协和医院检查,胸部CT：左肺中心型肺癌,纵隔淋巴结肿大。     

高校未婚研究生避孕知识现状及服务需求研究

目的:进一步了解在校未婚研究生避孕知识状况和需求,为高校开展相关教育与服务提供有益的参考。方法:对北京市某高校1 461名未婚研究生在避孕药具的利用、避孕知识的获取、普及生殖健康知识与服务需求情况等方面进行问卷调查,结果:有23.0%的对象承认有婚前性行为,81.9%的婚前性行为采取了避孕措施,未采用避孕措施的主要原因是:偶然发生,认为不会怀孕(40.0%);没有计划,未准备药具(35.1%);觉得使用麻烦,影响情趣(16.7%)。88.7%的对象认为在学校开展避孕节育、生殖健康知识教育是必要的。结论:研究生渴望获得避孕节育与生殖健康知识的教育与服务,高校相关部门应通力配合,共同为研究生提供切合实际的、全面的生殖健康教育与服务。     

EphB1通过PI3K/AKT信号通路促进食管鳞状细胞癌EC-9706细胞增殖、迁移、侵袭并抑制其凋亡

目的:研究促红细胞生成素产肝细胞受体B1(erythropoietin-producing human hepatocellular receptor B1,EphB1)对食管鳞状细胞癌EC-9706细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并探索其可能的作用机制。方法:qRT-PCR法分析40对食管鳞状细胞癌手术患者的癌组织及邻近正常组织中EphB1表达情况,并分析其临床特征。在EC-9706细胞中分别转染si-EphB1 RNA和oe-EphB1 RNA及其阴性对照。通过qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验检测转染效率;CCK-8实验分析EphB1对细胞活力的影响;Hoechst 33258染色和流式细胞学实验检测细胞凋亡;划痕愈合实验及Transwell侵袭实验明确细胞迁移及侵袭能力;蛋白免疫印迹实验检测EphB1蛋白、增殖相关蛋白［增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）］、凋亡相关蛋白［Bad、Bcl-2、Caspase 3 及剪切型-Caspase 3（cleaved-Caspase 3）］、侵袭转移相关蛋白［基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2）、Snail、波形蛋白(Vimentin)、N-cadherin、E-cadherin］以及PI3K/AKT信号通路相关蛋白（PI3K、AKT、p-AKT）的表达水平。结果:EphB1在食管鳞状细胞癌组织及细胞系中高表达(P均＜0.05),EphB1的表达水平与食管鳞状细胞癌患者的TNM分期、有无淋巴结转移和远处转移具有显著相关性(P均＜0.05)。与对照组相比,通过细胞转染技术沉默EphB1和过表达EphB1使EC-9706细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显降低或增强,并诱导或抑制细胞凋亡(P均＜0.05)。在蛋白水平上,si-EphB1和oe-EphB1处理EC-9706细胞48 h后,增殖相关蛋白PCNA蛋白表达水平分别显著降低或增加（P均＜0.05）,并分别增加或降低促凋亡相关蛋白Bad、cleaved-Caspase 3的表达水平（P均＜0.05）,下调或上调抗凋亡蛋白Bcl-2、Caspase 3的蛋白表达（P均＜0.05）,抑制或促进侵袭转移相关蛋白MMP-9、MMP-2、Snail、Vimentin、N-cadherin的蛋白活性,但却上调或下调 E-cadherin的表达水平（P均＜0.05）。同时,Western blotting实验结果还证实EphB1可诱导食管鳞状细胞癌EC-9706细胞中通路蛋白PI3K、p-AKT的活性增强（P均＜0.05）。结论:EphB1可能通过调控PI3K/AKT信号通路促进食管鳞状细胞癌EC-9706细胞的增殖、迁移及侵袭,并抑制其凋亡。     

纵行神经束内微电极的制作与动物试验

目的 :应用自制的纵行神经束内微电极插入家兔坐骨神经的神经束内进行实验 ,测定电极的刺激和记录特性 ,探讨自制电极的应用价值。方法 :将纵行神经束内微电极分别作为记录电极记录运动诱发电位和感觉神经活动电位 ,作为刺激电极记录肌电 ,并以神经束内针状电极作为对照。结果 :神经束内微电极记录到运动诱发电位和感觉神经活动电位平均波幅分别为 4 .2 4± 1.13mV和 4 78± 173μV ,与神经束内针状电极记录信号的波幅间的差别无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,并可以作为刺激电极在肌肉处记录到混合相肌电。结论 :自制的纵行神经束内微电极可以作为刺激和记录电极对神经束刺激或记录神经束的电活动。