葛根素通过miR-490/E3泛素连接酶抑制非小细胞肺癌细胞生长、侵袭和迁移

目的 研究葛根素抑制非小细胞肺癌细胞生长、侵袭和迁移的机制。方法 培养A549细胞,采用不同浓度的葛根素处理细胞。CCK-8法检测细胞增殖抑制率(IR);qRT-PCR法检测细胞中miR-490和E3泛素连接酶(DTL)mRNA的表达情况;构建miR-490过表达对照组、miR-490过表达模拟物组、miR-490沉默阴性对照组、miR-490沉默组,采用双荧光素酶报告分析miR-490和DTL的靶向关系。将20 μmol/L葛根素处理过的细胞分为对照组、葛根素组、葛根素+miR-490阴性对照组、葛根素+miR-490沉默模拟物组、葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL阴性对照组、葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL沉默质粒组。Transwell法检测细胞迁移和侵袭。Western blot检测上皮细胞-间充质转化进程标志因子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 随着葛根素浓度升高,细胞抑制率逐步升高,差异有统计学意义(F=105.375,P<0.001);且miR-490表达逐步升高(F=32.919,P<0.001),DTL表达逐步降低(F=116.120,P<0.001)。双荧光素酶报告分析显示,与miR-490过表达对照组相比,miR-490过表达模拟物组荧光素酶活性显著降低(t=7.762,P=0.016),miR-490 mRNA表达显著升高(t=13.319,P<0.001),DTL mRNA表达显著降低(t=7.415,P=0.002);与miR-490沉默阴性对照组相比,miR-490沉默组细胞中miR-490表达显著降低(t=9.523,P=0.001),DTL mRNA的表达显著升高(t=11.305,P<0.001)。Western blot检测结果显示,与miR-490过表达对照组相比,miR-490过表达模拟物组的DTL蛋白表达显著降低(t=7.953,P=0.001);与miR-490沉默阴性对照组相比,miR-490沉默组细胞中的DTL 蛋白表达显著升高(t=10.552,P<0.001)。经葛根素处理后,与对照组相比,葛根素组细胞miR-490表达显著升高(t=10.255,P=0.001),DTL mRNA表达显著降低(t=6.682,P=0.003);与葛根素+miR-490阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物组细胞中miR-490表达显著降低(t=10.995,P<0.001),DTL mRNA表达显著升高(t=12.478,P<0.001);与葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL沉默质粒组细胞miR-490表达差异无统计学意义(t=1.081,P=0.341),DTL mRNA表达显著降低(t=14.321,P<0.001)。与葛根素+miR-490阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物组DTL蛋白表达显著升高(t=11.423,P<0.001);与葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL沉默质粒组细胞的DTL蛋白表达显著降低(t=12.080,P<0.001)。与对照组相比,葛根素组细胞增殖能力显著降低(F=129.27,P<0.001);与葛根素+miR-490阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物组细胞增殖能力显著升高(F=75.12,P<0.001);与葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL沉默质粒组细胞增殖能力显著降低(F=52.59,P<0.001)。与对照组相比,葛根素组细胞迁移能力显著降低(t=8.963,P=0.001);与葛根素+miR-490阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物组细胞迁移能力显著升高(t=12.117,P<0.001);与葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL沉默质粒组细胞迁移能力显著降低(t=12.934,P<0.001)。与对照组相比,葛根素组细胞侵袭能力显著降低(t=4.710,P=0.009);与葛根素+miR-490阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物组细胞侵袭能力显著升高(t=13.264,P<0.001);与葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL沉默质粒组细胞侵袭能力显著降低(t=13.476,P<0.001)。与对照组相比,葛根素组E-cadherin蛋白表达显著升高(t=7.137,P=0.002),N-cadherin(t=8.828,P=0.001)和Vimentin蛋白表达(t=6.594,P=0.003)显著降低;与葛根素+miR-490阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物组细胞中E-cadherin蛋白表达显著降低(t=12.376,P<0.001),N-cadherin(t=13.436,P<0.001)和Vimentin蛋白表达(t=11.467,P<0.001)显著升高;与葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL阴性对照组相比,葛根素+miR-490沉默模拟物+DTL沉默质粒组E-cadherin蛋白表达显著升高(t=13.081,P<0.001),N-cadherin(t=10.835,P<0.001)和Vimentin蛋白表达(t=11.862,P<0.001)显著降低。结论 葛根素可能是通过上调miR-490表达,降低其靶基因DTL的表达,抑制非小细胞肺癌的生长、侵袭和迁移。     

阿司匹林在预防心血管疾病中的使用误区

本文主要简述阿司匹林在预防心血管疾病中的使用误区. 1在预防心血管疾病中使用率低 应该使用阿司匹林的情况下不使用阿司匹林作为卓有成效的心脑血管疾病用药,阿司匹林在我国冠心病患者中使用率仅为14.38％,脑卒中患者使用率不到14％,而美国冠心病住院患者阿司匹林使用率已超过95％[1].目前,许多国家的心血管防治指南中均建议在10 a冠心病风险为6％～10％的人群中应用阿司匹林进行一级预防,我们国家的建议是≥10％的人群要服阿司匹林进行一级预防.一级预防是指已经有高血压的危险因素存在,但尚未发生高血压的患者,控制危险因素防止高血压的发生所采取的预防措施,具有多项心血管高危因素的人群应当服用阿司匹林进行一级预防.(1)高血压患者,血压控制稳定;(2)Ⅱ型糖尿病患者,年龄大于40岁,合并一项高危因素(早发心血管病家族史、吸烟、高血压,超重与肥胖、蛋白尿、血脂异常)[2];(3)有三项及以上高危因素者(年龄在50岁以上、血脂异常、吸烟、肥胖、早发心血管病家族史).     

李杲阴火理论研究探析

通过对李杲阴火理论相关文献进行查阅、整理与分析,发现近五年来,医家对"阴火"本质的研究,主要有妄动的相火,内生之火以及气虚发热三种观点。病因方面,医家大多认为阴火产生的始动因素为饮食不节、劳倦过度与七情内伤,产生的根源为脾胃亏虚和元气不足。病机方面,主要有气火失衡伴升降失常以及脏腑功能失调两种观点。症状方面,医家大多认为阴火为病,元气不足与火热亢盛之象并存。治法方面,医家大多从补脾胃、升清阳、泻阴火三个方面入手,以补中益气汤、升阳散火汤及补脾胃泻阴火升阳汤化裁使用。临床方面,阴火理论多运用于糖尿病、发热及消化类疾病的诊治,肺、心、肾、五官、皮肤等相关疾病亦有涉及。通过探讨李杲阴火理论的研究进展,以期达到丰富李杲学术内涵、拓展临床诊疗思路,提高临床疗效的目的。     

两种β-内酰胺类抗生素联用的合理性分析

β-内酰胺类抗生素是一类最常用的抗菌药物,他们的化学结构中均有β-内酰胺环,可分为:青霉素类、头孢菌素类及非典型β-内酰胺类。临床工作实践中为了扩大抗菌谱常采用以β-内酰胺类抗生素为基础的联合用药来治疗单一抗生素不能控制的混合感染或病因未明的严重感染,为了降低药物的毒副作用、减少耐药性的产生、获得协同作用等目的时也常联合用药[1]。比较常用的是β-内酰胺类抗生素与氨基糖甙     

张元素《医学启源》"暑热"类方剂服用特点探讨

本研究立足于易水学派创始人张元素的《医学启源》,对有关“暑热”类方剂的服药护理方法进行深入剖析,并由此发现张元素立足病机关键确立服药方法、用方服药尊古不泥古、关注小儿用药护理等特点,为进一步认识与挖掘易水学派学术思想,丰富与完善中医用药护理内涵提供一定的文献依据。     

探讨易水学派张元素《医学启源》“湿土”类方剂服用特点

张元素创立的易水学派是中医重要学派之一,学术影响深远,为中医药的发展作出了重要贡献。笔者立足于张元素的《医学启源》,对有关“湿土”类方剂的服药护理方法进行深入剖析,通过对“湿土”类方剂的主治、剂型、送服溶液、服药时机、服用量、注意事项等方面全面梳理其服药护理特点,为脾失健运所致的水饮停聚诸证提供中医用药护理的理论依据,以期丰富与完善中医方剂服药护理之内涵。     

《内经》对痴呆的认识探析

本研究从《内经》中挖掘与痴呆核心症状遗忘相关的内容,并对其进行分析与研究,认为善忘多见于情志与神志疾病中,可由盛怒不止、忧思结聚等情志变化引起,且多与五脏藏神之肾藏志、脾藏意的功能异常相关;善忘与心藏象的形质关系密切,且由于“心高”阻滞心肺之窍,使官窍闭塞不利而导致;善忘的起病还与针刺失宜导致的气血运行逆乱有关。总之,善忘病机关键,一为心火亢盛、心气不足或心阳不振等心脏功能失调;二为肠腑不通、清阳不升,致心肺失养、气血不荣,“神气不能相周”而失用。本研究丰富了中医学对痴呆的理论认识,为临床诊疗提供有据可循的文献资料。     

易水学派李杲“升补”思想对老年痴呆防治的启示

老年痴呆,又称阿尔茨海默病(AD),已成为危害公共卫生的重大难题,从中医古籍挖掘对老年痴呆的认识与治法是当前中医研究亟待解决的问题。本研究以金元时期易水学派代表医家李杲所论治疗“健忘”的诸方为入手点,通过扎实有据的文献考据研究,对李杲“升补”思想进行了溯源,认为其源于《黄帝内经》,承于易水学派张元素,并形成了以“升补”思想指导处方用药的鲜明特点。对于健忘,李杲以脾胃不足、清阳不升为论,以升阳风药与补益脾胃之药合用,临床常以升麻、柴胡、防风、羌活与人参、甘草、黄芪等药进行治疗,而现代研究所证明的AD起于“肠道菌群失调”之说,为李杲之“升补“思想治疗AD提供了有力的佐证。     

门诊药房药患纠纷原因分析及对策

目的为防范药患纠纷,提高药学服务质量。方法从现实存在的问题分析药患纠纷产生的原因。结果和结论医院管理者应加强制度建设,制订应急措施,提高服务质量,防范药患纠纷。     

骨折术后疼痛患者的护理体会

骨折患者心理状态与一般患者相比具有不同的心理特点、不同的生理、心理需求,尤其是不能面对事实,心理表现异常。临床护士不但要有扎实的护理专业知识,熟练的操作技术,丰富的临床实践,同时还必须具备全面的心理学知识,了解不同层次、不同职业、不同年龄患者的心理状态。骨折患者术后第一感觉是疼痛。疼痛是整个人体复杂的心身感受,是一种具有高度个人特征的主观体验,心理因素直接影响疼痛的程度,如对疼痛的认识、注意力、情绪和意志。疼痛不仅使患者感受痛苦,剧痛还能引起生理功能紊乱,甚至休克。骨折术后患者的疼痛一般是可预料的,也几乎是人人发生的。疼痛可导致患者情绪恶劣、烦躁不安、紧张易怒、血压升高等不良影响。还可使患者有意识地改变体位,限制患者咳嗽、深呼吸及早期活动,易致肺炎、褥疮等并发症。因此,有效地止痛是骨折术后患者护理的重要内容之一[1]。传统解除或减轻疼痛的方法是药物治疗,随着心理-社会-生物医学模式的产生,随着心理护理学的发展,我们发现心理护理是消除和缓解疼痛行之有效的方法。护士要用同情、体贴、关怀等主动接受患者的方式,取得患者的信任,使患者冷静地接受事实,进行耐心细致的解释开导,排除他们的顾虑,积极配合治疗。