腺病毒介导的Cbfa1基因转移对NIH3T3细胞的调节作用

目的探讨腺病毒介导的核心结合因子a1(core binding factor a1, Cbfa1)基因转移对NIH3T3细胞的调节作用.方法含有Cbfa1基因的重组腺病毒转染NIH3T3细胞,RT-PCR检测成骨标志基因骨钙素(osteocalcin, OCN)、Ⅰ型胶原(type Ⅰ collagen)、骨唾液蛋白(bone sialoprotein, Bsp)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)、Cbfa1的表达.Western blot检测Cbfa1的表达,免疫细胞化学染色检查OCN的表达.结果 NIH3T3细胞在Cbfa1基因转移后RT-PCR检测到OCN、Bsp、AKP、 type Ⅰ collagen基因的表达, Western blot检测到Cbfa1蛋白的表达,免疫细胞化学染色检测到了OCN蛋白的表达.结论腺病毒介导Cbfa1基因转移NIH3T3细胞后出现成骨表型.     

下颈椎屈伸运动节律的实验研究

目的：观察和测量下颈椎节段屈伸运动节律。方法：采用５具新鲜成人男性尸体的颈椎标本,动态Ｘ线摄片,测量各屈伸状态各节段的屈伸角度。结果：Ｃ４～５,Ｃ５～６活动范围最大,屈伸运动节律也最大,而且在半屈—中立—半伸范围内的活动度较半屈—全屈和半伸—全伸的活动度大。结论：颈椎病变动态Ｘ线摄片中,可根据各节段尤其是Ｃ４～５、Ｃ５～６节段的屈伸运动节律是否正常作为一诊断参考依据     

经皮内镜椎间盘切除术治疗慢性椎间盘源性腰痛的初步研究

目的 评价经皮内镜腰椎间盘切除术(percutaneous endoscopic lumbar discectomy,PELD)治疗经保守治疗无效的慢性椎间盘源性腰痛的初步临床效果. 方法 2007年6月-2008年5月,收治52例经保守治疗无效的慢性腰痛患者,经低压椎间盘造影诊断为椎间盘源性疼痛.其中男15例,女37例;年龄29～46岁,平均38.2岁.慢性腰痛病程6～110个月,平均32.1个月.经MRI检查显示共有108个T2像低信号的"黑椎间盘",按信号异常椎间盘节段分布:L2、3 3个,L3、417个,L4、548个,L5～S140个.经造影显示为阳性,并行透视或术中CT证实椎间盘后方纤维环撕裂的有79个椎间盘,行PELD治疗.于术前、术后1个月及末次随访时行疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS),末次随访时按改良Macnab标准评价1临床疗效. 结果 每节段手术时间21～36 min,平均30.7 min;术后住院时间2～5 d,平均3.7 d.术后无感染、血管神经损伤等并发症发生;5例术后当天出现一过性神经麻痹,未行特殊处理,末次随访时症状消失.52例均获随访,随访时间3～15个月,平均7.3个月.腰痛VAS评分术前为(7.34±1.52)分,术后1个月及末次随访时分别为(3.62±0.92)分和(1.57±0.48)分,与术前比较差异均有统计学意义(P<0.01).根据改良Macnab标准,优11例,良23例,可13例,差5例,优良率65.38%. 结论 初步研究提示PELD安全有效,可用于治疗经保守治疗无效的慢性椎间盘源性腰痛患者.     

经皮内窥镜下腰椎间盘切除术治疗极外侧型腰椎间盘突出症

目的：评价经皮内窥镜下腰椎间盘切除术（PELD）治疗极外侧型腰椎间盘突出症的可行性和有效性。方法：2006年10月～2007年12月采用PELD治疗极外侧型腰椎间盘突出症患者17例，其中椎间孔内型11例，椎间孔外型6例；男10例，女7例，年龄27～69岁，平均41．3岁。于术前、术后1个月及末次随访时进行视觉模拟疼痛评分（VAS），末次随访时按改良Macnab标准评价临床疗效。结果：手术时间45～110min．平均68min。术后住院时间2—7d，平均4．6d。无手术并发症及转为开放手术者。随访2～13个月，平均6．7个月．术前VAS评分为7．85&#177;1．13分，术后1个月及末次随访时分别为2．24&#177;0．57分和1．16&#177;0．31分，与术前比较均有显著性差异（P〈0．01）。改良Macnab标准评价临床疗效优6例，良9例，可2例。结论：经皮内窥镜下腰椎间盘切除术治疗极外侧型腰椎间盘突出症可获得良好的近期效果．且安全、微创。     

Minimally invasive strategies and options for far-lateral lumbar disc herniation

Objective： To investigate the surgical procedures, options and surgical indications for far-lateral lumbar disc herniation between three different minimally invasive procedures.
Methods： From January 2000 to October 2006, 52 patients with far-lateral lumbar disc herniation （29 males and 23 females, with the average age of 41.5 years） were treated with minimally invasive procedures. All the patients were assessed by X-ray and CT. Some were given additional myeography, discography, Computerized tomography myelography （CTM） and MRI examination. Yeung Endoscopy Spine System （YESS）, METRx and X-tube procedures were performed in 25, 13 and 14 cases, respectively. All patients were followed up for a mean period of 13.5 months. Clinical outcomes were assessed by visual analog score （VAS） and Nakai criteria.
Results： The results indicated that the three procedures could significantly improve the radiating leg symptoms （P〈0.05）. The postoperative overall excellent and goodrates of YESS, METRx and X-tube procedures were 84.0%, 84.6% and 92.8% respectively, with no statistical difference among three groups （P〉0.05）. The YESS procedure had several advantages including shortest operation time, simplest anesthesia and least trauma as compared with the other two procedures, especially for simple type I far-lateral lum- bar disc herniation. METRx procedure was specially suitable for simple type II. And the procedure of posterior endoscopic facetectomy, posterior lumbar interbody fusion and unilateral pedicle screw instrumentation with X-tube was designed for far-lateral disc herniation combined with degenerative lumbar instability.
Conclusion： Minimally invasive strategies and options should be determined by different types of far-lateral lumbar disc herniation.     

核心结合因子α1基因转染NIH3T3成纤维细胞成骨表型转化

目的：观察细胞因子诱导成骨的共同信号分产核心结合因子α1基因转染NIH3T3成纤维细胞，其成骨表型转变的可能性。方法：实验于2003-10／2004-10在解放军第三军医大学新桥医院骨科中心实验室完成。采用脂质体转染技术行核心结合因子α1基因转染NIH3T3成纤维细胞，成骨标志基因Ⅰ型胶原、骨钙素、骨唾液蛋白、碱性磷酸酶、核心结合因子α1 mRNA的表达采用反转录．聚合酶链反应检测，骨钙素的表达采用免疫细胞化学染色检测，Cbfa蛋白的表达采用Western blot检测。结果：①NIH3T3成纤维细胞经核心结合因子α1基因转染后出现骨钙素、骨唾液蛋白、碱性磷酸酶的表达，Ⅰ型胶原表达增强，说明在转录水平有成骨标志基因的表达。②免疫细胞化学染色检测到了骨钙素的表达，显示NIH3T3细胞已发展为成骨细胞。③Western blot检测到了核心结合因子α1蛋白的表达，证实了成纤维细胞发生了表型的改变。结论：核心结合因子α1基因转移NIH3T3成纤维细胞改变了成纤维细胞向成骨表型转化，增加了成骨细胞数量，使成骨能力增强成为可能。     

破伤风毒素C端片段与心肌营养素-1融合蛋白表达、纯化与靶向神经元逆向运输及神经营养活性鉴定

目的 在BL21(DE3)大肠杆菌中表达破伤风毒素C端片段(TTC)与心肌营养素(CT)-1融合蛋白并纯化.探讨TTC转导结构域对CT-1的靶向神经元逆向运输活性与CT-1的神经营养活性.方法 异丙基-B-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导BL21(DE3)大肠杆菌表达CT-1/TTC融合蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)与WB法鉴定融合蛋白表达.制备SD大鼠坐骨神经损伤模型,分别经神经再生室、肌肉注射给药,自由放养1周后处死,4%多聚甲醛灌注固定,取脊髓L4～L6腰膨大标本,冰冻切片,免疫组织化学检测.制备新生6～7 d龄sD大鼠坐骨神经损伤模型,肌肉注射CT-1/TTC融合蛋白,自由放养1周后处死,4%多聚甲醛灌注固定,取L4～L6腰膨大标本,冰冻切片,尼氏染色计数脊髓前角运动神经元.结果 原核表达目的 蛋白CT-1/TTC表达量占全菌蛋白总量的15%,以可溶性蛋白为主.通过谷胱甘肽S-转移酶(GST)标签亲和纯化获得2.7 g/L的CT-1/TTC重组融合蛋白.免疫组织化学于脊髓腰膨大检测到CT-1/TTC融合蛋白.坐骨神经损伤后,脊髓L4～L6腰膨大前角运动神经元计数较CT-1/TTC融合蛋白处理组减少,存活率下降.结论 基因重组CT-1/TTC蛋白在大肠杆菌中获得了表达和纯化,所获得的融合蛋白有靶向性脊髓神经元细胞的活性和对损伤后运动神经元的神经营养活性.     

汶川地震后送伤员并发相关感染的诊治体会

目的 探讨地震伤员伤口感染及并发气性坏疽的规律以及诊治方法.方法 分析汶川地震后送伤员的受伤部位、程度、合并症、并发症、诊断、治疗方法及结果等.结果 本组震后送伤员147例,其中骨折117例,占79.6%,包括多发性骨折49例,开放性骨折12例;合并多发性软组织挫裂伤31例,挤压伤9例.进行伤口分泌物涂片镜检、细菌培养和药物敏感试验41例,发现有细菌生长的感染共27例,其中软组织挫裂伤清创术后感染13例,开放性骨折术后感染7例,截肢术后感染3例,筋膜切开减压术后感染3例(气性坏疽1例),原发性气性坏疽1例.2例气性坏疽伤员均行截肢术以救治生命.术后所有伤口均痊愈.入院后截肢2例,无死亡者.结论 地震伤具有战伤的多数特点,应按战伤分类处理.骨折伤员占地震伤的大多数,其中开放性骨折感染率高,现场急救应以清创为主,保持伤口开放引流,以利后期救治.     

脊髓损伤专业方向的研究生教学

脊髓损伤专业方向研究生需要掌握医学、神经科学、生物学多学科和技术方面的知识.本文简述作者在脊髓损伤专业方向研究生教学中有关课程学习、临床实践和科学实验多方面的教学体会.     

显微内镜腰椎间盘髓核摘除术疗效预测因素的初步研究

目的 以社会统计资料、病程、临床症状、神经体征和影像表现五个方面作为显微内镜椎间盘髓核摘除术(MED)治疗腰椎间盘突出症效果的预测因素，并评价其价值。方法 对198例首次接受单节段MED腰椎间盘突出症患者，进行前瞻性观测研究，患者平均年龄37．6岁(24～62岁)。制定腰椎间盘突出症选择MED手术的客观评价系统，以社会统计资料、病程、症状、神经体征和影像表现的各项分值计算总分，单项最高3分，满分34分。通过随访检查评价临床结果．进行结果和预测分值间的比较。结果 术后平均随访12．5个月，采用改良MacNab标准评定临床结果，152例(76，8％)患者达优，34例(17．2％)良，8例(4％)可，4例(2％)差。优组患者MED手术疗效预测因素评分平均27．1分，良组23．3分，可组19．8分．差组14．2分．各组间比较差异显著(P＜0．01)。结论 根据预测计分。MED应选择预计结果优或良的患者，其他患者需再次考虑手术指征。