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71.
目的:为测定肾移植术后患尿中粒酶B和穿孔素mRNA水平构建其相应的竞争模板。方法:取肾移植术后患尿样,通过RT—PCR反应,获得含特定酶切位点的粒酶B和穿孔素片段,酶切粒酶B和穿孔素片段,分别在其间插入44bp和36bp外源性DNA片段,连接入PGEM4载体。结果:经酶切鉴定及DNA测序证实,外源性DNA正确插入粒酶B及穿孔素片段,竞争模板引物结合区域与靶序列一致,所构建粒酶B竞争模板与粒酶B片段相差29bp,所构建粒酶B竞争模板与粒酶B片段相差36bp,所构建新载体适合作为定量PCR的竞争模板。结论:基因重组方法可成功构建用于定量PCR的竞争模板,方法简便可行。 相似文献
72.
近 5 0年来 ,激素治疗作为治疗前列腺癌的一种方法 ,在大多数病例中取得了显著疗效。对于LHRH类药物的研究取得了诸多进展 ,对LHRH及其受体自身的分布与功能也有多方面的发现 ,本文将国外近年来对LHRH及其受体的基础研究与前列腺癌的病理联系、临床上的药物匹配、与外科治疗及放疗的相互作用、新制剂及副作用等方面进行文献回顾 相似文献
73.
目的:采用前房灌注加压法制造视网膜缺血再灌注模型,用抗Ⅳ型胶原、层粘连蛋白和纤维粘连蛋白抗体对大鼠视网膜微血管基膜的细胞外基质进行免疫组化反应,观察视网膜微血管基膜的细胞外基质和视网膜细胞线粒体钙含量的变化。方法:实验在福建医科大学临床应用解剖学研究室完成。90只大鼠随机分为正常对照组和缺血1h再灌注1h组、缺血1h再灌注2h组、缺血2h再灌注1h组、缺血2h再灌注2h组,每组18只。缺血再灌注各组采用提高眼压法造成视网膜缺血后,恢复眼压形成血流再灌注,每组取8只大鼠视网膜组织用抗Ⅳ型胶原、层粘连蛋白和纤维粘连蛋白抗体标记,测定阳性染色平均单位面积。每组取10只大鼠测定视网膜细胞线粒体钙浓度的变化。结果:90只大鼠均进入结果分析。①视网膜微血管基膜的Ⅳ型胶原、层粘连蛋白和纤维粘连蛋白阳性染色平均单位面积:缺血再灌注各组比正常对照组小(P〈0.01)。②视网膜微血管基膜阳性产物呈不连续线状的数量:缺血再灌注各组比正常对照组多(P〈0.01)。③视网膜细胞线粒体钙含量:缺血1h再灌注1,2h组,缺血2h再灌注1,2h组均高于正常对照组[(21.82&;#177;1.97)μg/g,(40.45&;#177;3.92)μg/g,(43.68&;#177;4.01)μg/g,(68.76&;#177;5.37)μg/g,(13.37&;#177;1.23)μg/g,(F=6.634~8.987,P〈0.01)]。随缺血再灌注的延长,大鼠视网膜线粒体钙含量逐渐增高。结论:缺血再灌注可引起视网膜细胞线粒体钙含量升高,并可能激活细胞外的蛋白酶,降解微血管基膜细胞外基质的主要成分-Ⅳ型胶原、层粘连蛋白和纤维粘连蛋白,破坏血视网膜屏障,导致视网膜组织结构和功能损伤。 相似文献
74.
糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子和一氧化氮的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
背景 糖尿病患者外周血中的血管内皮生长因子
(vascular endothelial growth factor,VEGF)和一氧化氮存在正相关,但糖尿病时视网膜组织的
VEGF和一氧化氮是否发生变化尚不清楚.目的 探讨糖尿病大鼠视网膜
VEGF和一氧化氮的变化及其在糖尿病视网膜病变( diabetic retinopathy,DR)发生发展过程中的作用.设计
随机对照实验研究.地点和材料 选择健康成年 SD大鼠(上海 SIPPR-BK实验室提供,合格证
152),在福建医科大学动物实验室喂养.实验在福建医科大学解剖学与组织胚胎学实验室完成.干预
随机分成正常对照组、糖尿病 1月、糖尿病 3月和糖尿病 5月组,每组
20只.除正常组外所有大鼠均一次性腹腔注射链脲佐菌素(
streptozotin,STZ)诱发糖尿病模型.应用免疫组织化学方法观察各组视网膜组织
VEGF的表达情况,并检测各组视网膜组织中一氧化氮合酶( nitric oxide
synthase,NOS)活性和一氧化氮含量变化.主要观察指标 ①各组视网膜组织
VEGF的表达情况.②各组大鼠视网膜组织中 NOS活性和一氧化氮含量变化.结果
正常大鼠视网膜 VEGF免疫阳性反应仅见于内核层细胞, NOS和一氧化氮含量分别为(
36.17± 1.83) μ kat/g 和 (36.77± 2.33) μ mol/g; 3个月时,糖尿病大鼠视网膜
VEGF表达增强, NOS和一氧化氮含量分别为 (115.19± 31.5) μ kat/g 和 (68.34±
5.46) μ mol/g,与正常组比较,差异有显著性意义( t=7.43,8.15;P《 均 0.01); 5个月时,糖尿病大鼠视网膜表达进一步增强,
NOS和一氧化氮含量分别为 (72.35± 16.34) μ kat/g 和 (50.62± 3.01) μ mol/g,与糖尿病
3月组比较,差异有显著性意义( t=4.76, 4.19;P均 《 0.05).结论 糖尿病大鼠视网膜
VEGF的过度表达和 NOS活性、一氧化氮含量的变化在 DR的发生发展过程中起重要作用. 相似文献
75.
背景:多尿期肾移植患者围手术期的水及糖电解质的平衡与及时的营养支持治疗对移植肾脏的功能恢复至关重要。
目的:探讨。肾移植围手术期的水电解质平衡维护及营养支持的方法和时机。
设计、时间及地点:回顾性临床分析,于2003-06/2007-06在解放军第四军医大学西京医院泌尿外科完成。
对象:接受同种异体。肾移植的慢性肾功能衰竭患者96例,男59例,女37例,年龄17~67岁,平均35.7岁。
方法:以移植肾动、静脉血流开放时间为分界点,总结患者围手术期的生理特点。术前维持患者生命体征平稳,手术开始时即开始匀速输血,移植动、静脉血管开放前积极补充清蛋白,开始排尿且尿量大于每小时100mL,即开始循环补循环补液配方,简化的肾移植术后多尿期输液。
主要观察指标:术后1d检测患者血肌酐、尿素氮、电解质、血糖和尿液。
结果:术后最初12~16h。患者尿量在260~1200mldh,平均520mL/h。术后测血常规显示,8例出现轻度低钠血症,占8.3%。3例出现高钾,于肾功能恢复后正常,1例发生低钾,补钾治疗及肾功能恢复后正常。血氯无异常变化。21例血糖高于正常,占21.9%,激素冲击结束后恢复正常。其他患者电解质、血糖均正常,无低钙、镁者。尿比重均在1.010~1.015之间。
结论:移植。肾动、静脉血流开放前的输液应以胶体如浓缩红细胞、血浆及清蛋白为主,多尿期应规律及时的补充水及电解质,适当的营养支持有助于吻合口愈合,尿量稳定后应预防代谢性酸中毒。 相似文献
76.
背景:环孢素A与他克莫司是肾移植后临床广泛应用的免疫抑制剂。目的:观察他克莫司和环孢素A对肾移植后炎性细胞因子和血脂的影响。方法:选择首次接受同种异体肾移植后患者112例,随机分为环孢素A组和他克莫司组,移植后分别给予环孢素A+吗替麦考酚酯+糖皮质激素三联疗法与他克莫司+吗替麦考酚酯+糖皮质激素三联疗法。结果与结论:他克莫司组的1年人/肾存活率、治疗逆转率高于环孢素A组(P<0.05),急性排斥反应发生率低于环孢素A组(P<0.05);移植后1个月及1年的血清白细胞介素2,6,8和血糖水平高于移植前(P<0.05),低于环孢素A组(P<0.05),血清白细胞介素4,10低于移植前(P<0.05),高于环孢素A组(P<0.05);移植后1个月的血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇高于移植前(P<0.05),但低于环孢素A组(P<0.05);移植后1年的血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇低于环孢素A组(P<0.05)。说明他克莫司可通过抑制肾移植后炎性细胞因子释放,改善糖脂代谢等途径降低患者的排斥反应,提高肾移植的存活率。 相似文献
77.
背景:环孢素A与他克莫司是肾移植后临床广泛应用的免疫抑制剂。
目的:观察他克莫司和环孢素A对肾移植后炎性细胞因子和血脂的影响。
方法:选择首次接受同种异体肾移植后患者112例,随机分为环孢素A组和他克莫司组,移植后分别给予环孢素A+吗替麦考酚酯+糖皮质激素三联疗法与他克莫司+吗替麦考酚酯+糖皮质激素三联疗法。
结果与结论:他克莫司组的1年人/肾存活率、治疗逆转率高于环孢素A组(P < 0.05),急性排斥反应发生率低于环孢素A组(P < 0.05);移植后1个月及1年的血清白细胞介素2,6,8和血糖水平高于移植前(P < 0.05),低于环孢素A组(P < 0.05),血清白细胞介素4,10低于移植前(P < 0.05),高于环孢素A组(P < 0.05);移植后1个月的血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇高于移植前(P < 0.05),但低于环孢素A组(P < 0.05);移植后1年的血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇低于环孢素A组(P < 0.05)。说明他克莫司可通过抑制肾移植后炎性细胞因子释放,改善糖脂代谢等途径降低患者的排斥反应,提高肾移植的存活率。 相似文献
78.
川芎嗪对糖尿病大鼠视网膜自由基损伤的保护作用 总被引:5,自引:2,他引:5
目的 探讨川芎嗪对糖尿病视网膜病防治作用的机制。方法 用链尿佐菌素(STZ)制人和糖尿病人鼠模型,分为糖尿病未治疗组、川芎嗪治疗组,分别于第4周、第12周测定视网膜组织超氧化物歧化酶(OSD)活性和丙二醛(MDA)的含量。结果 第4、12周对照组和川芎嗪治疗组视网膜组织SOD活性显著高于糖尿病未治疗组,MDA含量显著低于糖尿病未治疗组。结论 川芎嗪能够提高糖尿病大鼠视网膜组织SOD活性,增强其抗氧化能力,减少MDA的产生,从而对糖尿病视网膜病的自由损伤起一定保护作用。 相似文献
79.
大鼠实验性肾缺血/再灌注引起肾小管上皮细胞凋亡及其与Bcl-2,Fas/FasL表达变化的关系 总被引:12,自引:0,他引:12
目的:探讨大鼠实验性肾缺血再灌注引起肾脏损伤、肾小管上皮细胞凋亡情况及其与Bcl—2,Fas/FasL表达变化的关系.方法:建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,在不同时间点处死动物取肾组织石蜡包埋切片,HE染色分析肾组织病理损伤程度,用TUNEL法标记检测肾小管上皮细胞凋亡的变化,SABC免疫组化方法检测Bcl—2,Fas与FasL蛋白表达的变化.结果:缺血再灌注后肾组织的病理损伤主要发生在肾小管,肾小管上皮细胞凋亡指数增加,且随缺血再灌注时间延长而进一步上升,48h达高峰(P<0.05).Bcl—2蛋白在对照组呈弱阳性表达,缺血30min,60min后再灌注0h有少量表达,再灌注24,48及72h呈阳性表达,48h达高峰(P<0.05),并以远曲小管为主.Fas,FasL蛋白在对照组呈阴性表达,缺血30,60min后再灌注0h有少量表达,再灌注24,48及72h呈阳性表达,以72h时达高峰(P<0.05),多表达在远曲小管.HE染色可见肾缺血再灌注后各组均有不同程度的肾小管上皮组织片状坏死灶,以近曲小管为主,坏死灶周围有炎性细胞浸润.结论:肾缺血再灌注可诱导肾小管上皮细胞凋亡,Bcl—2,Fas/FasL系统可能在肾小管上皮细胞凋亡过程中发生着重要的调控作用. 相似文献
80.
目的 探讨FGD4/细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)通路对良性前列腺增生(BPH)-1细胞增殖、凋亡的影响。方法 选取2017年8月至2018年8月空军军医大学西京医院收治的行尿道前列腺电切术的42例BPH患者的BPH组织作为前列腺增生组,选择同期同一医院收治的行膀胱癌根治术的25例膀胱癌患者的正常前列腺组织作为正常前列腺组;并体外培养BPH-1细胞,分为对照组、siRNA NC组(转染siRNA NC)、FGD4 siRNA组(转染FGD4 siRNA)、Cdc42 NC组(转染FGD4 siRNA+pcDNA3.1)和pcDNA3.1-Cdc42组(转染FGD4 siRNA+pcDNA3.1-Cdc42)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织和细胞中FGD4 mRNA、Cdc42 mRNA的表达水平;采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6和IL-8水平;采用蛋白印迹(Western blot)法检测FGD4、Cdc42、B... 相似文献