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目的探讨Alzheimer病的发病机制,研究淀粉样蛋白前体(APP)酶解过程,构建含有Swedish突变的双荧光真核表达系统。方法通过聚合酶链式反应(PCR)得到蓝色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白碱基序列(YFP),生物合成含有Swedish突变的APP中间54个碱基片段(54bp),利用基因工程技术将CFP、54bp、YFP片段克隆至载体质粒pcDNA3.0中,得到重组质粒pcDNA3.0-CFP-54bp-YFP,将其转染至人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中,利用激光共聚焦显微镜观察荧光表达,检测荧光共振能量转移(FRET)。结果酶切和基因序列分析证明重组质粒构建成功;对转染细胞的荧光和FRET检测发现融合基因能够准确表达荧光,同时可以观测到FRET现象。结论含有Swedish突变的荧光融合基因的构建为探索AD的发病机制、活体观察APP裂解奠定了基础。 相似文献
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目的:评价甲状腺手术中喉返神经损伤的预防;方法:将手术治疗的甲状腺疾病患者258例分为暴露喉返神经的治疗组和不暴露喉返神经的对照组。比较两组间喉返神经损伤的发生率;结果:治疗组123例,术后出现声嘶9例;对照组135例,术后出现声嘶12例,两组比较差异无统计学意义。但在甲状腺癌,二次手术中,两组比较差异有统计学意义;结论:巨大甲状腺肿瘤、二次或多次手术及甲状腺癌应暴露喉返神经。 相似文献
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目的 研究淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)酶解过程,构建含有Swedish和APP717两种突变的荧光真核表达系统.方法 以pcDNA3.0-APP为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)得到含有APP717突变的APP最后300个碱基片段(C99);以pcDNA3.0-CFP-CaM-YFP酶切产物为模板,通过PCR分别得到编码蓝色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白(YFP)碱基序列;生物合成含有Swedish突变的APP中间54个碱基片段(54 bp).利用基因工程技术将CFP、54 bp、YFP、C99片段克隆至载体质粒pcDNA3.0中,通过酶切、PCR、测序鉴定最终得到重组质粒pcDNA3.0-CFP-54bp-YFP-C99和pcDNA3.0-CFP-54 bp-YFP,并将其转染至人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中,利用多光子共聚焦显微镜观察荧光表达,检测荧光共振能量转移(FRET)以及免疫细胞化学染色观察B淀粉样蛋白(Aβ).结果 (1)基因序列分析证明重组质粒构建成功.(2)利用多光子共聚焦显微镜观察转染细胞,显示融合基因能够准确表达蓝色和黄色荧光.(3)表达CFP-54bp-YFP的细胞有FRET现象,而表达CFP-54bp-YFP-C99的细胞中观察不到FRET现象.(4)利用多光子共聚焦显微镜发现CFP-54bp-YFP-C99转染的细胞中有YFP标记的A13产生并沉积在胞质胞膜以及细胞间隙中.(5)免疫细胞化学检测证实CFP-54bp-YFP-C99经过裂解可以产生Aβ,Aβ在细胞膜、细胞质、细胞间隙聚集沉积.结论 (1)融合基因的表达产物能够完成APP的有序裂解产生Aβ.(2)Aβ有可能产生于APP由胞质至胞膜的运输过程中.(3)研究显示C99对于APP被裂解有重要意义,可能起到信号肽样的引导定位作用.(4)在细胞外形成沉积之前,Aβ已经在细胞内聚集导致细胞形态改变. 相似文献
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多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)在育龄期妇女中的发生率为5%~10%,患者中胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的发生率高达50%.PCOS患者IR的主要原因是胰岛素受体后信号传导障碍.近十多年来,脂肪组织为内分泌器官已成为学术界的共识,瘦素(1eptin)、脂联素(adiponectin)、抵抗素(resistin1)相继被发现.这些脂肪因子与IR及PCOS之间的联系是复杂和多样化的,其相互作用的途径和机制尚未完全清楚,尚需进行进一步研究.临床已经应用罗格列酮干预PCOS患者的有关IR的治疗,在治疗同时相关脂肪因子也有变化.在PCOS发生发展的病理生理机制中,脂肪因子在PCOS中的作用有望成为研究PCOS体质量控制、生理调节等机制的新领域. 相似文献
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目的分析腹腔镜完全腹膜外疝修补术(TEP)治疗老年腹股沟斜疝的效果。方法将64例老年腹股沟斜疝患者随机分为2组,每组32例。对照组实施开放无张力疝修补术(OTFH),腹腔镜组实施TEP。比较2组的疗效。结果 2组手术时间、术中出血量、术后并发症发生率及随访期间复发率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。腹腔镜组术后24h和48 h的VAS评分低于对照组,术后住院时间短于对照组,住院费用高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 OTFH与TEP治疗老年腹股沟斜疝均有可靠效果,OTFH术后患者疼痛程度轻、恢复时间短,但费用较高。应根据患者、术者及医院的条件合理选择。 相似文献
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目的对APN排班模式应用前后的护理效果进行对比研究,探讨APN排班的优劣性。方法对照组研究对象选自2010年1月至12月,研究组研究对象选自2011年1月至12月,对照组采用传统排班方法,研究组采用APN排班模式。结果研究组护士和患儿家长满意度明显高于对照组,数据经统计学比较具有显著差异(P<0.05)。结论 APN排班可大大提高护理质量、增进护患关系、明晰护士职责、实现人性化管理,但应注意排班时人员的合理分配和工作责任的匹配。 相似文献
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目的探讨腹腔镜手术和开腹直肠癌根治术对于中低位直肠癌的临床治疗效果以及对于患者自身机体免疫功能的影响。方法选择我院从2016年1月至2018年12月收治的中低位直肠癌患者96例,随机分成两组,对照组采用开腹直肠癌根治术进行治疗,观察组采用腹腔镜手术方法进行治疗,对于两组的临床治疗效果以及机体免疫功能的影响进行对比分析。结果观察组临床治疗的各项指标以及机制免疫功能的各项指标都要优于对照组,组间数据差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对于中低位直肠癌患者采用腹腔镜手术进行治疗与开腹手术方法相比具有患者创口小、恢复速度快、患者机体免疫功能影响小等优点,是一种治疗中低位直肠癌患者的科学安全的手术方法,值得进行临床推广使用。 相似文献
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