人PCK1基因克隆及其表达载体的构建

目的构建人PCK1基因的真核表达载体。方法以人内脏脂肪细胞cDNA为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增PCK1基因编码区的全部序列,克隆入pGEM-T载体中,经限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1( )中,并进行双酶切鉴定。结果PCR扩增的特异性片段长度为1 972 bp,以此构建的pGEM-T-PCK1克隆载体,经限制性内切酶酶切证实载体中带有PCK1基因的目的片段,与GenBank中的人PCK1基因cDNA序列一致。重组质粒pcDNA3.1-PCK1经KpnⅠ/XbaⅠ双酶切后显示5.1 kb和2 000 bp左右的2个条带,证明PCK1基因已成功克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3.1( )中。结论成功构建了野生型pcDNA3.1-PCK1重组真核表达载体。     

喉罩-瑞芬太尼联合七氟醚或丙泊酚麻醉在小儿腹股沟疝修补术中的应用

腹股沟疝修补术是小儿外科常见的手术之一。过去对于此类短小手术,多采用全凭静脉注射氯胺酮为主的麻醉方式,但是因为氯胺酮的药理特性以及患儿的个体差异,容易出现气道梗阻、呼吸抑制、苏醒延迟等麻醉并发症。近年来,喉罩一瑞芬太尼联合七氟醚或丙泊酚在此类手术应用,为呼吸道管理及快速苏醒创造了便利条件。笔者通过对喉罩一瑞芬太尼联合     

虞美人花粉的化学成分

<正> 虞美人(Papaver rhoeas L.)为罂栗科罂栗属一年生草本植物。虞美人花粉具有镇定安神作用,可治咳嗽、支气管炎、百日咳等症。近年来的研究表明,其花粉既可作人体的滋补剂,又能防止肥胖病,常食花粉可延年益寿。方法与结果氨基酸组成与含量用80%乙醇回流提取脱脂后的花粉,滤出提取液并蒸干。用0.001mol/L盐酸溶解并定容至10ml,加等量磺基水杨酸除去蛋白。离心后,再用0.001mol/L盐酸定容,在美国产Backman121MB型氨基酸分折仪上检测,波长540、470nm;缓冲液pH=3.2、4.2、5.2;显色剂为茚三酮。结果见附表:     

Menin调控小鼠胚胎早期发育相关基因的研究

目的 研究1型多发性内分泌肿瘤综合征相关基因(Men1)编码的蛋白(menin)对小鼠胚胎早期发育相关基因的调控,并探讨其可能的作用机制.方法 以经丝裂霉素C处理的小鼠胚胎成纤维细胞作为滋养层细胞培养未分化的小鼠胚胎干细胞,使其体外分化形成胚胎体.RT-PCR鉴定胚胎体胚胎发育期标志基因表达;染色体免疫共沉淀结合启动子基因芯片技术检测成熟胚胎体中menin调控的下游基因,Real-Time PCR鉴定结果.结果 RT-PCR结果表明胚胎体相当于小鼠胚胎发育的早期器官形成期.基因芯片检测显示,menin能调控8 640个备选基因中的784个;基因分析显示,menin能通过多个信号通路调控下游基因,包括Wnt信号通路的1500003O03Rik、Prkca、 Fosl1、 Nfatc3、 Dvl1;TGF-β信号转导途径的Thbs1、Tgfb3、Bmp4、Smurf2;凋亡信号通路的Casp6、1500003O03Rik、Prkar1a、Ripk1、Traf2、Capn5、Endog、Myd88;MAPK信号通路的Casp6、Arrb2、Fgf15、1500003O03Rik、Map3k4、Map2k1ip1、Tgfb3、Prkca、Traf2、Dusp7、Atf2等.结论 Menin可能通过Wnt、MAPK、TGF-β、凋亡等多种信号通路对小鼠胚胎早期发育相关基因进行调控.     

健康教育在糖尿病病人护理中的应用

目前,我国糖尿病发病率已达1%～2%,且以每年0.1%的速度增长.     

风湿性多肌痛误诊为弓形虫病一例

【病例】女,51岁。因乏力、四肢僵硬疼痛2月余入院。患者缘于2个月前劳累后出现乏力,对称性肩、颈、膝、髋关节僵硬疼痛,活动受限,适当休息后稍减轻,再活动时僵痛同前。疑为关节炎,曾自服“布洛芬缓释胶囊”1粒,疼痛明显缓解,因考虑不良反应较大未再用。病后无发热、咽痛、盗汗、咳嗽、胸闷、气短症状。门诊查血白细胞11·9×109/L,中性粒细胞0·532,淋巴细胞0·399,红细胞沉降率(ESR)73 mm/h,类风湿因子阴性,抗溶血性链球菌素“O”200 U;X线颈椎、膝关节及髋关节正侧位片未见异常。查体:体温36·8℃,脉搏74/min,血压110/80 mmHg。浅表…     

PKBα/Akt1基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的 研究蛋白激酶B α亚型(PKBα,也称Akt1)基因单核苷酸多态性(SNP)与上海地区汉族人群2型糖尿病易感性的关系.方法 利用等位基因特异PCR技术对460例2型糖尿病患者及444名正常对照者(NC组)Akt1基因3个标签SNP位点rs2494743、rs2494738和rs3001371进行基因分型.结果 位点rs2494738和rs3001371的基因型分布在糖尿病组和NC组之间呈现显著性差异(均P＜0.01);rs2494738和rs3001371等位基因频率在2型糖尿病组和NC组的分布也呈现显著性差异(均P＜0.01);rs2494738的多态性与2型糖尿病发生风险呈等位基因计量效应关系.但rs2494743基因型和等位基因分布在NC组与2型糖尿病组中差异无统计学意义.单倍型分析结果显示3个单倍型频率在2型糖尿病组和NC组之间也存在显著差异(均P＜0.01).结论 在上海地区的汉族人群中,Akt1基因可能是2型糖尿病的易感基因之一;其SNP位点rs2494738和rs3001371变异可能与2型糖尿病发病相关.     

上海地区胰升糖素样肽1受体基因多态性与2型糖尿病相关

目的研究胰升糖素样肽1受体(GLP1R)基因的单核苷酸多态性(SNP)与上海地区汉族人群2型糖尿病的相关性。方法选取上海地区无亲缘关系的2型糖尿病患者360例及正常对照313名,其中糖尿病患者分为肥胖组192例(BMI>28kg/m2,且仅用口服降糖药治疗)及非肥胖组168例(BMI<25kg/m2,且用胰岛素治疗),采用等位基因特异的实时PCR,对GLP1R基因位点rs2268657进行基因分型,并通过相关分析,研究该位点与2型糖尿病的相关性。结果GLP1R基因rs2268657位点AA、AG、GG基因型频率在对照人群中分别为0.086,0.447,0.446;在非肥胖糖尿病组中分别为0.155,0.375,0.470,在肥胖糖尿病组中分别为0.109,0.500,0.391。在正常人基因型AA频率与非肥胖糖尿病组相比差异有统计学意义(OR=1.939,P<0.05),而与肥胖糖尿病组相比差异无统计学意义。结论GLP1R基因多态性位点rs2268657可能与胰岛素分泌不足为主的2型糖尿病有关。     

宝鸡市二次供水卫生状况调查及对策研讨

目的了解宝鸡市区二次供水设施的卫生状况和运行管理中存在的卫生问题,研讨性的提出加强二次供水单位管理的办法及措施。方法编制调查表对市区高层建筑进行拉网式调查并对水质进行抽检。结果宝鸡市二次供水单位在设施的设计、管理和水质方面仍存在不规范和隐患。对策二次供水单位及供管水人员应增强供水卫生安全主体责任意识和遵法守法意识,卫生监督机构应强化依法监管力度,提倡优先使用无负压供水设施。     

游离脂肪酸引起胰岛β细胞损伤机制的研究进展

游离脂肪酸(FFAs)在2型糖尿病的发生和发展中起重要作用,长期的高FFAs可损伤胰岛β细胞功能。首先,FFAs可通过使葡萄糖转运蛋白-2和葡萄糖激酶表达减少、胰岛素基因转录障碍和胰岛素原转化减少等使胰岛素生成减少。其次,FFAs还可通过诱导胰岛β细胞凋亡、抑制β细胞有丝分裂等引起细胞数目的减少。研究其作用机制对阐明糖尿病的发病机制有重要意义。