血栓通胶囊对氧糖剥夺/复氧致HUVEC细胞紧密连接损伤的改善作用

目的采用氧糖剥夺(OGD)致HUVEC细胞损伤模型,考察三七总皂苷(PNS)及其单体Rg1、Rb1对氧糖剥夺致血管内皮紧密连接损伤的保护作用。方法 HUVEC细胞接种于Transwell细胞小室,待细胞融合后,设立实验组别:正常对照组、模型组、PNS 10、20、40 mg/L组以及Rb1 13.52 mg/L、Rg1 12.44 mg/L组,于缺氧同时进行药物干预,氧糖剥夺6 h复氧24 h后,检测HUVEC内皮细胞电阻值以及内皮渗透性的变化;采用激光共聚焦显微镜,免疫荧光法检测HUVEC细胞ZO-1、claudin-5蛋白表达的变化。结果与正常对照组相比,HUVEC细胞缺氧6 h复氧24 h后内皮细胞间紧密连接电阻显著降低,细胞渗透性显著升高(P0.05)。PNS 20、40 mg/L组能够显著抑制模型组紧密连接电阻的降低,抑制HUVEC细胞渗透性的升高(P0.05)。人参皂苷Rb1能够显著升高OGD 6 h复氧24 h后内皮紧密连接电阻,降低HUVEC细胞渗透性(P0.05)。免疫荧光检测结果显示,正常对照组HUVEC细胞的ZO-1及claudin-5蛋白主要分布于细胞膜周围,排列连续,显示出内皮细胞的典型铺路石排列。缺氧6 h复氧24 h损伤后,模型组细胞边缘的紧密连接蛋白显著减少,环形结构断裂,甚至消失,细胞核内紧密连接蛋白呈增加趋势。PNS 20、40 mg/L及Rb1 13.52 mg/L可观察到细胞间紧密连接局部恢复,呈铺路石样结构。结论 PNS对缺血致血管内皮细胞间紧密连接损伤有保护作用。     

分心木镇静催眠作用探究

目的：研究分心木水提物和醇提物的中枢抑制作用,为该药后续的保健品开发、镇静催眠的临床应用提供实验依据。方法：观察分心木水提物和醇提物对30 mg·kg^-1和45 mg·kg^-1浓度的戊巴比妥钠的协同作用,探究分心木水提物和醇提物与戊巴比妥钠合用对小鼠睡眠发生率、睡眠时间和自主活动的影响。结果：分心木醇提物能显著缩短睡眠潜伏时间,有协同戊巴比妥钠的作用,能提高睡眠发生率,大幅度延长睡眠时间。分心木水提物有部分镇静催眠趋势,但无统计学意义。结论：分心木具有一定的镇静催眠作用,具有开发相应保健品的价值。     

静宁颗粒对注意力缺陷多动障碍模型大鼠注意定势转移能力的影响

目的观察注意力缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)模型大鼠注意定势转移能力变化及静宁颗粒对其的影响。方法采用自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)作为ADHD的模型大鼠,分别给予静宁颗粒(20.25、10.125、5.062 5 g/kg)、盐酸哌甲酯缓释片(利他林6.75 mg/kg)和小儿黄龙颗粒(0.937 5 g/kg),连续给药17 d进行治疗。以大鼠注意定势转移任务(Attentional set-shifting,AST)中错误次数、挖掘次数、错误率等行为学指标,评价药物的药效。结果与正常对照组比较,模型大鼠在简单辨别(SD)阶段、复杂辨别(CD)阶段、内维度转换(IDS)阶段、逆反学习(RL)阶段、外维度转换(EDS)阶段错误次数、错误率、挖掘次数均增加;与模型组比较,静宁颗粒连续给药17 d后,各剂量可降低模型大鼠错误次数、错误率、挖掘次数,改善ADHD模型大鼠注意定势转移缺陷。结论 ADHD模型大鼠具有注意定势转移缺陷,静宁颗粒可有效改善ADHD模型大鼠的注意定势转移能力。     

基于网络药理学和动物实验探讨养心生脉颗粒治疗急性心肌梗死合并抑郁症的作用机制

目的 基于网络药理学和动物实验探讨养心生脉颗粒治疗急性心肌梗死合并抑郁症的作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、中医药综合数据库（TCMID）、中国知网及SwissTargetPrediction收集养心生脉颗粒的化学成分和对应靶点,基于GeneCards和OMIM数据库检索急性心肌梗死和抑郁症靶点,韦恩图获取药物和疾病的交集靶点,采用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,导入Cytoscape 3.8.2软件绘制中药-成分-靶点网络和成分-靶点-通路网络,并利用DAVID 6.8数据库进行基因本体（GO）生物学过程和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结合网络药理学预测的核心靶点和关键通路,以冠状动脉左前降支结扎结合慢性不可预见性轻度应激（CUMS）方法制备大鼠急性心肌梗死合并抑郁模型,经养心生脉颗粒干预后,观察大鼠抑郁样行为、血流动力学变化及心肌组织病理情况,采用蛋白质印迹法（Western blot）检测关键通路靶点,验证养心生脉颗粒治疗急性心肌梗死合并抑郁的疗效及作用机制。结果 通过网络药理学共筛选出养心生脉颗粒活性成分靶点1451个,急性心肌梗死靶点615个,抑郁症靶点590个,交集靶点54个。PPI网络及KEGG富集分析显示,多个关键靶蛋白如白细胞介素-6（IL-6）、蛋白激酶B1（Akt1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血管内皮生长因子（VEGF）、IL-10、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）等,以及5-羟色胺能突触（serotonergic synapse）、TNF信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、神经营养素（neurotrophin）信号通路等与炎症关系密切。选取关键蛋白Akt1、mTOR及PI3K/Akt信号通路进行动物实验验证。结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠的糖水偏嗜度下降,游泳不动时间增加,心肌损伤程度加重,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平明显下调（P<0.05,P<0.01）;与模型组相比,养心生脉颗粒低、中剂量组糖水偏嗜度增加,心肌损伤程度明显减轻,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平上调（P<0.05,P<0.01）。结论 基于网络药理学和动物实验验证,养心生脉颗粒可能通过PI3K/Akt/mTOR信号通路逆转急性心肌梗死合并抑郁大鼠的抑郁样行为,缓解心肌组织损伤。     

祖师麻肠溶制剂对佐剂性关节炎大鼠的抗炎与镇痛作用研究

目的探讨祖师麻肠溶制剂对佐剂性关节炎大鼠的抗炎与镇痛作用。方法右后肢足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备佐剂性关节炎大鼠模型。将大鼠分为对照组、模型组、泼尼松组,及中药低、中、高剂量组,每组12只。泼尼松组灌胃以泼尼松3.2 mg/kg,中药低、中、高剂量组分别灌胃以祖师麻肠溶制剂0.396、0.792、1.584 g/kg,对照组、模型组灌胃以等体积的7.5%CMC-Na溶液。各组均连续干预12 d,于造模后第7 d、第12 d计算大鼠足跖肿胀率、50%机械缩足反射阈值(MWT)、热缩足反射阈值(TWT);末次给药24 h后ELISA法测定大鼠血清白介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,HE染色观察大鼠膝关节和踝关节病理学改变。结果 (1)与对照组比较,模型组大鼠足跖肿胀率升高(P0.01),50%MWT、TWT降低(P0.01),血清IL-6、PGE_2、TNF-α水平升高(P0.01)。(2)与模型组比较,泼尼松组和中药低、中、高剂量组大鼠足跖肿胀率降低(P0.01),50%MWT、TWT升高(P0.01),血清IL-6、PGE_2、TNF-α水平降低(P0.01)。(3)泼尼松组与中药各剂量组比较、中药各剂量组组间比较,上述指标差异无统计学意义(P0.05)。结论祖师麻肠溶制剂具有明显的抗炎、镇痛作用,可明显改善佐剂性关节炎大鼠膝关节及踝关节病理损伤。     

LPS诱导慢性支气管炎急性发作大鼠模型的建立和评价

目的 通过多次气道内雾化给药的方式建立脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）致大鼠慢性支气管炎急性发作（acute exacerbations of chronic bronchitis, AECB）模型,探讨LPS诱导慢性支气管炎急性发作的可行性。方法 将36只SD大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、复方甘草组。采用多次气道内雾化吸入LPS的方法建立大鼠AECB动物模型。采用肺功能仪评估乙酰胆碱（Ach）和组胺激发大鼠的气道高反应,肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）采用细胞计数板进行白细胞总计数,瑞氏染色法进行白细胞分类计数（分为两类：中性粒细胞、巨噬细胞）,HE、PAS、Masson染色观察肺组织的病理形态学变化,ELISA法检测BALF中白介素6 (interleukin 6, IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)含量。结果 与空白组相比,模型组大鼠注射不同剂量氯化乙酰胆碱和组胺（1∶1）混合液后气道阻力显著升高(P<0.01);BALF中白细胞总数、单...