仙台病毒HN基因核酸疫苗的构建及表达

用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)从仙台病毒cDNA中扩增出HN全长序列片段,构建HN基因的真核表达载体pVAX1-HN,用PCR法、酶切进行鉴定.将重组质粒用脂质体法转染至COS 7细胞,用流式细胞术检测抗原蛋白表达,RT-PCR法检测HN基因mRNA表达情况.发现经PCR法和酶切鉴定,目的 片段大小与预期相符,经测序目的 基因序列与GenBank公布结果一致.转染后抗原蛋白表达达到68.3%,明显高于转染前(P＜0.01),HN基因mRNA明显表达.提示成功构建核酸疫苗pVAX1-HN,并在COS 7中能够瞬时表达,为进一步进行免疫学评价奠定基础.     

基于负二项回归模型的奥密克戎感染者核酸阴转所需时间的独立影响因素研究

目的使用负二项回归模型回顾性研究奥密克戎感染者的核酸阴转所需时间的影响因素。方法纳入2022年3月1日至2022年8月20日首都医科大学附属北京地坛医院收治的304例奥密克戎感染早期的患者, 以新型冠状病毒核酸阴转所需时间为因变量, 使用负二项回归模型研究新型冠状病毒核酸阴转时间的影响因素。基于一般临床资料和实验室检查结果等因素, 首先使用单因素负二项回归模型对因素进行初步筛选, P<0.05的因素被纳入多因素建模, 随后使用逐步回归筛选变量, 依照AIC统计量确定最优模型。结果利用单因素联合构建对新型冠状病毒核酸阴转所需时间的多因素负二项回归模型, 结果显示, 男性新冠核酸阴转所需时间平均比女性短e0.107(≈1.113) d;CT提示肺炎的患者新冠核酸阴转所需时间平均比CT未提示肺炎的患者长e0.201(≈1.223) d;以感染BA.2.2毒株的患者为参照, 感染BA.2毒株的患者新冠核酸阴转所需时间平均比感染BA.2.2毒株的患者长e0.103(≈1.108) d, BA.5.2毒株的患者新冠核酸阴转所需时间平均比感染BA.2.2患者短e0.096(≈1.101) d。...     

厄贝沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导人内皮细胞产生炎症因子的影响

目的观察厄贝沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)产生炎症因子的影响,以进一步探讨AngⅡ与其诱导产生的炎症因子的关系,以及厄贝沙坦抗动脉粥样硬化(AS)可能的途径。方法Ⅰ型胶原酶法分离并鉴定HUVEC,MTT测各实验组的细胞毒性,免疫组织化学染色测HUVEC细胞间黏附分子(intercellular adhension molecule-1,ICAM-1)、酶联免疫吸附法测各组细胞上清中白介素-6(interleukin-6,IL-6)和P-选择素的含量。结果AngⅡ呈浓度依赖性诱导HUVEC中P-选择素和IL-6升高(P<0·05),0·1μmol/L的AngⅡ诱导细胞产生ICAM-1差异无显著性(P>0·05),含量为0·5μmol/L的AngⅡ在6h诱导HU-VEC产生ICAM-1达到峰值(178·02±21·55)%,在作用8h,HUVEC的IL-6含量达到峰值(598·02±31·98)pg/ml,P-选择素在12h时,含量为(2·68±0·03)ng/ml;厄贝沙坦均能显著降低AngⅡ诱导的HUVEC中ICAM-1、P-选择素和IL-6的含量(P<0·05)。结论AngⅡ能不同程度的促进HUVEC产生炎症因子,这是AngⅡ促AS形成的机制之一;厄贝沙坦通过拮抗AngⅡ1型受体,降低HUVEC产生各种炎症因子,在抗AS有巨大应用价值。     

泽泻不同提取物对SGC-7901细胞线粒体能量代谢的影响

目的 比较泽泻不同提取物对细胞线粒体能量代谢的影响。方法 分别制备泽泻水提取物(WRE)、乙醇提取物(ERE)、超临界CO₂萃取物(SFE),以SGC-7901胃癌细胞为研究对象,阳离子荧光羰花青染料JC-1染色,采用倒置荧光显微镜观察结合流式细胞仪检测3种提取物对细胞线粒体膜电位的影响;应用酶标仪检测3种提取物对琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响。结果 红色荧光减弱(或绿色荧光增强)的程度:ERE < SFE < WRE。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、WRE组、ERE组、SFE组的单阳细胞比例分别为3.5 %、14.8 %、9.8 %和17.3 %,与正常对照组比较,3组提取物单阳细胞比例均有增加,差异有统计学意义(P < 0.01),与ERE组比较,WRE组单阳细胞比例更高(P < 0.01)、SFE组单阳细胞比例最高(P < 0.01);SDH检测结果显示,SFE组对细胞SDH活性有抑制作用,而ERE组和WRE组均有不同程度的促进作用,且ERE组对SDH的促进作用大于WRE组;与正常对照组比较,ERE组和WRE组的SDH活性差异有统计学意义(P < 0.01,P < 0.05);与ERE组比较,WRE组、SFE组的SDH活性差异有统计学意义(P < 0.05)。结论 泽泻醇提物对线粒体膜电位的损害较小,对SDH活性促进作用较显著,提示泽泻醇提取物具有较明显改善线粒体能量代谢的作用。     

多位点序列分型法对梅毒螺旋体基因分型的检测

目的：通过多位点序列分型法(MLST)检测我院梅毒螺旋体（TP）的临床样本DNA基因型。方法：收集梅毒患者皮损棉拭子,提取其中的TP DNA。提取的DNA通过荧光实时定量PCR证实为TP DNA;使用MLST法对样本进行分析。结果：本研究共检测55例DNA标本,发现9种MLST分型,1.1.8分型为42例,3.2.3分型为5例,1.1.1分型为2例,24.1.8分型为1例,25.1.8为1例,1.52.8为1例,1.53.8为1例,1.1.17为1例,25.3.1为1例。其中24.1.8,25.1.8,1.52.8,1.53.8,1.1.17,25.3.1为首次报道的分型。所有分型都存在对大环内酯类药物耐药。结论：我院患者的梅毒螺旋体基因型存在多样性,其中优势分型为1.1.8,各分型都对大环内酯类药物耐药。     

多索茶碱联合雾化吸入治疗慢性阻塞性肺疾病患者的临床疗效评价

目的 探讨多索茶碱联合雾化吸入治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重患者的疗效.方法 收集我院的慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)的患者进行登记.研究对象被分为试验组和对照组.试验组采用多索茶碱与雾化吸入硫酸特布他林雾化液和布地奈德混悬液,对照组接受雾化吸入硫酸特布他林雾化液和布地奈德混悬液,持续治疗10天.比较治疗前后两组肺功能和动脉血气的差异.结果 试验组和对照组的治疗方案均可改善慢性阻塞性肺病患者的肺功能和血气(P＜0.05).与对照组相比,试验组在更明显地改善肺功能:FEV 1％、FVC％ pred、FEF％ pred和MMEF％ pred(P＜0.05).在动脉血气指数中也观察到同样的疗效:包括PaO2、SaO2和PaCO2(P＜0.05).结论 采用多索茶碱联合雾化吸入治疗可明显改善慢性阻塞性肺疾病急性加重患者的肺功能和呼吸衰竭的状况.     

215例宫颈病变患者HC2-HPV-DNA检测结果分析

人类乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）是迄今已被肯定的DNA肿瘤病毒之一,是宫颈癌的主要危险因素,第2代杂交捕获法（hybrid capture 2,HC2）是目前美国食品药品监督管理局（FDA）唯一批准可在临床应用的人乳头瘤病毒DNA检测方法,是目前临床中用于筛查妇女宫颈细胞HPV感染的常用方法之一。     

怎样使坏情绪变好

一天,我的一位朋友碰上了不顺心的事。要是在往常,他会避开人们,一直到那不愉快的情绪消失。但这一天,偏巧他与老板有一次重要会晤。因此,他决定装成另一副样子去见老板。在会晤中,他微笑着,说着笑话,扮演着一个心情愉快、性格开朗的人。使他感到惊奇的是,不多久他发现自己真的变得愉快起来,忧愁早已消散得无影无踪了。     

克服消极情绪有妙方

人的情绪有两极性,即积极情绪和消极情绪。积极情绪有：乐观、开朗、愉快、欢乐、喜悦、振奋、宁静、和谐、安全感、满足感等等;消极情绪有：悲观、忧愁、烦恼、苦闷、愤怒、憎恨、嫉妒、惊恐、失落、委屈、沮丧等等。积极情绪有利于身心健康、防治疾病、延缓衰老：消极情绪不利于身心健康,可导致疾病,减少寿命。     

核酸疫苗pVAX1-F的构建及瞬时表达

目的:构建仙台病毒核酸疫苗pVAXl-F,并在COS 7细胞中表达.方法:利用PCR法以仙台病毒cDNA为模板扩增出F基因,与pMD18-T连接,测序正确后用HindⅢ/EcoR Ⅰ双酶切,将F基因引入经同样酶切的pVAX1载体,构建pVAX1-F表达载体,用PCR法和双酶切法鉴定,并将此重组质粒通过脂质体介导转染COS 7细胞,流式细胞术检测抗原蛋白表达、RT-PCR法检测外源基因的表达.结果:经PCR法和酶切鉴定,目的片段大小与预期相符,经测序目的基因序列与GenBank(EF679198)公布结果一致.重组质粒pVAX1-F转染COS 7细胞72 h后,能够表达抗原蛋白,流式细胞术检测达到58.3%,与对照组3.6%比较差异具有显著性(P<0.01),且F基因mRNA明显表达.结论:成功构建pVAX1-F,并能够在COS 7细胞中瞬时表达,为仙台病毒F基因核酸疫苗进行免疫学评价奠定基础.