大豆异黄酮与大豆皂甙抗辐射作用的实验研究

目的 探讨大豆异黄酮和大豆皂甙对γ射线辐射损伤的防护作用。方法 实验分三批,清洁级雄性昆明小鼠,每批按体重随机分为假照射组、照射模型组、大豆异黄酮组和大豆皂甙组。各受试物组小鼠经口灌胃各组受试物,连续30d后三批小鼠除假照射组外其余剂量组用⁶⁰Co-γ射线照射剂量分别为3.0Gy、5.0Gy、7.0Gy进行一次全身照射,照射后仍然给予受试物。分别检测外周血白细胞数、骨髓有核细胞数和骨髓细胞微核率以及红细胞与肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果 给予大豆异黄酮和大豆皂甙的小鼠在照射后第3天和第14天外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、红细胞和肝脏SOD活力均高于照射模型组(P<0.05),骨髓微核率和血浆MDA水平低于照射模型组(P<0.05)。结论 大豆异黄酮和大豆皂甙均能提高受照射小鼠的抗氧化能力,在一定程度上减缓由辐射引起的外周血白细胞和骨髓有核细胞数下降,减少微核的产生,对γ射线损伤具有良好的防护作用。     

拟核结合蛋白H-NS调控副溶血弧菌vp1667的转录

目的 研究副溶血弧菌H-NS对vp1667的转录调控机制.方法 提取副溶血弧菌hns突变株(Δhns)和野生株(WT)的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对vp1667的转录调控关系;采用引物延伸实验研究vp1667的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对vp1667的调控关系;将vp1667的启动子区克隆入pHRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建LacZ重组质粒,并将该重组质粒转入Δhns和WT中获得LacZ菌株.通过LacZ报告基因融合实验研究H-NS对vp1667的调控关系.PCR扩增vp1667的启动子区序列并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)研究His-H-NS对vp1667启动子区是否具有直接的结合作用;采用DNaseⅠ足迹实验研究His-H-NS对vp1667启动子区的具体结合位点.结果与结论 引物延伸结果显示,vp1667只有一个转录起始位点T(-28)(翻译起始位点为+1),且其转录活性受H-NS的抑制;EMSA和DNaseⅠ足迹实验结果显示,His-H-NS不能结合到vp1667的启动子区,表明H-NS只能间接抑制vp1667的转录.     

副溶血弧菌QsvR ChIP-qPCR方法的建立

目的:建立副溶血弧菌QsvR的染色质免疫共沉淀-实时定量PCR(ChIP-qPCR)实验方法。方法:通过热激转化和转化结合将标记2×Flag标签的qsvR片段转入qsvR突变株(ΔqsvR)中,阿拉伯糖诱导表达QsvR-2×Flag蛋白,通过甲醛与基因组DNA进行交联形成2×Flag-QsvR-DNA复合物,将基因组DNA超声裂解为100～1 000 bp大小不等的片段,通过特异性抗原抗体反应将蛋白质-DNA复合物沉淀下来,高盐和加热解交联,回收DNA进行qPCR定量DNA,分析副溶血弧菌体内QsvR与靶基因的结合情况。结果:成功构建出实验菌株ΔqsvR/pBAD33-qsvR-2×Flag,以不加阿拉伯糖诱导为对照,经阿拉伯糖诱导菌株的aphA、opaR、exsB和vtrA的免疫共沉淀量明显较高,表明在副溶血弧菌体内QsvR与aphA、opaR、exsB和vtrA具有结合作用。结论:成功建立了副溶血弧菌QsvR的ChIP-qPCR实验方法,可用于原核生物体内蛋白质-DNA相互作用的研究。     

副溶血弧菌calR的基因敲除株与回补株构建

目的 构建副溶血弧菌calR的基因突变株和回补株,为研究CalR的功能奠定基础.方法 PCR扩增calR基因的同源臂融合片段,并直接克隆入自杀质粒pDS132中.通过接合转移的方式将重组自杀质粒转入副溶血弧菌RIMD2210633株(WT)中,利用同源重组的方法替换原始calR基因以构建calR无痕突变株(ΔcalR).PCR扩增calR的基因序列,并将其直接克隆入pBAD33质粒中,构建回补质粒.将回补质粒转入到ΔcalR中,即得回补株(ΔcalR/calR∷pBAD33).将vopN的启动子区克隆入pHRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建LacZ重组质粒,并将该重组质粒分别转入WT/pBAD33、ΔcalR/pBAD33和ΔcalR/calR∷pBAD33中,通过测定并比较3株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对vopN的调控关系.结果与结论 LacZ结果表明,CalR负调控vopN的转录,且回补株的回补效果良好,表明成功构建了副溶血弧菌calR基因的突变株和回补株,为后续对CalR的功能研究打下了基础.     

倒稠虽小，可不要乱拔

别看朱大妈都是快60的人了,还保留着儿时爱咬指甲的坏习惯。一天晚上睡前,朱大妈发现大拇指边上出现个小倒刺,碰着还有点疼,老人家一咬牙,把倒刺直接拔了。第二天早上醒来,朱大妈感觉手指有点疼,一看大拇指甲边红了一圈,到医院一看,医生说她这是拔倒刺引起的“甲沟炎”。小小倒刺咋会拔出甲沟炎呢？     

倒刺虽小,可不要乱拔

别看朱大妈都是快60的人了,还保留着儿时爱咬指甲的坏习惯.一天晚上睡前,朱大妈发现大拇指边上出现个小倒刺,碰着还有点疼,老人家一咬牙,把倒刺直接拔了.第二天早上醒来,朱大妈感觉手指有点疼,一看大拇指甲边红了一圈,到医院一看,医生说她这是拔倒刺引起的"甲沟炎".小小倒刺咋会拔出甲沟炎呢?     

血液透析抢救急性重度氟乙酰胺中毒13例报告

我院于1996年3月～1998年7月采用血液透析(HD)方法成功地抢救13例急性重度氟乙酰胺中毒患者,现报告如下:1 临床资料1.1 一般资料:13例中男5例,女8例.年龄27～55岁.中毒原因:自杀9例,误服4例,均为口服中毒,自杀者剂量约为10g～15g,误服者约5g～20g,服毒至入院时间,1～2小时6例,3～4小时5例,6小时以上2例.临床表现:13例患者均有不同程度的头昏、乏力、恶心、呕吐、呼吸困难、烦躁不安、反复抽搐、昏迷,6小时以后入院的2例均有皮下出血点及肝、肾、心肌损害,4小时内入院的11例中1例有皮下出血点.1.2 治疗方法:(1)常规反复彻底洗胃、导泻,用蛋清保护消化道粘膜,清洗皮肤污染,输液、利尿,用阿托品0.5mg～1.0mg肌注,止吐及减少分泌物,用安定针解痉,以及用能量合剂、B族维生素对症及支持治疗;(2)血液透析:13例患者均于入院洗胃后或洗胃补液同时积极准备,尽快行HD治疗.我院采用的血泵是乐山八达医疗器械厂生产的BD-Ⅱ型透析机,透析器是美国Baxter公司生产的AC·110空心纤维透析器,用醋酸盐透析液.每例患者的透析液总量为16000ml～24000ml,平均20000ml,     

不同培养条件下鼠疫菌PhoP/PhoQ的自调控模式研究

目的 研究鼠疫耶尔森菌PhoP/PhoQ在不同培养条件下的自调控关系.方法 PCR扩增YPO1635启动子区DNA序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,构建LacZ重组质粒,进而将该重组质粒转入鼠疫菌野生株(WT)和phoP突变株(ΔphoP)中,通过测定二者中β-半乳糖苷酶活性差异来判定PhoP对YPO1635的调控关系.提取WT和ΔphoP的总RNA,采用引物延伸实验研究phoP的转录起始位点,并根据产物的丰度判断PhoP对phoP的调控关系.结果 LacZ结果表明,在低Mg2+TMH和BHI培养基中,PhoP能激活YPO1635的转录,而在高Mg2+TMH中,PhoP对YPO1635的转录无调控作用.引物延伸结果显示,phoP有两个转录起始位点G(-90)和A(-118)(分别记为P1和P2,翻译起始位点为+1),在低Mg2+ TMH中,PhoP能激活P1的转录,而对P2无调控作用;在高Mg2+TMH中,PhoP对二者均无调控作用;在BHI中,PhoP对二者的转录均具抑制作用.结论 PhoP/PhoQ的自调控关系随周围环境的变化而表现出不同的模式,这有利于鼠疫菌快速适应外界生存环境的改变.     

咳嗽变异性哮喘62例误诊分析

咳嗽变异性哮喘(ＣＶＡ)是支气管哮喘的一种特殊类型,本文分析和讨论了被误诊、误治的62例ＣＶＡ的误诊原因及教训。1　临床资料1.1　一般资料:误诊患者中,男26例,女36例,年龄18～65岁平均32岁,病程最短2月,最长达3年,大多数在半年至2年之间,全部病例均符合:①无明显诱因持续性咳嗽2个月以上。②支气管激发试验或支气管扩张试验阳性。③抗生素和止咳药治疗无效,而支气管扩张剂或肾上腺皮质激素治疗有效。④体格检查无阳性体征,胸片示心肺正常[1]。1.2　误诊疾病:急性支气管炎30例,48%;慢性支气管炎16例,264%;慢性咽炎8例,13%;过敏性支气管炎…