金粉蕨素对甲萘醌损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的: 探讨金粉蕨素对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法: 以甲萘醌损伤人脐静脉内皮细胞,作为氧化损伤模型;采用MTT法,测定内皮细胞的生长抑制率;用硝酸还原酶法测定培养液中NO₂^-／NO₃^-含量;以Westernblot方法检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性及小凹蛋白(caveolin-1)表达。结果: 金粉蕨素呈剂量依赖性地降低甲萘醌对内皮细胞的生长抑制率,增加培养液中NO₂^-／NO₃^-含量,保护eNOS活性、阻止caveolin-1表达下降。结论: 金粉蕨素可能通过caveolin-1/eNOS通路介导对抗甲萘醌对内皮细胞的氧化损伤作用。     

Bcl-XL siRNA对肺腺癌细胞A549/DDP药物敏感性及凋亡的影响

目的：探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549／DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制。方法：将Bcl-XL siRNA质粒载体转染至A549／DDP细胞，MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变；丫啶橙／溴化乙锭（AO／EB）染色法检测细胞凋亡；RT-PCR检测Bcl-XL mRNA水平；Western-Blot检测Bcl—XL、caspase-3蛋白表达的变化。结果：分别用0．2、2、20、200μg／mL顺铂处理细胞48h，MTT显示转染Bcl-XL siRNA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照组明显降低，细胞生长抑制率明显增高；用20μg/mL顺铂处理细胞48h，流式细胞仪检测，转染Bcl-XL siRNA组凋亡率较转染阴性siRNA组和未转染组增加；AO／EB染色显示转染Bcl-XL siRNA的细胞较转染阴性siRNA及未转染者凋亡率增加；转染Bcl-XL siRNA降低了Bcl-XL mRNA和蛋白水平，升高了caspase-3活性形式蛋白表达。结论：Bcl-XL siRNA特异性下调A549／DDP细胞Bcl-XL的表达，活化caspase-3蛋白，促进A549／DDP细胞凋亡，增强该肺腺瘤细胞对顺铂的敏感性。     

湖南娄底地区汉族人群内皮素基因rs5370G/T多态性研究

目的了解湖南省娄底地区汉族人群原发性高血压相关的内皮素(ET-1)基因的rs5370G/T单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分布,并与Genbank多种族人群进行比较。方法收集湖南娄底地区84名无血缘关系的汉族人群的静脉血,其中健康个体57名,高血压患者27名,提取DNA,应用PCR/SNP敏感性分子开关对ET-1基因rs5370G/T多态性进行分析,并与Genbank中的多种族人群的分布进行比较分析。结果湖南娄底地区汉族人群中ET-1基因rs5370G/T的G、T的频率分别为51.2%和48.8%,且不同性别间高血压人群与正常人群间均未见显著差异,在高血压人群与正常人群中G的频率分别为0.537,0.518(χ2=0.056,P>0.05)。然而在Genbank中,ET-1基因rs5370G/T的G、T基因频率分别为80.4%和19.6%,与湖南娄底地区人群比较有显著性差异(χ2=22.132,P<0.001)。结论湖南娄底地区汉族人群中ET-1基因rs5370G/T多态性与高血压无相关性,与Genbank中的多种族人群比较分布有明显的差异,这种差异可能是导致高血压在不同种族间的表现有所不同的遗传因素之一。     

核化线粒体组学与转基因人分析法在人类进化研究中的应用1例

5年前,作者提出转基因人分析法,即以人类染色体DNA与线粒体DNA的重组状况作为研究对象,并将这种研究线粒体DNA与染色体DNA之间相互作用的科学称之为核化线粒体组学.分析当时可利用的尼安特人的线粒体DNA高变区数百个碱基,认为不能排除尼安特人与现代人在基因水平上可能存在亲缘关系.最近,细胞杂志发表了尼安特人的线粒体DNA完全序列,通过利用核化线粒体组学方法 ,使5年前的推论得到了确认,即尼安特人与现代人在基因水平上存在亲缘关系.这一应用实例对分子考古学具有一定的参考价值.     

EGFR突变在非小细胞性肺癌发生和化疗反应性中的作用及其分子机制

表皮生长因子受体(EGFR)是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白.它们将生长因子信号从细胞外传入细胞内,这一过程控制着细胞的诸多生理功能:如细胞生长、分化、血管生成以及凋亡抑制.在非小细胞性肺癌中,该信号通路和肿瘤的生长及转移关系密切.研究表明抑制EGFR酪氨酸激酶活性,可抑制肿瘤生长.本文综述了近年来EGFR及其抑制剂的研究进展.     

新型降脂药依泽替米贝的研究进展

依泽替米贝是先灵普劳公司与默克公司共同研制开发的一种新型的降脂药,美国FDA于2002年批准上市。它作用于小肠刷状缘的NPC1L1、膜联蛋白2小凹蛋白1、氨肽酶N等蛋白质,起着抑制胆固醇吸收的作用。它的作用机制与他汀类药物互补,后者可以抑制体内胆固醇合成。临床试验表明,依泽替米贝无论是单用还是与他汀类联合应用,都能收到很好的降脂效果,并且降脂的同时能降低低密度脂蛋白胆固醇水平,升高高密度脂蛋白胆固醇水平。另外,依泽替米贝对一些难治性的遗传性高胆固醇血症如家族型纯合子高脂血症有很好的疗效。     

比较全血DNA提取法适用单核苷酸多态性分析

目的 比较两种提取冰冻全血基因组DNA的方法，即分离白细胞法和裂解红细胞法所获得基因组DNA的质量。方法 分别测定所获DNA的效率和纯度，同时，笔者用PCR／SNP敏感性分子开关技术。对两种方法获得的模板DNA进行单核苷酸多态性（single—nucleotide polymorphism，SNP）分析。结果 结果显示分离白细胞法DNA产量与纯度均高，裂解红细胞法获得的DNA产量、纯度相对较低；PCR／SNP敏感性分子开关检测表明：分离白细胞法和裂解红细胞法制备的DNA模板，均可在体外进行有效的PCR扩增。但分离白细胞法获得的目的DNA带特异性凸显，而裂解红细胞法获得的目的带特异性相对较差。结论 预先分离纯化白细胞是从冰冻全血中获得较高纯度DNA和有效提高DNA产量的重要操作步骤。     

电解性自由基对离体豚鼠冠脉内皮与气道上皮的损伤作用

目的和方法:采用电解Krebs灌流液产生自由基的方法,观察电解性自由基对豚鼠离体心脏冠脉内皮与气道上皮功能的影响。结果:10mA直流电,持续1-2min电解灌流液产生的自由基导致离体心脏冠脉压升高约4.4kPa,同时使心肌收缩力下降,心肌组织过氧化脂质含量增高,而SOD活性降低;使离体支气管肺灌流压升高约2.20kPa,并对磷酸组胺反应性增高3倍;电解灌流液的作用可被羟自由基清除剂甘露醇、DMSO抑制。结论:电解性自由基可引起冠脉内皮与气道上皮损伤,使冠脉和气道反应性增高。     

Alu序列与人类疾病研究进展

Alu序列通过RNA依赖性机制即反转录转座在灵长类动物基因组中扩增，其在人类基因组中的拷贝数已经超过100万个。这些序列在人类基因组中被认为有很多功能，并对基因结构有很大的影响。Alu序列大概以每200个新生儿就一个插入的速度继续扩增。已有研究表明Alu序列的插入和Alu重复序列之间的不等同源重组导致了多种人类疾病。Alu序列不仅对基因组的进化做了很大贡献，而且对大部分人类遗传病也起了很大的作用。随着新的Alu亚类产生，新的亚类引起的疾病又见报道，本文将对这一方面内容的发展动态进行综述。