小鼠间充质干细胞三系分化中SOX9与Ⅱ型胶原mRNA的定量

背景：研究表明,软骨中的主要成分Ⅱ型胶原的基因-Col2al在软骨细胞中的表达与SOX9的浓度呈剂量依赖正相关关系。目的：通过成骨、成软骨、成脂肪诱导干细胞分化,分析3种分化过程及不同时期的SOX9与II型胶原mRNA含量的变化,探讨SOX9在不同时空分布的表达规律及与Ⅱ型胶原的相关关系。方法：取4周龄昆明小鼠骨髓间充质细胞,体外培养得到间充质干细胞并传达至第3代,对间充质干细胞进行流式细胞仪鉴定细胞表型,共分3组每组设3个时间段,通过成骨、成软骨、成脂肪3种诱导培养液对3组细胞进行诱导,另设不进行诱导的细胞作为对照组。分别在诱导3,7,14d后收集提取细胞的总RNA,通过RT-PCR进行SOX9与Ⅱ型胶原的mRNA定量检测,同时对诱导后的细胞进行染色、免疫荧光染色,观察其分化状态及相关统计分析。结果与结论：第3代骨髓间充质干细胞生长良好,流式细胞仪鉴定细胞表型证实为干细胞,对诱导后细胞进行染色、免疫荧光染色结果证实细胞分化为骨、软骨、脂肪细胞。经RT-PCR检测,在3组诱导分化细胞中SOX9mRNA含量由高到低分别是成软骨、成骨、成脂肪,Ⅱ型胶原mRNA含量由高到低分别是成软骨、成脂肪、成骨。在成软骨分化中SOX9在3,7d表达不断升高,14d呈下降趋势。Ⅱ型胶原在3,7,14d均逐渐升高。在成骨分化中SOX9mRNA含量随着时间推移而增加,而Ⅱ型胶原则随着时间推移而不断降低。在成脂肪分化中SOX9mRNA表达与对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）;而Ⅱ型胶原的表达没有规律可循,时间点的延伸及检测未观察到。结果提示,SOX9在软骨分化中作用优于成骨、成脂肪组,且软骨分化中SOX9与Ⅱ型胶原存在相关性,可能在软骨分化的早期Ⅱ型胶原随着SOX9的变化而变化;且软骨分化和成骨分化过程中SOX9可能起到了一个互相协调促进平衡的关键作用。     

典型厨余垃圾组分水热炭化处理的转化特性研究

随着我国垃圾分类工作的推进,城市厨余垃圾分出量急剧增加,亟需研发适宜性的处理技术。水热炭化是一种有机固废高值化处理技术,但是在厨余垃圾处理中的适用性仍然有待研究。对淀粉类（馒头）、纤维素类（长白菜）和蛋白质类（瘦猪肉） 3种典型厨余垃圾组分以及真实混合厨余垃圾的水热炭化特性进行研究,并分析了3种原料在不同炭化温度、恒温时间和含水率条件下的水热炭产率及产物性质。结果表明,炭化温度和恒温时间是水热炭产率和炭化程度的关键影响因素,而含水率的影响较小。3种厨余原料的水热炭化产物性质有显著差异。淀粉类原料的水热炭产率（41.7%～52.4%）高于纤维素类原料（27.3%～47.5%）,两种水热炭都是微球形貌且炭化程度较高;而蛋白质类原料不易产生水热炭（产率仅6.2%～24.0%）,无固定形态,且炭化程度较低。真实混合厨余垃圾水热炭产率可达49%,炭化程度较高。淀粉类和纤维素类原料的炭化液为酸性（pH为3.1～4.7）,而蛋白质类原料的炭化液为中性或碱性（pH为6.2～9.2）,蛋白质类原料是炭化液总有机碳和腐植酸的主要贡献者;真实厨余垃圾水热炭化液为酸性,含有一定的氮磷营养元素和腐植酸等有机物质...     

异硫氰酸苯乙酯对结肠癌SW480细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的探讨异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌SW480细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法选择6~8周龄的SPF级BALB/c(nu/nu)雄性裸鼠24只,将其随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,各6只。体外培养结肠癌细胞系SW480,对照组加入等体积的二甲基亚砜(DMSO),低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给予10、30和50μmol/L PEITC作用24 h,Western blot检测PI3K和PTEN的表达和Akt、mTOR磷酸化情况。最后,建立裸鼠异种移植瘤动物模型,观察PEITC对异种移植瘤生长的抑制作用。结果 PEITC能抑制PI3K的表达以及Akt和mTOR磷酸化。肿瘤质量:高剂量组中剂量组低剂量组对照组,抑瘤率:高剂量组中剂量组低剂量组(P0.05)。结论 PEITC可能通过影响PI3K/Akt/mTOR通路发挥抗肿瘤作用。     

脾脏原发性血管内皮肉瘤一例报告

病历摘要: 患者、女,35岁、汉族、陕西人。患者一年前因患“绒癌”在本院行子宫摘除。本次因不明原因发烧5个多月。待查于1979年8月入院。入院检查:病人呈慢性病容,于左上腹发现一肿块、下界于左肋下6cm、质地硬、边缘钝、表面光滑、触痛明显。化验室检查:Hb9.5g、血小板447000/mm3、出凝血时间正常。wbc28000,N88%,L6%,M4%。布氏杆菌凝集试验阴性。超声波检查:脾脏肋下7cm、为实质脏器波型。骨髓检查:仅提示存在某种感染。因病人长期发烧、脾脏肿大、经外科会诊行剖腹探查。术中见脾脏极度肿大、表面光滑、与周围组织无粘连、行全脾切除。病理检查(病理号:3756):肉眼检查:巨大脾脏一个(21.5×14×10cm大),表面结节状、灰白色、包膜完整、质地中等。切面见整个脾脏几乎全部被灰红色的肿瘤所占据,切时质地较软,中心部份可见囊性交,肿瘤上缘可见残存的少量脾脏组织(图1)。     

卒中早期手指被动运动的脑功能磁共振成像研究

目的应用扩散张量成像及BOLD-fMRI技术观察卒中早期手指被动运动时大脑半球相关区域血氧水平的变化情况.方法采用1.5 T MR成像系统对6名早期卒中患者进行BOLD-fMRI及扩散张量成像,采用手指被动屈伸运动作为fMRI的刺激任务.结果在锥体束中断时,卒中早期健手运动时激活双侧SMC区,患手运动可激活对侧半球后顶叶皮层及同侧SMC区;锥体束较完整时健手运动时激活对侧SMC区,患手运动激活双侧SMC区、双侧后顶叶皮层.结论卒中早期可能发生运动功能通路的重构,但锥体束不同损伤情况下运动功能恢复可能存在不同的机制.DTI与fMRI联合应用将是监测和研究脑卒中后恢复的有用工具.     

2008-2010年广西边境地区流感和人禽流感监测结果分析

目的 对广西壮族自治区(广西)8个边境市(县)所属的综合性医院不明原因肺炎、病原待查重症肺炎和流感样病例开展病原学监测,了解广西边境地区流感病毒优势株及其变化,探索广西边境地区流感流行规律,为科学防控边境地区流感和人禽流感提供依据。 方法 在边境地区医院设置监测点,开展相关病例监测,提取监测病例咽拭子标本病毒核酸,反转录合成cDNA,多重 PCR扩增目的基因,电泳检测扩增产物;采用细胞培养法分离鉴定流感病毒;采集从事饲养、销售和屠宰家禽的职业人群的静脉血34份,通过血凝抑制实验进行禽流感H5亚型抗体检测。 结果 2008年广西边境地区分离到6株流感病毒,其中B型5株,H1N1亚型1株;2009年分离到33株流感病毒,其中B型17株,H3N2亚型8株,H1N1亚型2株,甲型H1N1 6株;2010年分离到流感毒株130株,其中B型55株,H3N2亚型49株,H1N1亚型1株,甲型H1N1 25株;2008-2010年检测不明原因肺炎、病原待查的重症肺炎标本9份,人禽流感核酸和多重呼吸道病毒核酸检测均为阴性;采集从事饲养、销售和屠宰家禽的职业人群血样本34份,未检出 H5N1亚型禽流感病毒抗体阳性的标本。 结论 2008年和2009年广西边境地区的流感优势株为B型流感毒株,2010年为B型和H3N2亚型流感毒株;从有限的不明原因肺炎和病原待排查的重症肺炎病例标本中未检出禽流感病毒;禽流感H5亚型在职业暴露人群中未发现隐性感染。进一步加强对广西边境地区的流感和人禽流感病原学监测工作,对广西的流感和人禽流感的防控工作有重要意义。     

医学图像在癫痫灶定位中的应用

目的:分析难治性癫痫患者正电子发射断层扫描(PET),视频脑电图(VEEG),颅内脑电图以及磁共振成像(MRI),探讨仪器定位的应用价值.方法:难治性癫痫患者75(男52,女23)例,年龄(30.6±18.3)岁,均行VEEG,发作间期PET及MRI检查,51例进行了手术治疗,其中14例行颅内电极埋藏术,根据Engel疗效分级评估手术疗效,比较PET,MRI和VEEG在对致痫灶的术前定位准确性并分析它们之间的关系.结果:癫痫患者70例在发作间期脑PET异常表现,5例脑组织代谢未见明显异常.PET病变定侧率高于VEEG,FDG PET低代谢灶检出率高于MRI.结论:发作间期PET对癫痫灶定位的灵敏度和准确性优于MRI和头皮EEG,头皮EEG,MRI及PET相结合可确定病灶部位、选择手术适应证和预测疗效.     

匹罗卡品致大鼠癫痫持续状态后海马神经元凋亡的动态观察

目的 探讨癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后海马细胞凋亡的发生及其与caspase-3表达的关系.方法 采用匹罗卡品诱发大鼠SE模型,用TUNEL染色和免疫组化技术检测海马神经元凋亡和caspase-3表达的动态变化.结果正常对照组大鼠海马未见TUNEL阳性细胞;SE后6 h,开始出现少量TUNEL阳性细胞;SE后72 h,达到高峰;SE后7 d,TUNEL阳性细胞开始减少.正常对照组大鼠海马可见少量caspase-3阳性表达;SE后6 h,大鼠海马caspase-3阳性表达增多,主要集中于CA1和CA3区;SE后48 h,caspase-3表达达到高峰;SE后72 h～7 d,caspase-3阳性染色细胞数开始减少;但仍显著多于对照组,差异有极显著意义(P＜0.01).结果 显示caspase-3表达分布与TUNEL染色基本一致,caspase-3表达高峰早于TUNEL所示凋亡细胞出现的高峰.结论 神经元凋亡参与了SE后海马神经元迟发性死亡过程并与caspase-3的激活有密切的关系.     

突变的SOD1 cDNA与人MAP/MARK1片段在人胚肾293细胞中的相互作用

目的用酵母双杂交方法显示突变的SOD1 cDNA与人MAP／MARK1的片段结合,进一步探讨二者能否在哺乳动物表达系统人胚肾293细胞中发生相互作用,以验证酵母双杂交的结果。方法采用PCR方法及双酶切的方法构建含突变SOD1 cDNA片段的真核表达质粒pCMV-Myc和含人MAP／MARK1的片段真核表达质粒pCMV-HA,分别或共同转染人胚肾293细胞,进行免疫共沉淀检测。结果免疫共沉淀结果表明,重组含突变的SOD1 cDNA质粒pCMV-Myc分别与空载体pCMV-Myc、pCMV-HA共转染,免疫沉淀物中均未检测到结合蛋白,只有重组含突变SOD1 cDNA真核表达质粒pCMV-Myc与重组含人MAP／MARK1的片段真核表达质粒pCMV-HA共转染时,在免疫沉淀物中能检测到结合蛋白,表现在蛋白免疫印迹上有特异性目的条带。结论突变的SOD1 cDNA与人MAP／MARK1片段在人胚肾293细胞中存在蛋白水平的相互作用。     

微创食管癌术后不留置胃肠减压管的安全性和可行性研究

目的：探讨微创食管癌根治术后不常规留置胃肠减压管的安全性和可行性。方法回顾性分析安徽医科大学第一附属医院普胸外科同一治疗组医师自2012年1月至2013年5月期间完成的90例胸腹腔镜联合食管癌根治术患者的临床资料,其中留置和未留置胃管患者各45例。对比两组患者的术后排气时间、恢复流质饮食时间、术后住院时间、胃管重置情况及术后并发症情况。结果与留置胃管组相比,未留置胃管组患者咽痛的发生率明显降低[44．4％（20/45）比100％（45/45）,P＜0．01],恢复流质饮食时间（中位2 d比9 d）、术后排气时间（中位3 d比6 d）及术后住院时间（中位7 d比12 d）均明显缩短（均P＜0．01）;而两组术后呕吐情况、并发症发生率及围手术期死亡率的差异均无统计学意义（均P＞0．05）。结论微创食管癌术后不常规留置胃肠减压管是安全的,可加快术后肠功能恢复,缩短术后住院时间。