胃癌SRF E-cadherin β-catenin的表达及其临床意义

血清应答因子（serum response factor,SRF）是一个重要的转录因子,涉及调控细胞增殖、迁移、分化、血管发生和凋亡多种基因的表达,但其在胃癌中的作用仍未所知。本研究拟探讨胃癌组织中SRF、E-钙粘蛋白（E-cadherin）和β-连环蛋白（β-catenin）的表达及其临床意义。方法：采用免疫组织化学SABC法检测50例胃癌组织、50例配对的手术切缘黏膜组织和29例胃癌淋巴结转移标本中SRF、E-cadherin、β-catenin的表达情况。结果：胃癌组SRF、E-cadherin、β-catenin表达的阳性率为52.00%、56.00%、68.00%,高于正常胃黏膜组表达的16.00%、10.00%和8.00%,且差异具有统计学意义（P<0.05）。胃癌组织中SRF的表达与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移相关,差异具有统计学意义（P<0.05）。胃癌组织中E-cadherin、β-catenin的异位表达/缺失表达与胃癌的分化程度、浸润深度和有无淋巴结转移相关,差异具有统计学意义（P<0.05）。SRF、E-cadherin和β-catenin在胃癌淋巴结转移组中的表达均高于胃癌组,但仅E-cadherin的表达差异具有统计学意义。结论：胃癌中SRF的高表达,与E-cadherin、β-catenin表达的下调,可能是胃癌侵袭和转移的重要调控机制之一,在胃癌的发生、发展中起到重要作用。     

香加皮杠柳苷抑制Stat5信号通路诱导SMMC-7721细胞凋亡的实验研究

目的 研究香加皮提取物杠柳苷对Stat5信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制.方法 MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察肿瘤细胞的周期变化和凋亡,western blot法检测杠柳苷作用前后人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内Stat5蛋白质表达.结果 杠柳苷明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,使细胞周期停滞在G2/M期,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡.杠柳苷作用后,细胞核内的Stat5蛋白量降低而胞浆中的量未见明显改变.结论 香加皮杠柳苷能够抑制Stat5信号转导通路,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡.     

食管上皮癌变过程中cyclin E和p21WAF1的表达及其意义

目的研究细胞周期调控因子cyclinE和p21^WAF1基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法应用免疫组化S—P方法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织和相应癌旁组织(正常黏膜17例，非典型增生组织31例)中cyclinE和p21^WAF1蛋白及mRNA表达。结果从食管正常黏膜到非典型增生组织和癌组织，cyclinE蛋白和mRNA阳性表达率皆呈逐渐升高的趋势，食管癌组织和癌旁组织之间差异有显著性。高分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于其它各组，mRNA阳性表达率显著高于正常黏膜和非典型增生Ⅰ级。p21^WAF1蛋白及mRNA在癌旁组织和癌组织中表达皆较高，两者差异无显著性。cyclinE和p21^WAF1基因表达无显著相关性。结论食管癌变过程中，细胞周期蛋白cyclinE表达水平增高，和组织分化程度显著相关，其异常是食管癌变过程中的早期事件，可能作为食管高分化鳞癌的诊断标志物之一。p21^WAF1基因在食管癌组织中高表达，可能与细胞周期调控的反馈机制有关。     

甲硝唑对阴道毛滴虫作用的流式细胞分析

目的 :了解甲硝唑对阴道毛滴虫的作用机制。方法 :应用流式细胞术 ( FCM)检测阴道毛滴虫的细胞周期和甲硝唑对该虫细胞周期的影响。结果 :对照组中 ,阴道毛滴虫细胞周期的时相分布为 G0 /G1期 70 .3%,S期 13.6% ,G2 M期 13.5%和自然死亡率为 2 .8%左右。各用药组虫体的细胞周期时相因药物浓度和随时间推移而改变。尤其给药 9h后 ( 2 0 μg/ml) ,虫体死亡率为4 6.6% ,与对照组相比有显著性差异 ( P<0 .0 1),G0 /G1期和 G2 M期虫体明显减少 ,S期出现积累。结论 :甲硝唑对阴道毛滴虫 G2 M期有抑制作用。     

p38MAPK在戊地昔布诱导Eca109细胞凋亡中的调控作用

目的探讨p38MAPK信号转导途径在戊地昔布诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的调控作用。方法将正常培养的人食管癌Eca109细胞随机分为正常对照组、戊地昔布组和戊地昔布+SB203580组;采用流式细胞术和DNA Ladder检测凋亡情况;RT-PCR检测p38mRNA的表达变化;流式细胞术和免疫细胞化学检测p38蛋白的表达变化。结果①戊地昔布能够诱导Eca109细胞发生凋亡,并呈剂量依赖性,而SB203580能够部分降低戊地昔布诱导的Eca109细胞的凋亡率;②戊地昔布能够上调Eca109细胞中p38mRNA和蛋白的表达,而戊地昔布+SB203580组p38mRNA和蛋白的表达下降;③p38蛋白表达与凋亡率呈正相关。结论戊地昔布能够通过部分激活p38MAPK信号途径诱导Eca109细胞发生凋亡。     

PPARγ的配体15d-PGJ2对人类胃癌细胞生长的影响

目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator activated receptor γ，PPARγ）的配体15-脱氧前列腺素J2（15-deoxy-Δ^12,14-prostaglandin J2，15d—PGj2）对人类胃癌MGC803细胞生长的影响及其机制。方法：RT—PCR检测PPARγ和survivin mRNA，Western blot检测PPARγ、survivin、S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase-assoeiated protein2，Skp2）和p27蛋白;MTT法及流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及细胞周期分布；Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态学变化。结果：PPARγmRNA和蛋自在MGC803细胞均表达。15d-PGJ2作用MGC803细胞24h后，5、10、20、30、40μmol／L组的增殖抑制率和凋亡率均高于0μmol／L组（P〈0．001），且随浓度的增加而升高。30μmol／L组的MGC803细胞增殖抑制率和凋亡率，随时间的延长而升高。G0／G1期细胞比例，30μmol／L组明显高于0μmol／L组（P〈0．001）;S和G2／M期细胞比例，30μmol／L组均明显低于0μmol／L组（分别为P〈0．001，P〈0．01）。随15d0PGJ2作用MGC803细胞浓度的增加，survivin mRNA和蛋白及Skp2蛋白的表达均降低，p27蛋白表达升高。结论：15d-PGJz抑制人胃癌MGC803细胞的增殖、诱导其凋亡并将其阻滞在G0／G1期，survivin和Skp2表达下调及p27表达上调在这个过程中起重要作用，提示15d—PGJ2可能对治疗胃癌有效。     

环氧合酶-2 在肝细胞癌中的表达及其对肿瘤血管生成的影响

 目的 本研究通过检测肝细胞癌组织COX-2的表达,探讨COX-2与VEGF和MVD表达之间的关系,初步探讨COX-2在肝细胞癌血管生成的作用. 方法 应用免疫组化方法检测了45例肝细胞癌组织中COX-2和 VEGF、MVD的表达. 结果 肝癌、癌旁组织和正常肝组织中COX-2表达阳性率分别为73.3%、81.3%和100%.高分化癌组织中COX-2蛋白的表达显著高于中分化和低分化癌组织中的表达(P<0.05);癌组织中COX-2蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小、包膜、门静脉癌栓、AFP均无显著性差异(P>0.05).COX-2与VEGF表达和MVD有显著相关性(P<0.01,P<0.05). 结论 COX-2可通过增加VEGF的表达而促进肿瘤血管的生成.     

人参皂苷Rh2对食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响

目的:探讨人参皂苷Rh2(ginenoside-Rh2,GS-Rh2)对人食管癌细胞Eca-109生长抑制及细胞周期的影响.方法:应用MTT法测定GS-Rh2对细胞的生长抑制作用,HE染色后光镜观察细胞形态变化,应用免疫细胞化学和Western blot检测细胞周期调控因子cyclinE,CDK2(cyclin-dependent kinase 2),p21WAF1基因蛋白表达,采用半定量RT-PCR检测基因mRNA表达.结果:GS-Rh2对Eca-109细胞生长有抑制作用,并呈剂量、时间依赖性.20μg·mL-1GS-Rh2作用1 d后细胞达到半数抑制,作用3 d的Eca-109细胞较对照细胞数目明显减少,细胞形态向正常细胞方向逆转.细胞周期分析显示,随着GS-Rh2药物剂量的增加,G0/G1期细胞数逐渐增加,S和G2/M期细胞数逐渐减少,10μg·mL-1和20μg·mL-1 GS-Rh2处理组和对照组比较有显著性差异.20μg·mL-1SS-Rh2处理细胞后,随着作用时间延长,cyclinE和CDK2蛋白及其mRNA表达水平逐渐增高,而p21WAF1蛋白及其mRNA表达水平逐渐降低.结论:GS-Rh2可以将人食管癌细胞Eca-109阻滞于G0/G1期,诱导肿瘤细胞分化,并且通过影响细胞周期调控因子cy-clinE,CDK2,p21WAF1基因的表达抑制食管癌细胞的增殖.     

人卵巢癌顺铂耐药细胞SCID小鼠腹腔移植模型的建立及其生物学特性的实验研究

目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠腹腔移植动物模型,探讨其生物学特征.方法以卵巢癌SKOV3细胞作对照,将SCID小鼠腹腔注射人卵巢癌SKOV3/CDDP细胞1×107/ml,建立SCID小鼠顺铂耐药卵巢癌腹腔移植模型,观察小鼠活动、原位移植成瘤率、肿瘤生长以及形态学特征.免疫组化检测卵巢癌相关抗原CA125以及耐药相关基因GST-π和Topo-Ⅱ的共表达率.结果两组SCID小鼠均100%成瘤,病理组织和免疫组化检测,从移植瘤细胞形态学、生长特性和分泌CA125等方面未见明显改变.SKOV3/CDDP组耐药相关基因GST-π和Topo-Ⅱ共表达明显增高(P＜0.05).结论该卵巢癌SKOV3/CDDP细胞SCID小鼠腹腔移植模型,模拟了人卵巢癌腹腔播散的生物学行为,且能保持细胞的耐药性,是研究卵巢癌生物治疗较理想的动物模型.