流式细胞术在泌尿系肿瘤方面的应用

一、概述: 流式细胞术(以下简称FCM)是八十年代定量分析细胞的先进技术,它综合了多种现技代术的自动化,快速、多参数分析和分选细胞的新方法,已广泛应用于肿瘤临床的研究中。特别是近年建立了FCM分析石蜡包埋组织单分散细胞悬液的制备方法,极大地推动了FCM在肿瘤临床研究中的应用。能够对已有临床随访资料的肿瘤病人进行回顾性的分析研究,可得到有关肿瘤病人的预后重要信息,FCM对肿瘤细胞的DNA倍体分析,对判断各种类型肿瘤的预后和治疗反应具有重要价值。并通过对细胞DNA含量的定量测定,为恶性肿瘤的诊断将提供新的途径。     

Correlative Study on the Expression of p53 and DNA Ploidy in Acute Nonlymphocytic Leukemia

ＣｏｒｒｅｌａｔｉｖｅＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐ５３ａｎｄＤＮＡＰｌｏｉｄｙｉｎＡｃｕｔｅＮｏｎｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃＬｅｕｋｅｍｉａＬＩＮＦｅｎｇ－ｒｕ（林凤茹）；ＹＡＯＥｒ－ｇｕ（姚尔固）；ＺＵＯＬｉａｎ－ｆｕ（左连富）；ＸＵ...     

食管癌Fas和bcl-2蛋白和DNA含量的定量研究

目的　探讨Fas和bcl- 2蛋白表达和DNA倍体异常在食管癌发生和发展中的作用。方法　应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术对 70例患者食管鳞癌组织Fas和bcl- 2蛋白和DNA含量进行定量检测。结果　异倍体 36例 (51 .4 % ) ,二倍体 34例 (48.6 % ) ;异倍体肿瘤其DNA指数、增殖指数和S期细胞比率均高于二倍体肿瘤 ,但差异无显著性 (P>0 .0 5) ;Fas蛋白阳性表达 42例 (60 .0 % ) ,bcl- 2蛋白阳性表达 65例 (92 .9% ) ,Fas蛋白表达与肿瘤病理分级密切相关(P <0 .0 5) ;异倍体肿瘤和二倍体肿瘤Fas和bcl- 2阳性表达率和表达量差异均无显著性 (P >0 .0 5)。结论　DNA倍体异常、Fas和bcl- 2蛋白的异常表达在食管癌发生和发展中起重要作用。     

HMGB1在TNF-α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖中的作用及机制

目的：探讨HMGB1在TNF-α诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞增殖中的作用及机制。方法: 将常规培养的RSC-364细胞分为正常对照组和10 μg·L-1TNF-α刺激组，分别于6 h、12 h、24 h收集细胞。RT-PCR检测HMGB1、STAT1和STAT3 mRNA的表达；免疫细胞化学和流式细胞术检测HMGB1、PCNA、 STAT1和STAT3蛋白表达。结果：① TNF-α能显著上调HMGB1 mRNA和蛋白的表达，同时PCNA蛋白表达也增强（P<0.05或P<0.01）。② TNF-α 作用12 h 后，STAT1 mRNA和蛋白的表达明显增强，24 h表达最高（P<0.01）。③ TNFα 作用6 h-24 h对STAT3 mRNA和蛋白的表达无明显影响（P>0.05）。④ HMGB1蛋白表达与PCNA 、STAT1蛋白表达呈正相关；STAT1与PCNA蛋白表达亦呈正相关。结论：TNF-α可能通过诱导RSC-364细胞高度表达HMGB1，促进滑膜细胞增殖；STAT1可能参与了其信号转导及调控过程。     

食管癌组织MCM2的表达及意义

目的探讨MCM2作为细胞新增殖指标的可靠性及其对判断食管鳞癌预后的意义。方法采用免疫组化法检测134例食管鳞癌组织中MCM2及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达．分析它们的相关性及与食管鳞癌分化、分期和预后的关系。结果MCM2的表达强弱与食管癌的分化程度密切相关。分化越低，表达越明显（P〈0．01）;表达强弱与食管癌的临床分期无关。MCM2与PCNA呈显著正相关（r=0．701,P〈0．01）。COX回归模型显示肿瘤分期、MCM2为独立的预后指标。结论MCM2可作为判断食管鳞癌增殖速率和预后的独立指标，其高表达提示预后不良。     

甲硝唑对阴道毛滴虫作用的流式细胞分析

目的 :了解甲硝唑对阴道毛滴虫的作用机制。方法 :应用流式细胞术 ( FCM)检测阴道毛滴虫的细胞周期和甲硝唑对该虫细胞周期的影响。结果 :对照组中 ,阴道毛滴虫细胞周期的时相分布为 G0 /G1期 70 .3%,S期 13.6% ,G2 M期 13.5%和自然死亡率为 2 .8%左右。各用药组虫体的细胞周期时相因药物浓度和随时间推移而改变。尤其给药 9h后 ( 2 0 μg/ml) ,虫体死亡率为4 6.6% ,与对照组相比有显著性差异 ( P<0 .0 1),G0 /G1期和 G2 M期虫体明显减少 ,S期出现积累。结论 :甲硝唑对阴道毛滴虫 G2 M期有抑制作用。     

胃癌SRF E-cadherin β-catenin的表达及其临床意义

血清应答因子（serum response factor,SRF）是一个重要的转录因子,涉及调控细胞增殖、迁移、分化、血管发生和凋亡多种基因的表达,但其在胃癌中的作用仍未所知。本研究拟探讨胃癌组织中SRF、E-钙粘蛋白（E-cadherin）和β-连环蛋白（β-catenin）的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SABC法检测50例胃癌组织、50例配对的手术切缘黏膜组织和29例胃癌淋巴结转移标本中SRF、E-cadherin、β-catenin的表达情况。结果:胃癌组SRF、E-cadherin、β-catenin表达的阳性率为52.00%、56.00%、68.00%,高于正常胃黏膜组表达的16.00%、10.00%和8.00%,且差异具有统计学意义（P<0.05）。胃癌组织中SRF的表达与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移相关,差异具有统计学意义（P<0.05）。胃癌组织中E-cadherin、β-catenin的异位表达/缺失表达与胃癌的分化程度、浸润深度和有无淋巴结转移相关,差异具有统计学意义（P<0.05）。SRF、E-cadherin和β-catenin在胃癌淋巴结转移组中的表达均高于胃癌组,但仅E-cadherin的表达差异具有统计学意义。结论:胃癌中SRF的高表达,与E-cadherin、β-catenin表达的下调,可能是胃癌侵袭和转移的重要调控机制之一,在胃癌的发生、发展中起到重要作用。      

香加皮杠柳苷抑制Stat5信号通路诱导SMMC-7721细胞凋亡的实验研究

目的 研究香加皮提取物杠柳苷对Stat5信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制.方法 MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察肿瘤细胞的周期变化和凋亡,western blot法检测杠柳苷作用前后人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内Stat5蛋白质表达.结果 杠柳苷明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,使细胞周期停滞在G2/M期,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡.杠柳苷作用后,细胞核内的Stat5蛋白量降低而胞浆中的量未见明显改变.结论 香加皮杠柳苷能够抑制Stat5信号转导通路,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡.     

p38/Fas/FasL在戊地昔布诱导食管癌裸鼠移植瘤细胞凋亡中的调控作用

目的探讨p38/Fas/FasL信号途径在戊地昔布诱导裸鼠食管癌移植瘤细胞凋亡中的调控作用。方法建立食管癌裸鼠移植瘤模型,给予戊地昔布4 wk。剥离瘤结节,计算瘤体体积和肿瘤生长抑制率;HE染色检测裸鼠移植瘤的结构变化;FCM法检测移植瘤中的细胞凋亡率;免疫组织化学和FCM法检测p-p38、Fas和FasL蛋白的表达变化;RT-PCR检测移植瘤中p38mRNA表达变化。结果①戊地昔布可明显降低肿瘤重量,肿瘤生长抑制率为45.80%。②戊地昔布可增加肿瘤细胞的凋亡率。③戊地昔布可上调p38mRNA和蛋白的表达;同时凋亡基因Fas和FasL蛋白表达升高。④肿瘤组织的凋亡率与p-p38、Fas、FasL蛋白表达呈正相关;p-p38与凋亡基因Fas、FasL蛋白表达之间均呈正相关。⑤给予戊地昔布后,裸鼠胃肠上皮细胞形态没有异常。结论激活p38MAPK信号转导途径,从而上调凋亡相关基因Fas/FasL的表达,可能是戊地昔布诱导食管癌细胞凋亡的机制之一。