三氧化二砷对高迁移率族蛋白诱导的大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用

目的： 探讨三氧化二砷（AS₂O₃）对高迁移率族蛋白1（HMGB1）诱导的大鼠滑膜细胞(RSC-364细胞)增殖的抑制作用及其机制。 方法： 将常规培养的RSC-364细胞分为正常对照组、HMGB1组及HMGB1加0、5、10、20、40和80 μmol•L^-1 AS₂O₃实验组; MTT法检测不同浓度AS₂O₃对RSC-364细胞生长的影响,RT-PCR检测STAT1 mRNA的表达变化,免疫细胞化学和流式细胞术检测STAT1、cyclin D1和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达的变化。结果：① MTT结果显示,AS₂O₃可抑制HMGB1诱导的RSC-364细胞的增殖,80　μmol•L^-1 AS₂O₃作用24　h抑制率可达88.18%,其抑制作用呈时间和浓度依赖性（P<0.05或P<0.01）;② 与对照组比较,HMGB1组STAT1 mRNA及STAT1、PCNA 、cyclin D1蛋白表达量增强,AS₂O₃组STAT1 mRNA及STAT1、PCNA、cyclin D1蛋白降低,并呈剂量依赖性(P<0.01）;③ STAT1与cyclin D1蛋白表达呈正相关关系（r=0.842,P=0.001）。结论：AS₂O₃能够抑制HMGB1诱导的滑膜细胞的增殖,其机制可能与抑制STAT1的活性从而下调细胞周期调节蛋白cyclin D1的表达有关。     

胃癌及癌前病变中DNA含量,细胞增殖活性的定量分析与临床意义

目的　探讨细胞DNA含量、细胞增殖活性在胃粘膜癌变过程中的作用及其临床意义。方法　采用流式细胞术 (FCM)和免疫荧光技术对胃癌及癌前病变的细胞中DNA含量 (DI值 )、细胞增殖活性 (PI值 )进行定量检测。结果　胃癌组织中DI值为 1.2 1± 0 .14、异倍体率为 69.2 3 %、PI值为 3 1.91±7.5 1,均明显高于癌前病变 (P均 <0 .0 1) ;胃粘膜不典型增生Ⅲ级中异倍体率为 5 5 .5 6%、PI值为 3 4 .79± 6.5 5 ,分别高于其他癌前病变 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论　DNA含量、异倍体出现率及细胞增殖活性在胃癌显著高于癌前病变 ;在胃粘膜不典型增生Ⅲ级中DNA异倍体出现率和细胞增殖活性明显高于其他癌前病变 ,可作为癌变早诊指标。     

流式细胞术测定COX-2,iNOS基因蛋白在食管癌上的表达及其与Bcl-2,PCNA的相关性

背景与目的：研究环氧化酶-2(Cyclooxygenase 2,COX-2),Ⅱ型一氧化氮合酶(Type Ⅱ nitric oxide synthase,iNOS)基因蛋白在食管鳞癌上的表达及与食管癌的分化和淋巴结转移的关系,并探讨其与PCNA、Bcl-2的相关性。材料与方法：采用流式细胞术定量检测65例食管鳞状细胞癌上增殖细胞核抗原、iNOS、PCNA(Proliferating cell nuclear antien)及Bcl-2基因的蛋白表达量(用荧光指数FI表示)。结果：COX-2,iNOS在低分化型(Ⅲ级)鳞癌上的表达量明显高于分化型(Ⅰ、Ⅱ级)鳞癌(其P值分别为0．0001,0．0385);二者之间差异有显著性。该两种基因蛋白的表达强弱均与淋巴结转移无关。COX-2与PCNA、Bcl-2呈明显正相关,而iNOS与PCNA、Bcl-2无明显相关性。结论：COX-2,iNOS的表达强弱与食管癌的分化密切相关,二者在促食管癌的发生发展上可能有互相协同作用;COX-2可能促进食管癌细胞的增殖,并通过刺激Bcl-2蛋白表达抑制凋亡。     

单克隆抗体MG7和MGd1在卵巢肿瘤中的含量及临床意义

目的 探讨单克隆抗体MG7、MGd1在卵巢肿瘤中的表达与临床相关性.方法 采用免疫荧光流式细胞术检测10例正常卵巢组织、24例良性卵巢肿瘤及48例恶性卵巢肿瘤细胞中MG7、MGd1的FI值,并进行比较分析.结果 卵巢恶性肿瘤的MG7、MGd1 FI值及阳性表达率明显高于良性肿瘤组(P<0.05),卵巢粘液性癌的阳性表达率明显高于浆液性癌,宫内膜样癌(P均<0.05).而恶性生殖细胞肿瘤MG7、MGd1的表达率均为80%,与粘液性癌无显著差异(P>0.05).5例卵巢转移性腺癌中,有2例胃肠道来源的肿瘤MG7、MGd1为阳性表达.良性肿瘤中有1例复发性粘液性瘤,其MG7,MGd1均为阳性,而其余MG7或MGd1为阳性表达者均为生殖细胞肿瘤.结论 免疫荧光流式细胞术检测卵巢肿瘤组织中单克隆抗体MG7、MGd1的表达,是诊断卵巢癌的一种可行的方法 ,可作为卵巢粘液上皮癌的监测指标.并证实了胃癌与卵巢癌具有共同抗原,从而可帮助判断卵巢转移性肿瘤的组织来源.     

食管鳞癌组织PPARγ和MMP-7蛋白表达临床意义的探讨

目的:探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-aetivated recelmtorγ,PPART)和基质金属蛋白酶-7(matrix Metalloproteinase-7,MMP-7)在食管鳞癌组织中的表达及其生物学意义.方法:免疫组织化学SP法检测PPARy和MMP-7蛋白在40例食管鳞状细胞癌、25例非典型增生和13例正常黏膜组织中的表达.流式细胞术检测其中30例食管鳞癌、15例非典型增生和10例正常黏膜组织中PPARγ和MMP-7蛋白含量.结果:PPARγ在癌组织中的阳性表迭率为52.5%(21/40),高于不典型增生组织(20.0%,5/25)和正常黏膜组织(7.7%,1/13),P<0.05;MMP-7在癌组织中的阳性表达率为65.0%(26/40),高于不典型增生组织(28.0%,7/25)和正常黏膜组织(0),P<0.05.流式细胞术结果与免疫组化结果一致.PPARγ的表达与细胞分化程度、淋巴结转移相关,P<0.05;MMP-7的表达与浸润深度和淋巴结转移相关,P<0.05;PPARγ和MMP-7的表达成正相关.结论:PPARγ和MMP-7的表达与食管鳞癌的发生发展密切相关,且两者在此过程中可能具有协同作用.中华肿瘤防治杂志,2009,16(1):40-43     

单次灌胃杂色曲霉素对小鼠大脑细胞的影响

目的　探讨单次ig杂色曲霉素 (ST)对小鼠大脑细胞的影响。方法　采用形态学观察和流式细胞术定量检测方法 ,研究ST对BALB/c小鼠大脑神经细胞的影响。结果　病理形态学观察可见 ,ig小剂量ST(3μg·kg-1 )后 1 2h或大剂量ST(3mg·kg-1 )后6h即可见小鼠大脑皮质、丘脑、海马CA2区神经元出现胞核固缩深染、胞浆嗜酸性变、空泡变性等病理变化 ,且随剂量增大和作用时间延长 ,病变神经元逐渐增多 ;光镜下对海马CA2区病变神经元进行计数分析 ,结果表明ST处理组发生病理变化的神经元比例均高于相应对照组 ,且呈剂量和时间依赖性增高 ;流式细胞术定量检测结果表明 ,igST 3,30 ,30 0和30 0 0 μg·kg-1 1 2h后 ,小鼠脑细胞的凋亡率呈剂量依赖性增高 ;ig3mg·kg-1 的ST后 6～48h,随ST作用时间的延长 ,脑细胞凋亡率也明显增高。结论经口给予ST可导致小鼠大脑皮质、丘脑、海马CA2区神经元发生退行性病变 ,诱导并促进小鼠大脑细胞凋亡     

NS-398对肝癌SMMC-7721和BEL-7402细胞凋亡和survivin、PTEN表达调节作用的研究

目的:研究应用NS398对肝细胞癌细胞株进行药物干预,探讨NS398对肝细胞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:人肝细胞癌细胞株SMMC7721、BEL7402细胞常规培养。NS398取0、25、50、75、100μmol/L5个浓度组,每个浓度组选取24、48、72h三个作用时间点进行检测,观察NS398对各细胞株的作用。MTT法测定2种细胞株的增殖抑制情况,FCM检测对细胞周期和凋亡的影响,FCM定量检测COX2、survivin、PTEN的表达。结果:MTT法结果显示,NS398可以显著抑制SMMC7721、BEL7402细胞增殖。FCM检测结果显示,NS398分别使SMMC7721、BEL7402细胞G0/G1期比例显著降低;G2/M期细胞比例显著增高,S期细胞比例无明显变化,并引起了显著的细胞凋亡(P<0.001),并且呈时间依赖性和剂量依赖性。与对照组相比,NS398使COX2、survivin和PTEN蛋白表达显著下调并且呈时间和剂量依赖性关系(P<0.001)。结论:NS398通过诱导SMMC7721、BEL7402细胞株凋亡而抑制其增殖,可能部分通过下调survivin和PTEN途径实现的。     

胃癌及非癌细胞DNA流式细胞光度分析

用流式细胞光度术对127例胃组织样品进行DNA含量分析.光镜下分为正常粘膜,浅表性胃炎,慢性萎缩性胃炎,轻、中、重度不典型增生和胃癌共7组.以DNA指数表示细胞核相对DNA含量.结果:重度不典型增生及胃癌组均与前5组有极显著差异,对其中64例的细胞周期分析表明:正常组与浅表性胃炎组之间S期细胞比率、细胞增殖指数无显著差异,但与其他组有显著差异,胃癌组细胞增殖指数与除重度不典型增生之外的其他组有显著差异.因此,DNA含量异常,S期细胞比率及细胞增殖指数明显增高,为胃粘膜潜在恶性或恶变的客观指标.     

氟化钠对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝细胞增殖的促进作用

氟化钠对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝细胞增殖的促进作用章明放，张乃鑫，左连富，刘雨清一、材料和方法１．５０只２个月龄，１００～１２０９重的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为单纯对照组（ＨＮＲ）１０只、阴性对照组（ＨＤＲ）１２只、实验组（ＨＤＦ）ｌ４只和阳性对照组（Ｄ...     

自溶对人组织细胞DNA含量的影响

本文旨在探讨组织在室温下放置时间与DNA 含量的关系及其变化规律。1 材料与方法1.1 取材:采用外科手术切除标本,正常肺、肺癌、乳腺癌三种组织,在室温18℃中放置,每组取材时间为放置后0、6、12、18、24、30小时,每次各切取2mm×2mm×2mm 组织5份,75%酒精固定。1.2 单细胞样品制备:每份样品切取0.3g,采用0.5%胃蛋白酶消化方法制作单细胞悬