CDC25A、Smad3在食管鳞癌中的表达及其相互关系

目的探讨CDC25A、Smad3在食管鳞癌组织中表达的意义及CDC25A蛋白与Smad3蛋白、细胞增殖指数、细胞凋亡率的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测CDC25A蛋白在52例食管鳞状细胞癌、24例正常黏膜中的表达。用流式细胞术检测其中30例食管鳞癌、5例正常黏膜的细胞凋亡率、增殖指数及CDC25A蛋白、Smad3蛋白的表达。结果CDC25A在癌组织中的阳性表达率为50％，明显高于正常黏膜（P〈0．05），CDC25A在高分化和中低分化组、浸润至纤维膜和未浸润至纤维膜组、有淋巴结转移和无淋巴结转移组中的差异显著（P〈0．05）。Smad3蛋白在癌组织中的表达低于正常黏膜（P〈0．05）。Smad3蛋白与CDC25A蛋白的表达呈负相关（r=-0．482，P=0．007）。核膜CDC25A蛋白阳性者的增殖指数高于核膜CDC25A蛋白阴性者（P〈0．05）；细胞质CDC25A蛋白表达阳性者的凋亡率低于细胞质CDC25A蛋白表达阴性者，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Smad3蛋白的下调可能与食管癌中CDC25A蛋白含量升高有关；细胞核中的CDC25A蛋白可能具有促增殖作用；CDC25A蛋白可能参与了食管癌的发生、发展。     

青蒿琥酯抗人食管癌作用与调控CDC25A、TGFβ有关

目的:观察青蒿琥酯(Art)对人食管癌Eca109细胞株及裸鼠移植瘤的抑瘤作用,探讨Art诱导肿瘤细胞周期阻滞与CDC25A、TGFβ表达的关系。方法:利用MTT法测定不同浓度Art对Eca109细胞及正常人外周血单个核细胞(hPBMC)增殖的影响;流式细胞术(FCM)测定肿瘤细胞的细胞周期变化;观察Art对裸鼠人食管癌移植瘤的抑制情况;RT-PCR方法检测CDC25A mRNA表达情况,Western blot方法检测CDC25A和TGFβ蛋白表达情况。结果:Art能显著抑制Eca109细胞的增殖,IC50为(68.80±0.76)μmol/L,而对hPBMC的增殖则没有明显抑制作用。低浓度Art可将细胞阻滞于G0/G1期,S期细胞显著减少,当浓度达到100μmol/L时,Art可将细胞阻滞于G2/M期。Art各用药组肿瘤的体积及质量均明显小于模型组,体积抑瘤率最高可达76.4%,质量抑瘤率可达63.2%。Art可显著抑制Eca109细胞CDC25A mRNA及蛋白表达,同时显著上调TGFβ的蛋白表达水平。结论:Art可抑制肿瘤细胞生长,其机制可能为通过上调TGFβ的表达来抑制CDC25A的表达,进而调控细胞周期。     

食管上皮癌变过程中端粒长度、hTERT含量的定量研究

目的:研究端粒DNA长度、hTERT蛋白定量表达与食管上皮细胞癌变的关系。方法:对84例食管上皮脱落细胞分别应用流式荧光原位杂交检测端粒DNA长度,细胞免疫荧光流式定量法检测hTERT蛋白含量。结果:①正常食管上皮脱落细胞组、重度增生组和癌组增殖指数(PI)分别为11.51±4.08,19.04±5.39和29.46±5.50,癌组细胞增殖活性显著高于重度增生组(P<0.01),重度增生组高于正常组(P<0.01),PI值与细胞学分级呈正相关(r=0.80,P<0.01)。②正常食管上皮脱落细胞组、重度增生组和癌组的端粒长度Q-FISH值分别为50.83±8.86、36.96±8.02和27.81±6.59,癌组端粒长度明显短于重度增生组(P<0.01),重度增生组短于正常组(P<0.01)。端粒长度与细胞学分级呈负相关(r=-0.73,P<0.01)。③正常组、重度增生组和癌组hTERT蛋白荧光指数(FI)分别为0.95±0.14、1.47±0.22和1.75±0.19,癌组hTERT蛋白含量高于重度增生组(P<0.01),重度增生组高于正常组(P<0.01)。hTERT含量与细胞学分级呈正相关(r=0.81,P<0.01)。重度增生组和癌组hTERT蛋白阳性表达率分别为91.43%(32/35)和96.77%(30/31),二者都明显高于正常组(P<0.01)。结论:端粒DNA长度缩短、hTERT蛋白含量升高与食管上皮癌变密切相关。     

尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞凋亡及Survivin和Caspase-3表达的影响

目的:观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响,研究其对凋亡抑制蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响,探讨尼美舒利诱导Eca-109细胞凋亡的作用机制.方法:尼美舒利作用Eca-109细胞后,MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡:RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRNA表达变化,Western blot检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化.结果:尼美舒利(50～400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长抑制作用增强,并诱导Eca-109细胞凋亡,呈剂量-时间效应关系;尼美舒利可降低Survivin mRNA和蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达.结论:尼美舒利可诱导人食管癌细胞株Eca-109凋亡,其机制可能与下调Survivin表达及激活Caspase-3表达有关.     

青蒿琥酯抗食管鳞癌作用机制的研究

目的探讨细胞分裂周期素25A(CDC25A)在食管癌发生发展中的作用及青蒿琥酯(Art)抗食管癌作用和机制。方法利用RT-PCR方法检测44例临床上同个体食管癌、癌旁组织、正常黏膜中CDC25AmRNA的表达。建立食管癌荷瘤裸鼠动物模型,腹腔注射药物,用药两个疗程结束后2d处死裸鼠,取出瘤组织,分两份,一份采用流式细胞术检测细胞周期和CDC25A蛋白的表达,一份用于RT-PCR检测瘤组织中CDC25AmRNA的表达水平。结果RT-PCR方法检测结果CDC25A在食管癌组织中表达较正常黏膜高。动物实验结果显示,Art组裸鼠移植瘤的体积及体质量小于对照组,Art组与对照组相比细胞周期在G0～G1期高,S期明显减少(P<0.05),而且CDC25AmRNA及蛋白值低于对照组(P<0.05)。结论Art具有抑制食管癌生长的作用,CDC25A在Art抗食管癌作用中起一定作用,使食管癌组织中CDC25A下降而使肿瘤细胞停滞在G0～G1期,从而起到抑瘤作用。     

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因在食管癌中的表达及意义

目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporer G2,ABCG2)基因在食管癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR方法检测44例原发性食管癌患者的癌组织、癌旁组织(距离癌2cm)及食管切缘正常黏膜(距离癌5cm以上)ABCG2的mRNA表达。结果ABCG2在食管癌原发灶组织中有较高程度的表达,其表达量为0.77±0.11,而正常食管黏膜中的表达量为0.66±0.12;其在食管癌中的表达显著高于正常黏膜(P<0.01)。ABCG2在低分化鳞癌中的表达显著高于中-高分化鳞癌(P<0.05)。食管癌中ABCG2在年龄和性别间表达无显著性差异(P>0.05)。结论ABCG2在食管癌组织中高表达可能在某种程度上参与了食管癌原发性耐药及化疗中多药耐药的形成。其可作为一种新的引起多药耐药的分子,指导临床上食管癌的化疗。     

胃癌乙酰肝素酶表达和DNA含量流式细胞定量研究

目的 探讨胃癌中乙酰肝素酶(heparanase)的表达及DNA含量与胃癌临床病理特征的关系.方法 应用流式细胞术检测50例胃癌组织、25例癌旁组织和10例正常组织中乙酰肝素酶的表达和DNA含量.结果 heparanase在胃癌组、癌旁组、正常组中表达量(FI值)分别为1.86±0.44,1.22±0.45,1.00±0.21,3组间差别有显著性(P＜0.05),heparanase在胃癌中的阳性表达率为96%,明显高于癌旁和正常胃黏膜(P＜0.01),且与胃癌的浸润深度(P＜0.05)、TNM分期(P＜0.01)和淋巴结转移相关(P＜0.01).3组的DI值分别为1.26±0.14,1.05±0.14,1.00±0.11,3组间差别有显著性(p＜0.05),且与肿瘤的分化程度和淋巴结转移相关(P＜0.01).Heparanase表达的FI值与DI值呈正相关关系(r=0.536,P＜0.01).结论 Heparanase在肿瘤的浸润和转移中扮演重要的角色,DNA含量与肿瘤的恶性程度密切相关.heparanase和DNA含量可能是评价胃癌恶性程度和预后预测的重要指标.     

Livin蛋白在表皮肿瘤中的表达及其意义

[目的]观察Livin蛋白在皮肤基底细胞癌、脂溢性角化病等表皮肿瘤中的表达情况。[方法]采用免疫组化和流式细胞术检测Livin蛋白在30例脂溢性角化病和15例皮肤基底细胞癌皮损中的表达情况,以20例正常皮肤组织作为对照。并采用流式细胞术对标本进行Livin蛋白定量分析。[结果]Livin蛋白在基底细胞癌中表达（86．67％）高于在脂溢性角化病组织（53．33％）和正常皮肤组织（5％）的表达（P〈0．05）,在30例脂溢性角化病皮损中,Livin蛋白阳性表达量高于在正常20例皮肤组织中的表达（P〈0．05）。[结论]脂溢性角化病和皮肤基底细胞癌的发生发展可能与Livin蛋白的异常表达有关。     

STAT1/SOCS1在高迁移率族蛋白1诱导的大鼠滑膜细胞中的表达

目的 探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1对滑膜细胞增殖的影响及机制.方法 ①常规培养的滑膜细胞,随机分为正常对照组和肿瘤坏死因子(TNF)-α组,培养6、12 h和24 h,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)免疫细胞化学法(ICC)检测HMGBI mRNA及蛋白在滑膜细胞中的表达变化;②常规培养的滑膜细胞,随机分为正常对照组、HMGB1组,分别培养6、12 h和24 h,RT-PCR检测磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT1)mRNA表达;ICC和流式细胞术(FCM)检测p-STAT1、细胞激酶信号抑制剂(SOCSl)蛋白的表达;ICC检测PCNA蛋白的表达.结果 ①TNF-α刺激6、12、24 h显著上调HMGB1mRNA的表达[0.86,0.92,1.06 vs 0.70,P<0.01];其蛋白表达亦增强,HMGB1蛋白不仅表达于细胞核,而且出现于胞质中;② HMGB1作用6、12、24 h显著增强STAT1 mRNA及蛋白的表达量[0.30,0.69,1.05 vs 0.24,P<0.01]及[1.34±0.09,1.55±0.16,1.74±0.13 vs 1.00±0.15,P<0.01];SOCS1蛋白量分别为1.43±0.10、1.58±0.05和1.24±0.15,呈先升高后下降.③ p-STAT1与SOCS1蛋白表达呈负相关(r=-0.484,P=0.04).结论 HMGB1是滑膜细胞增殖过程中的重要细胞因子,其可能通过上调STAT1的表达和活性,促进细胞增殖.     

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ在脂溢性角化病中的表达及其意义

目的：观察Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在皮肤脂溢性角化病（ＳＫ）皮损中的表达情况,探讨其发病机制及与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化的方法联合检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在３０例ＳＫ皮损中的表达情况,并以２０例正常皮肤组织作为对照。结果：在３０例ＳＫ皮损中,１９例Ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白阳性表达,正常２０例皮肤组织中无１例表达,有显著性差异（Ｐ＜０.０５）;３０例ＳＫ皮损中,１７例ＰＴＥＮ阳性表达,正常２０例皮肤组织中１３例ＰＴＥＮ表达,二者差异无显著性（Ｐ＞０.０５）。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在ＳＫ中的的表达与患者年龄、皮损大小、病程长短有关（Ｐ＜０.０５）,而与患者性别、发病部位、皮损数目无关（Ｐ＞０.０５）;Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在ＳＫ中的的表达呈显著负相关（Ｐ＜０.０５）。结论：ＳＫ的发生可能与Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因表达上调有关;ＰＴＥＮ基因表达可能参与了ＳＫ的保护,二者之间在ＳＫ的发生发展中可能存在拮抗作用。检测二者有一定的参考价值。