食管上皮癌变过程中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子FAS、FASL、FADD和caspase-8基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法用免疫组化SP法检测食管黏膜中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达;原位杂交法检测食管黏膜中FADDmRNA和caspase-8mRNA的表达。结果从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FAS蛋白表达率呈逐渐下降趋势,FASL蛋白表达率呈逐渐上升趋势,食管癌与正常组织之间差异明显(P<0·05)。高、中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌(P<0·05)。从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FADD和caspase-8蛋白及RNA阳性表达率呈逐渐下降趋势,食管癌与正常黏膜组织之间差异明显(P<0·01);caspase-8蛋白和mRNA在高、中分化鳞癌中的表达率高于低分化鳞癌(P<0·05)。结论FAS与FASL的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,并与食管癌的分化和免疫逃避有关。FADD与caspase-8基因表达异常在食管癌的发生、发展中可能起着重要作用。     

E钙黏蛋白、c-Src蛋白在胃癌中的表达及其与侵袭转移的关系

目的 通过检测E钙黏蛋白(E-cadherin,E cad)和c Src蛋白在胃癌中的表达,探讨其在肿瘤转移和侵袭过程中的作用.方法 采取胃癌组织50例,正常胃黏膜10例;应用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化酶连接(SP)法检测E-cad、c-Src蛋白的表达.结果 ①胃癌组织中E cad的阳性表达率为46.0％(23/50),显著低于正常黏膜100％(10/10)(P＜0.01).转移组E-cad阳性表达率35.3％(12/34)明显低于非转移组68.8％(11/16)(P＜0.05).与临床分期、浸润分级的关系显示,Ⅲ～Ⅳ期和T3～T4级癌组织中E-cad表达分别明显低于Ⅰ～Ⅱ期和T1～～T2级(均P＜0.05).E cad表达还与组织学分级相关,胃癌分化程度低,其阳性表达率也低,分化程度高,阳性表达率也高(P＜0.05).②c-Src蛋白在Ⅲ～Ⅳ期的表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05);T3～T4级c-Src蛋白表达高于T1～T2级(P＜0.05).结论 c-Src蛋白在胃癌中均呈高表达,而E-cad则反之.E cad表达减弱与胃癌侵袭转移潜能相关,可作为胃癌侵袭转移的生物学标志之一.     

肾癌中EphA2/EphrinA1和E-cadherin的表达及其意义

目的：探讨EphA2/EphrinA1和E—cadherin在肾癌组织中的表达及与肾癌临床病理特征的关系．方法：利用免疫组织化学法检测68例肾癌组织、24例正常肾组织中EphA2、EphrinA1和E—cadherin的表达；并采用流式细胞术对上述三种蛋白进行定量分析，采用SPSS13．0进行统计学处理。结果：肾癌组织中EphA2、EphrinA1的表达明显高于正常肾组织（P〈0．01）；E-cadhetin的表达明显低于正常肾组织（P〈0．01）。在肾癌组织中，肿瘤高分级组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平（IHC、FCM）显著高于低分级组（P〈0．01，P〈0．05），而E—eadherin蛋白的表达（IHC）显著低于低分级组（P〈0．01）；肿瘤高分期组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平（IHC、FCM）显著高于低分期组（P〈0．01，P〈0．05），而E—cadherin蛋白的表达（IHC）显著低于低分期组（P〈0．01），淋巴结转移组EphA2、EphrinA1蛋白的表达（IHC、FCM）显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。而E—cadherin蛋白的表达（IHC）显著低于无淋巴结转移组（P〈0．05）。免疫组织化学显示EphA2与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（r=-0．483，P〈0．01），EphrinA1与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（E-0．414，P〈0．01）．EphA2与EphrinA1蛋白的表达呈显著正相关（r=-0．906，P〈0．01）。结论：EphA2／EphrinA1与E—cadherin蛋白表达异常可能共同参与了肾癌的发生、发展与转移；联合检测三种蛋白对于评价肾癌的恶性程度、判断其转移潜能具有一定的参考价值。     

流式细胞术对脑星形细胞肿瘤的评价

本文共收集脑星形细胞瘤32例(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级各8例)及肿瘤旁正常脑额叶组织8例为对照组,分别以流式细胞术测定其DNA指数,细胞周期分布及细胞分裂增殖指数,获得下列数据:各级肿瘤组DNA指数依次为1.05±0.05,1.19±0.10,1.37±0.06,及1.48±0.05.对照组为1.00±0.08.各组与对照组相比,除星形细胞瘤Ⅰ级外,余各组P值均<0.01,有显著差异,对协助肿瘤分级有价值.经15例肿瘤随访,其中半年内死亡者,其P值亦<0.01,故有助于对患者预后的估计.     

NS-398对人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及其机制的研究

目的：本研究应用NS-398对肝癌细胞株进行药物干预，探讨NS-398对肝细胞癌凋亡的影响。方法：NS-398取0、25、50、75、100μmol／L 5个浓度组，每个浓度组选取24h、48h、72h三个作用时间点。MTT法测定生长抑制情况，FCM检测细胞周期、凋亡率和Survivin、cyclin D1、PTEN的表达。结果：NS-398可以显著抑制BEL-7402细胞增殖，使G0／G1期比例显著降低；G2／M期比例显著增高并且诱导细胞凋亡（P〈0．001），并呈时间和剂量依赖性。与对照组相比．NS-398使Survivin、cyclin D1、PTEN蛋白表达显著下调并呈时间和剂量依赖性关系（P〈0．001）．结论：NS-398可诱导BEL-7402细胞凋亡．可能部分通过下调Survivin和PTEN途径实现的。     

尼美舒利对食管癌Eca-109细胞生长的影响及其可能机制

目的:探讨尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞生长和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用MTT比色法检测尼美舒利对Eca-109细胞体外生长的抑制作用;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,琼脂糖凝胶电泳法进一步观察细胞凋亡;RT-PCR法检测COX-2、PPARγmRNA表达变化,Western blot检测PPARγ蛋白表达变化。结果:尼美舒利(50~400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长作用增强,呈剂量-时间效应关系;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,凋亡细胞增多并出现典型的凋亡细胞DNA ladder。此外,尼美舒利可下调COX-2表达并上调PPARγ表达。结论:尼美舒利能抑制Eca-109细胞的生长,其机制可能是通过抑制Eca-109细胞增殖、诱导细胞周期G0/G1期阻滞、细胞凋亡、下调COX-2表达、上调PPARγ表达而实现的。     

NS-398对肝癌SMMC-7721和BEL-7402细胞凋亡和survivin、PTEN表达调节作用的研究

目的:研究应用NS398对肝细胞癌细胞株进行药物干预,探讨NS398对肝细胞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:人肝细胞癌细胞株SMMC7721、BEL7402细胞常规培养。NS398取0、25、50、75、100μmol/L5个浓度组,每个浓度组选取24、48、72h三个作用时间点进行检测,观察NS398对各细胞株的作用。MTT法测定2种细胞株的增殖抑制情况,FCM检测对细胞周期和凋亡的影响,FCM定量检测COX2、survivin、PTEN的表达。结果:MTT法结果显示,NS398可以显著抑制SMMC7721、BEL7402细胞增殖。FCM检测结果显示,NS398分别使SMMC7721、BEL7402细胞G0/G1期比例显著降低;G2/M期细胞比例显著增高,S期细胞比例无明显变化,并引起了显著的细胞凋亡(P<0.001),并且呈时间依赖性和剂量依赖性。与对照组相比,NS398使COX2、survivin和PTEN蛋白表达显著下调并且呈时间和剂量依赖性关系(P<0.001)。结论:NS398通过诱导SMMC7721、BEL7402细胞株凋亡而抑制其增殖,可能部分通过下调survivin和PTEN途径实现的。     

用流式细胞术检测小儿网织红细胞

用流式细胞术（ＦＣＭ）检测８０例小儿外周血网织红细胞计数和网织红细胞平均ＲＮＡ含量，并与光镜测得网织红细胞计数值对照。试用ＦＣＭ将网织红细胞分期。研究表明：８０例ＦＣＭ测得网织红细胞计数明显高于光镜检测结果（Ｐ＜０．０１），ＦＣＭ测得网织红细胞计数值与网织红细胞平均ＲＮＡ含量有相关关系。ＦＣＭ的网织红细胞分期可迅速、准确地反映各期网织红细胞的变化，对各种贫血包括化疗或放疗对骨髓红细胞生成功能的影响     

柔肝健脾饮对乳腺癌患者外周血中粒细胞表面抗原CD13的影响

目的观察柔肝健脾饮对乳腺癌患者外周血中粒细胞表面抗原CD13表达强度的影响。方法将32例乳腺癌患者随机分为A、B组,行联合化疗和中药辅助化疗交叉对照试验。第1个疗程:A组16例采用联合化疗方法 ,B组16例予化疗加柔肝健脾饮口服;第2个疗程:2组治疗方案进行互换,即A组在联合化疗的基础上给予柔肝健脾饮口服治疗,B组单纯采用联合化疗方法。2组均21d为1个疗程,2个疗程无间隔。各疗程结束时分别观察2组外周血中粒细胞表面抗原CD13表达、卡氏评分分值、体质量及生活质量问卷-Base(Base表)和生活质量问卷-Breast(Breast表)总分值情况,并于第2个疗程结束后进行疗效比较。结果柔肝健脾饮配合联合化疗降低外周血中粒细胞表面抗原CD13的阳性标记率、提高卡氏评分、降低Base表评分及Breast表评分的作用均优于单纯化疗法(P0.05)。结论柔肝健脾饮能提高乳腺癌患者生活质量,同时降低外周血中粒细胞表面抗原CD13的阳性标记率。     

石蜡包埋肿瘤的流式细胞分析:对诊断病理学的意义

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)DNA 分析,对于判定人类各类型肿瘤的预后和治疗反应具有重要价值。由于各种原因,FCM 在实性肿瘤研究方面尚未得到广泛应用。外科获得的新鲜肿瘤组织标本进行流式分析是不方便的,常常也是不可能的。大多数的肿瘤标本是小的,直到包埋的肿瘤组织满足后或抛弃不要时才有希望作 FCM 分析。许多肿瘤又是相当罕见的,期望得到有价值的流式分析新鲜肿瘤组织资料会花费多年的时间。当流式分