葫芦素B对IL-1β诱导的软骨细胞损伤及 胞外基质代谢紊乱的影响

目的 明确葫芦素B对白细胞介素（IL）-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响。方法 用 不同浓度（0.5、1、5、10、20 µmol/L）的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β（10 µg/L）处理。采用CCK-8法检测 细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶（LDH）及Caspase-3的活性,确定葫芦素B最佳处理浓度。采用流式细胞术检测细 胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞胞外基质代谢相关的Ⅱ型胶原（CollagenⅡ）及蛋白多糖aggrecan、基质金属蛋白酶 （MMP）-3及MMP-13的mRNA水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2（PGE2）的水 平,同时检测一氧化氮（NO）的产生;采用Western blot分析葫芦素B对IL-1β介导的软骨细胞中核因子（NF）-κB信号 通路活化的影响。结果 葫芦素B剂量依赖性地减弱IL-1β对软骨细胞存活的抑制效应（P＜0.05）,同时抑制IL-1β 诱导的LDH释放、细胞凋亡及Caspase-3活性（P＜0.05）,10 µmol/L是其最佳实验剂量。与IL-1β处理组相比,葫芦 素B处理可减缓IL-1β对CollagenⅡ、aggrecan的mRNA表达抑制效应（P＜0.05）。此外,葫芦素B还可抑制IL-1β诱 导的MMP-3及MMP-13的mRNA表达及释放（P＜0.05）,降低炎性介质NO、PGE2的产生（P＜0.05）。同时,IL-1β可 明显上调软骨细胞中p-IκB、p-p65 NF-κB的表达,而葫芦素B则可抑制上述分子的表达（P＜0.05）。结论 葫芦素 B可能通过阻断NF-κB信号通路的激活抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤及代谢紊乱,提示其具有潜在的抗骨关节炎 的功效。     

补阳还五汤对类风湿关节炎小鼠MPO，NE mRNA表达及TNF-α，IL-1β，IL-6，IL-17的影响

目的:观察不同剂量的补阳还五汤对类风湿关节炎模型小鼠膝和踝关节滑膜中性粒细胞标志物髓过氧化物酶(myeloperoxidas,MPO),中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE) mRNA表达及血清和关节液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-a,TNF-α),白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL~(-1)β),白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6),白细胞介素-17(interleukin-17,IL~(-1)7)的影响。方法:将小鼠随机分为正常组,模型组,甲氨喋呤组(0. 001 5 g·kg~(-1)),补阳还五汤2. 5,1. 25,0. 625 g·kg~(-1)组。采用胶原诱导的方法制备类风湿关节炎小鼠模型,连续灌胃给药28 d后使用病理学方法分析小鼠治疗效果,使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清及关节液中炎性因子的表达,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测膝和踝关节滑膜中性粒细胞标志物蛋白MPO及NE mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠关节明显肿胀(P 0. 01),关节病理积分、血清及关节液中炎性因子水平,膝及踝关节中MPO,NE mRNA表达水平较明显升高(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,补阳还五汤组(2. 5 g·kg~(-1))治疗28 d后小鼠小鼠关节肿胀明显减轻(P 0. 05,P 0. 01),关节病理积分、血清及关节液中炎性因子水平,膝及踝关节中MPO,NE mRNA表达水平较明显下降(P 0. 05,P 0. 01)。结论:适宜剂量的补阳还五汤可下调小鼠膝和踝关节滑膜中性粒细胞标志物蛋白MPO及NE mRNA表达水平,从而抑制中性粒细胞活性,降低血清和关节液中炎性因子TNF-α,IL~(-1)β,IL-6和IL~(-1)7的水平。     

王衍全教授治疗类风湿性关节炎经验

王衍全教授早年毕业于北京中医学院(现北京中医药大学),师从著名骨伤科专家刘寿山,现为河南中医学院骨伤学科带头人,硕士研究生导师.在其近40年的临床中积累了丰富的临床经验,笔者有幸得到王老师的教诲,现对其治疗类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的经验总结如下.     

加味散膝汤联合塞来昔布治疗膝关节滑膜炎寒湿痹阻证的疗效观察

目的:观察加味散膝汤联合塞来昔布对膝关节滑膜炎寒湿痹阻证患者的临床疗效。方法:120例患者随机分为对照组和治疗组,各60例。对照组口服塞来昔布胶囊,治疗组口服塞来昔布胶囊+加味散膝汤,疗程均为30 d。治疗前后分别观察两组患者的疼痛视觉模拟评分(VAS),美国膝关节协会膝关节功能(AKS),关节炎影响评定量表(AIMS)和骨性关节炎指数量表(WOMAC);测量膝关节周径,关节腔积液和滑膜增生厚度;检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3),血清白细胞介素-1(IL-1)和血沉(ESR)的含量;观察两组有效率和不良反应。结果:治疗组总有效率94. 8%(55/58),高于对照组的80. 7%(46/57)(P 0. 05);与本组治疗前比较,两组治疗后VAS,AIMS,WOMAC,膝关节周径,关节腔积液,滑膜增生厚度明显降低(P 0. 05),AKS评分明显升高(P 0. 05);治疗后与对照组比较,观察组VAS,AIMS,WOMAC,膝关节周径,关节腔积液,滑膜增生厚度明显降低(P 0. 05),AKS评分明显升高(P 0. 05)。与本组治疗前比较,两组TNF-α,MMP-3,IL-1和ESR含量明显降低(P 0. 05);治疗后与对照组比较,观察组TNF-α,MMP-3,IL-1和ESR含量明显降低(P 0. 05)。治疗组不良反应发生率5. 89%(4/58),低于对照组的22. 81%(13/57)(P 0. 05)。结论:散膝汤联合塞来昔布可有效改善膝关节滑膜炎寒湿痹阻证患者的临床症状,不良反应发生率低。     

胸骨巨大骨巨细胞瘤1例

患者,男,35岁,2002年11月15日因劳累致胸部疼痛,休息后疼痛不减,后逐渐局限在胸骨体前方,触之高突,压痛明显,伴全身无力.于2003年2月20日来我院诊治.经临床检查、X线片、CT及病理检查确诊为胸骨骨巨细胞瘤.     

金丝桃苷对IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞损伤的影响

目的探讨金丝桃苷对IL?1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞活性、炎性因子水平、细胞外基质(ECM)平衡,以及核因子NF?κB信号通路的影响。方法分离培养BALB/c小鼠骶髂关节软骨细胞,并将其随机分成5组,对照组、IL?1β组、IL?1β+金丝桃苷(25、50、100μg/mL)组。MTT检测细胞活性;ELISA试剂盒检测白介素(IL)?6、肿瘤坏死因子(TNF)?α、Ⅰ型胶原(Col?Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col?Ⅲ)水平;Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)?3、MMP?9、p?IκB?α和p?p65的表达。结果IL?1β处理显著抑制软骨细胞活性,提高IL?6和TNF?α水平,降低Col?Ⅰ和Col?Ⅲ的水平,并上调MMP?3、MMP?9、p?IκB?α和p?p65的表达;而金丝桃苷呈浓度依赖性抑制IL?1β诱导的细胞活性下降,IL?6和TNF?α水平上升,Col?Ⅰ和Col?Ⅲ水平下降,以及MMP?3、MMP?9、p?IκB?α和p?p65的表达上调。结论金丝桃苷能够抵抗IL?1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞损伤,提高细胞活性、抑制炎性因子和ECM紊乱,这与其抑制NF?κB信号通路有关。     

大黄素对TNF⁃α诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响

目的探讨大黄素对TNF?α诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响。方法将人类风湿关节炎成纤维样滑膜HFLS?RA细胞随机分为对照组(未处理)、诱导组(TNF?α处理)、25μmol/L大黄素组(TNF?α和大黄素处理)、50μmol/L大黄素组(TNF?α和大黄素处理)和100μmol/L大黄素组(TNF?α和大黄素处理)。采用MTT法和克隆形成实验检测细胞的存活率和克隆形成率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,RT?PCR检测凋亡相关基因Bcl?2和Bax mRNA的表达,ELISA检测细胞上清液中IL?6和IL?1β水平,Western blot检测细胞中NF?κB信号通路相关蛋白p?IκBα和p?NF?κB p65的表达。结果TNF?α能够使HFLS?RA细胞的存活率、克隆形成率、Bcl?2 mRNA的表达和p?IκBα、p?NF?κB p65蛋白的表达以及细胞上清液中IL?6和IL?1β水平升高(P<0.05),而细胞凋亡率和Bax mRNA表达降低(P<0.05);25、50、100μmol/L大黄素能够呈浓度依赖性抑制TNF?α引起的上述变化(P<0.05)。结论大黄素可能通过抑制NF?κB信号通路的活化抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖和炎症反应。     

敦复汤加减治疗脾肾阳虚型强直性脊柱炎临床观察

目的:观察敦复汤加减治疗脾肾阳虚型强直性脊柱炎(PSYXAS)的疗效及安全性。方法:将209例PSYXAS患者随机分为中药组(69例)、西药组(67例)和中西药组(73例)。中药组给予敦复汤加减治疗,西药组给予双氯芬酸钠缓释片治疗,中西药组同时给予敦复汤加减和双氯芬酸钠缓释片,疗程均为63 d。比较各组治疗前后脊柱疼痛视觉模拟评分(VAS),活动度衡量指数(BASMI),疾病功能指数(BASFI)、患者整体评分(PGA)和中医辨证脾肾阳虚证评分;检测治疗前后C反应蛋白(CRP),血沉(ESR),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血小板(PLT)的变化;比较各组有效率及不良反应发生率。结果:治疗后中西药组总有效率93. 1%,显著高于中药组的75. 4%和西药组的71. 6%(P 0. 01);与西药组相比,中药组和中西药组脾肾阳虚证评分改善更为明显(P 0. 05);其他临床症状中西药组评分改善均较中药组和西药组改善更为明显(P 0. 05),中药组与西药组之间则无显著差异;不良反应的发生率中药组(1. 45%,1/69)中西药组(8. 22%,6/73)西药组(16. 42%,11/67)。结论:敦复汤加减治疗PSYXAS的疗效与西药双氯芬酸钠缓释片无明显差异,具有效性,且不良反应的发生率较双氯芬酸钠缓释片低。敦复汤加减结合双氯芬酸钠缓释片治疗PSYXAS疗效优于西药双氯芬酸钠缓释片。     

蚕矢汤加减治疗痛风性关节炎湿热蕴结证临床观察

目的:观察蚕矢汤加减及其联合秋水仙碱治疗痛风性关节炎湿热蕴结证的疗效及安全性。方法:将258例患者随机分为中药组、西药组和中西药组,每组各86例。中药组口服蚕矢汤加减,西药组口服秋水仙碱,中西药组同时口服蚕矢汤加减联合秋水仙碱,疗程均为14 d。观察治疗前后各组临床症状,血清尿酸(SUA),血沉(ESR),C-反应蛋白(CRP)和白细胞介素-6(IL-6)的变化;比较各组总有效率、不良反应发生率及随访3个月患者的复发率。结果:治疗过程中药组剔除3例,西药组剔除2例,中西药剔除5例。中西药组总有效率93.8%,优于中药组的81.9%和西药组的83.3%(P0.05),中药组与西药组比较无明显差异;中西药组各临床症状和实验室检查指标改善较中药组和西药组更为明显(P0.05),中药组与西药组比较无统计学意义;不良反应发生率中药组(3.6%)中西药组(60.5%)西药组(82.1%)(P0.05);复发率中西药组(7.4%)中药组(20.5%)西药组(26.1%)(P0.05)。结论:蚕矢汤加减治疗痛风性关节炎湿热蕴结证的疗效与西药秋水仙碱无明显差异,说明其具有有效性,且不良反应的发生率和复发率较秋水仙碱低;蚕矢汤加减联合秋水仙碱治疗痛风性关节炎湿热蕴结证具有协同增效的作用,疗效优于单用蚕矢汤加减或秋水仙碱,且可降低秋水仙碱的不良反应、复发率低。