加工方法对金银花质量的影响

目的:研究不同加工方法对金银花中绿原酸、木犀草苷和氨基酸含量的影响。方法:分别采用高效液相色谱法和GB/T 8314—2002茶-游离氨基酸测定不同加工方法处理的金银花中绿原酸、木犀草苷和氨基酸含量,记录金银花的外观、水浸出物、酸不溶性灰分和总灰分。结果:微波杀青后低温干燥的方法具有良好的外观性状,经微波杀青低温干燥处理后,绿原酸和木犀草苷的含量较高,氨基酸含量降低,绿原酸、木犀草苷和氨基酸含量之和最高(P 0. 05),微波杀青低温干燥的总灰分均较低(P 0. 05)。结论:微波杀青低温干燥法是合适的金银花加工方法,值得在种植区推广。     

不同生长期太子参药效成分HPLC分析

目的考察不同生长期太子参药效成分环肽B动态变化规律,确立太子参的最佳采收期,为太子参GAP生产提供依据。方法采用HPLC法,色谱柱为Hedera ODS-2C18(4.6mm×250mm,5μm),以水-乙腈为流动相,流速为1.0mL/min,柱温30℃,检测波长203nm。结果不同生长时期太子参环肽B含量差异较大,在5月和7月含量较高。结论综合考虑药效成分含量与产量,太子参合理采收期应为7月,试验结果为太子参资源的开发利用提供了参考依据。     

蒲公英质量标准提升及不同产地药用蒲公英质量评价

目的:提升蒲公英药材质量标准,并评价不同产地药用蒲公英药材的质量。方法:在2020年版《中国药典》(一部)"蒲公英"项下规定的基础上,增加水溶性浸出物(热浸法)、醇溶性浸出物(热浸法)、总黄酮、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸和异绿原酸A的含量测定方法,同时以8个产地42批药用蒲公英药材为对象建立高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并基于上述结果进行主成分分析。结果:42批药用蒲公英药材的醇溶性浸出物含量为15.30%~30.40%,水溶性浸出物含量为27.59%~38.96%。总黄酮(紫外-可见分光光度法)和绿原酸、咖啡酸、菊苣酸、异绿原酸A(HPLC法)的质量浓度分别在0.016~0.096、0.003~0.196、0.004~0.117、0.025~1.578、0.002~0.152 mg/mL范围内线性关系良好(R~2均大于0.9990);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.00%(n=6);平均加样回收率为98.97%~103.53%,RSD为1.19%~1.58%。42批药用蒲公英药材中总黄酮、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸、异绿原酸A的含量分别为0.734%~3.700%、0.004%~0.123%、0.006%~0.087%、0.073%~1.499%、0.005%~0.109%。42批药用蒲公英样品的HPLC指纹图谱共有峰相对保留时间的RSD为0~0.94%,相对峰面积的RSD为0~125.57%,其中39批样品相似度大于0.900。主成分分析结果显示,陕西产药用蒲公英药材的综合质量较优,河北产药材次之。结论:拟定蒲公英药材中醇溶性浸出物、水溶性浸出物、总黄酮、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸、异绿原酸A的含量分别不得低于17.0%、27.0%、1.383%、0.024%、0.021%、0.450%、0.021%。陕西产药用蒲公英药材除咖啡酸含量相对较低外,其余各项指标均较优;河北产药材的咖啡酸含量高于陕西产药材,其他各项指标略低于陕西产药材;其余产地的药用蒲公英药材综合质量相对较差,且同一产地不同批次间的药材质量不稳定。     

黑三棱苯丙氨酸解氨酶基因克隆与序列分析

目的 对连接黑三棱初生代谢及次生代谢途径的关键酶苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase,PAL）进行基因全长的克隆和生物学信息分析。方法 以黑三棱总RNA为模板,采用同源克隆法和RACE技术克隆黑三棱PAL基因的cDNA全长,并通过DNAMAN软件和ExPASy在线分析等方法对其生物信息学进行分析。结果 获得黑三棱PAL基因全长cDNA,GenBank注册号为KF633470,序列分析表明,所克隆的cDNA全长为2 413 bp,包含一个2 151 bp的开放阅读框架,编码716个氨基酸的蛋白。预测该蛋白的相对分子质量为1.98×10⁵,等电点为4.84,无信号肽,含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG。结论 首次克隆并获得黑三棱PAL基因全长cDNA,为黑三棱药效成分生源合成途径的阐明和改善中药材品质提供科学依据。     

不同产地茅苍术HPLC指纹图谱研究

目的 建立茅苍术HPLC指纹图谱,为科学评价其质量提供可靠方法 .方法 采用HPLC法,色谱柱为KromasilC18分析柱(5 μm,4.6 mm×250 mm);检测波长:300 nm;体积流量:1.0 mL/min;柱温:25℃;流动相:A相为水溶液,B相为乙腈,线性梯度洗脱.结果 确定了11个共有峰,各样品图谱与对照图谱相似度均在0.9以上.结论 所建立的HPLC指纹图谱具有良好的精密度、重现性和稳定性,可以作为茅苍术质量评价的主要依据之一.     

铜胁迫对茅苍术光合特性及生理指标的影响

目的:研究不同铜浓度水平对茅苍术光合特性及生理指标的影响,为其主产区的无公害栽培提供参考依据。方法:采用盆栽实验方法,研究6种铜胁迫浓度处理对茅苍术叶片光合及生理特性指标的变化规律。结果:铜胁迫浓度在100 mg/kg以内,随着胁迫的进行,茅苍术的净光合速率、气孔导度、蒸腾速率都较高,胞间二氧化碳浓度较低;超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活性及丙二醛、脯氨酸含量保持在较低水平。铜浓度超过300 mg/kg时,茅苍术的光合速率显著下降,活性氧含量积累增加,三种抗氧化酶活性升高,同时膜脂过氧化程度升高与细胞膜透性的增强使丙二醛和脯氨酸含量上升。结论:低浓度的铜离子胁迫对茅苍术的生长发育有促进作用,100 mg/kg以内是较适宜的浓度。高浓度铜胁迫会对植物体造成一系列的迫害作用,影响茅苍术正常的生长发育。     

大叶香薷的生药鉴定

对江苏产大叶香薷进行了生药性状和显微鉴定,对其挥发油化学成分进行了分离和鉴定研究,为大叶香薷的开发利用和临床应用提供了依据。     

白花蛇舌草细胞悬浮培养的建立与条件优化

目的利用白花蛇舌草茎尖的愈伤组织建立细胞悬浮培养系,并通过实验研究不同条件对白花蛇舌草细胞悬浮培养细胞生长的影响。方法采用单因素试验对不同种类、不同浓度的激素及其组合、碳源的种类以及碳源浓度、起始的pH值对白花蛇舌草细胞悬浮培养细胞生长的影响作用进行研究。结果最适pH=6.5,激素以NAA效果最好,其中NAA最佳浓度为1.5mg·L-1。组合激素对细胞的生长的促进作用和单种激素相比,没有明显增强。蔗糖比葡萄糖更适合作为碳源,蔗糖的最佳浓度为30g·L-1。结论本试验建立了白花蛇舌草的细胞悬浮培养系,提出了培养的最优条件,可以用以大量生产。     

组培茅苍术挥发油的气相色谱质谱联用分析

目的:分析组织培养再生植株栽培后所得茅苍术的根茎中所含挥发油的化学成分,对组织培养技术生产的茅苍术药材进行品质评价.方法:采用水蒸气蒸馏提取法提取药材挥发油,利用GC-MS联用技术进行分析.结果:从组织培养再生植株栽培茅苍术的根茎中鉴定出22个化合物.结论:组织培养技术所生产的茅苍术主要含有β-桉叶醇、苍术醇、苍术素等成分,与野生茅苍术所合成分没有显著差异.     

濒危药用植物茅苍术法呢基焦磷酸合酶基因克隆及其表达分析

目的克隆茅苍术Atractylodes lancea倍半萜类成分生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因全长并分析其表达规律。方法以茅苍术总RNA为模板,运用同源克隆法和RACE技术克隆茅苍术FPPS基因(Al FPPS)的c DNA全长,并进行生物信息学分析;用q RT-PCR和GC-MS分析不同生长阶段FPPS在茅苍术根茎中的表达及倍半萜类成分量变化,并分析二者的相关性。结果获得Al FPPS基因全长c DNA为1 320 bp(Gen Bank accession no.KX443242),含一个长1 029 bp的开放阅读框,编码342个氨基酸,包含5个保守功能域,其中2个富含天冬氨酸(DXXDD)。q RT-PCR及GC-MS结果显示不同时期茅苍术Al FPPS基因表达量与倍半萜类成分量呈显著正相关。结论首次克隆获得Al FPPS基因的全长c DNA,初步证明Al FPPS基因是茅苍术倍半萜类成分生物合成途径中的重要调控位点,为茅苍术倍半萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据。