风湿宁五号方镇痛作用及治疗类风湿性关节炎的机制研究

目的:探讨风湿宁五号方治疗类风湿性关节炎(RA)的作用及其药理作用机制。方法:采用小鼠冰醋酸扭体法观察风湿宁五号方的镇痛作用;采用弗氏佐剂法加低温乙醇浸踝法观察风湿宁五号方对RA大鼠抗炎及对血液流变学的影响。结果:五号方各组均可不同程度减少小鼠扭体次数,其中0.36 mg/kg组抑制效应有显著差异(P<0.01);各剂量组对RA模型大鼠血流变指标都有所改善,五号方高剂量组大鼠全血黏度(低切、高切)、血浆黏度、红细胞聚集指数显著降低(P<0.05,P<0.01),红细胞变形指数显著升高;各剂量组对RA模型大鼠炎症细胞因子都有所改善,五号方高剂量组IL-1α、IL-6、TNF-β的水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:风湿宁五号方具有很好的镇痛功效,且对RA模型在血流变和炎症细胞因子方面有一定的改善作用。     

HPLC测定山西安泽青翘、老翘主要成分含量

目的: 比较山西安泽青翘与老翘中连翘酯苷、连翘苷,芦丁的含量,为临床上连翘的合理应用、保证临床疗效提供理论依据。 方法: 青翘、老翘药材粉末中加甲醇超声波提取45 min;采用HPLC测定3种主要成分的含量,色谱柱为HITACHI C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相甲醇-0.1%醋酸水,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温25 ℃,测定波长280 nm,进样量10 μL。 结果: 青翘中连翘酯苷,连翘苷、芦丁的含量分别为2.38%, 0.37%, 0.26%;老翘中3种成分的含量分别为0.74%, 0.20%,0.09%。 结论: 山西安泽青翘中连翘酯苷、连翘苷、芦丁的含量均明显高于老翘。     

BrdU体外示踪大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化

背景：目前还未找到一个理想的标记性分子用来鉴定骨髓间充质干细胞,因此也就不能保证骨髓间充质干细胞的同质性。 目的：以BrdU体外示踪标记验证大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导后的分化潜能。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-01/10在山西医科大学完成。 材料：4周龄Wistar大鼠由山西医科大学实验动物中心提供。 方法：密度梯度离心+贴壁培养法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,达80%融合时胰蛋白酶消化传代扩增。取5×1010 L-1个骨髓间充质干细胞接种于25 mm培养皿,加入含地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和体积分数为10%胎牛血清的L-DMDM培养基进行成骨诱导。取第3代骨髓间充质干细胞,加入终浓度为10 μmol/L BrdU进行体外示踪,200倍荧光显微镜下随机选取10个视野,通过计数阳性细胞与非阳性细胞数得到BrdU标记率。 主要观察指标：倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面抗原,观察诱导后成骨分化潜能,体外BrdU标记率。 结果：分离纯化的骨髓间充质干细胞呈均一的成纤维细胞样,贴壁生长,以长梭形为主,传至第3代呈明显的同向性改变,漩涡状盘旋排列,细胞存活率均大于95%,至第7代仍未见细胞生长减缓现象;CD44,CD71,CD105均呈阳性表达,CD45呈阴性表达;成骨诱导后Von kossa染色可见骨髓间充质干细胞中有黑色颗粒沉积;BrdU标记率>90%。 结论：密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,可在体外长期培养,并具有成骨分化潜能;BrdU可成功标记骨髓间充质干细胞,是安全、有效、便捷的体外示踪方法。     

从肠道微生态角度探讨免疫疗法在癌症治疗中的作用

癌症的发生与基因突变引起的细胞生长紊乱有关,该过程会激活原癌基因,包括刺激或抑制肿瘤增殖和转移的特定基因激活或失活[1]。近年来,癌症免疫疗法成为肿瘤治疗的焦点,被认为是继手术、放疗和化疗之后的又一有效疗法。免疫疗法被广泛用于治疗各种恶性肿瘤,目前,免疫检查点抑制剂(immune checkpointinhibitors,ICI)在治疗黑素瘤、肾细胞癌、 非小细胞肺癌等实体癌以及血液系统恶性肿瘤等方面取得较好疗效[2]。免疫抑制检查点包括程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4),它们主要是通过干扰CD3/CD28依赖性信号,抑制信号向肿瘤细胞或T细胞传递来抑制 免疫反应[3]。最近,有证据表明微生物群可能会影响癌症免疫治疗的结果:比如,广谱抗生素的使用会极大地破坏肠道微生物,并且观察到抗生素对ICI治疗 的有害作用,包括对ICI反应下降、肿瘤早期发展以及总生存期缩短[4];这些证据提示肠道菌群对于ICI治疗的反应至关重要。     

黄芪糖蛋白的分离纯化及其理化性质、组成成分分析

目的： 提取分离、纯化具有免疫抑制活性的黄芪糖蛋白（AmGP-2）并考察其理化性质、组成成分。 方法： 黄芪经水浸提,盐析分离,sevage试剂脱游离蛋白等方法提取糖蛋白,采用阴离子色谱柱和凝胶色谱柱进行纯化。通过苯酚-硫酸法、BCA、Molish试验、茚三酮反应、气相色谱分析、氨基酸分析、SDS-PAGE、UV、IR、β-消去反应等分析黄芪糖蛋白的理化性质及组成成分。 结果： AmGP-2易溶于水,等电点约4.7,蛋白质、糖类成分质量分数依次为56.7%,29.3%,相对分子质量约31 kDa;含有18种氨基酸,其中天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸含量较高;糖链部分含有阿拉伯糖、葡萄糖及2种未确定的单糖。 结论： AmGP-2具有显著的免疫抑制活性,为中药免疫抑制剂的开发提供参考。     

C-反应蛋白对老年人感染性疾病诊断试验评价

目的　探讨C 反应蛋白 (CRP)对老年感染性疾病诊断价值。方法　对 1 4 2例感染性疾病和 2 1 6例非感染疾病老年患者 ,测定血清C 反应蛋白。以CRP 7～ 2 0mg L、2 1～40mg L和 41～60mg L分层 ,计算诊断试验评价指标。结果　各种感染性疾病老年患者CRP平均水平 (30 .1± 2 .8～69.3± 35.6)mg L ,明显高于对照组 (5 .2± 2 .9)mg L。分层分析显示CRP诊断感染性疾病特异度为83 .3 %～ 99.0 % ,阳性似然比为 3.6、2 7.0和 1 2 8.0。结论　CRP是老年感染性疾病重要诊断指标     

高糖高脂对人骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响

<正>骨髓间充质干细胞(BMSCs)是成体干细胞的一种,是骨髓中除了造血干细胞(HSC)外的另一类间充质干细胞,可分化为成骨、成软骨、脂肪、肌腱样组织等结构[1]。BMSCs取材相对容易,体外适当培养仍然保持多向分化潜能,有利于自体