卵清蛋白致过敏性腹泻小鼠血清和胃组织中5-羟色胺系统的代谢分析

目的探讨卵清蛋白(OVA)致过敏性腹泻小鼠5-羟色胺(5-HT)信号系统的变化。方法 7~8周龄雌性BALB/c小鼠分为模型组、色甘酸钠处理组和对照组。模型组和色甘酸钠处理组分别在0 d和14 d,腹腔注射OVAⅠ(50μg/只)。28 d后,隔天对小鼠进行口服灌胃OVAⅡ(50 mg/只)激发(共8次)。色甘酸钠处理组从28 d开始,隔天(口服灌胃激发前)给予色甘酸钠(78.0 mg/kg)(共8次)。OVA口服灌胃后对小鼠进行综合评分、粪便评分及测定体温变化。43 d后,处死动物。摘眼球取血离心取血清并取胃组织。ELISA检测血清OVA特异性Ig E(OVA-SIg E)。液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)测定血清中的5-HT及其上下游代谢产物犬尿酸(KYN)、色氨酸(TRP)、5-羟色胺酸(5-HTP)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量,利用实时定量PCR检测过敏小鼠胃组织5-HT代谢相关基因色氨酸羟化酶1(TPH1)、吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)、单胺氧化酶A(MAO-A)、5-HT选择性再摄取转运体(SERT)及其受体5-羟色胺1A受体(HTR1A)、HTR3A、5-羟色胺4受体(HTR4)的mRNA水平。结果 OVA致敏后,小鼠产生严重的过敏性腹泻,血清中的OVA-SIg E明显升高。血清中的KYN显著上升,5-HT、5-HIAA和5-HTP显著下降。胃组织IDO1及其受体HTR1A、HTR3A的mRNA水平增加,TPH1、MAO-A mRNA水平降低。给予色甘酸钠后综合评分、粪便评分、体温及OVA-SIg E明显降低,并且腹泻率也低于模型组,血清中的5-HIAA及胃组织中MAO-A mRNA水平升高,胃组织IDO1、5-HT1A、5-HT3A mRNA水平降低。结论 OVA致过敏性腹泻小鼠5-HT信号系统激活,给予色甘酸钠后,缓解过敏症状并使5-HT代谢相关产物、代谢基因和受体基因的表达发生改变。     

驱虫斑鸠菊对正常小鼠免疫功能的影响

目的探讨驱虫斑鸠菊对小鼠免疫功能的影响,揭示其免疫作用机理.方法利用[3H]-TdR掺入法分别测定了驱虫斑鸠菊对环胞菌素A(Con A)诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞和细菌脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞增殖活性以及脾脏T淋巴细胞分泌白细胞介素-2(IL-2)活性的影响,运用酶联免疫吸附试验测定了驱虫斑鸠菊对小鼠血清中抗体活性的影响;采用流式细胞仪测定脾脏B淋巴细胞表面抗原CD19的表达水平.结果驱虫斑鸠菊的低、中、高3个剂量体内对脾脏T、B淋巴细胞的增殖活性、血清总抗体和针对人A375黑素瘤细胞抗原特异性抗体含量、B细胞表面抗原CD19的表达以及对脾脏T淋巴细胞分泌IL-2活性都具有明显抑制作用.结论驱虫斑鸠菊对机体体液免疫和细胞免疫功能都具有明显抑制作用.     

一阶导数光谱法测定消毒灵中戊二醛的含量

目的:建立消毒灵中戊二醛含量的测定方法.方法:采用一阶导数光谱法,以245.40nm处的"谷-零"距离D值作为戊二醛的定量信息.结果:戊二醛在0.6～3.6mg·mL<'-1>浓度间有良好的线性关系,r=0.9998(n=6),平均回收率为100.01%,RSD=0.17%.结论:本法简便、灵敏、准确,可作为有效测定消毒灵中戊二醛含量的方法之一.     

百合各株系中秋水仙碱提取方法优化及含量测定

目的:对百合各株系中秋水仙碱进行提取方法优化并建立含量测定方法。方法:采用正交实验设计和HPLC法进行提取工艺优化和含量测定。结果:百合各株系中秋水仙碱含量普遍高于对照组,对提取条件进行探讨,确定了最佳工艺条件)。结论:优化及测定方法准确可靠,可用于选育优良品种的质量控制。     

细胞培养在药物研发中的应用

1细胞培养 细胞培养是生物医学中的一项重要技术，应用较为广泛，涉及细胞生物学、生物化学、临床检验学等各个领域。     

基于tyrp1a转基因斑马鱼构建色素障碍性疾病药物筛选模型

为了能够有效地筛选治疗色素障碍性疾病药物,建立一种转基因斑马鱼药物筛选模型。采用斑马鱼酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase-related protein 1a,tyrp1a)基因启动子驱动绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP),构建出tyrp1a转基因斑马鱼,使绿色荧光能够特异性表达在斑马鱼黑素细胞部位。分别给予斑马鱼促进黑素合成的药物N-苯基硫脲(N-phenylthiourea,PTU)和抑制黑素合成的药物黑素细胞刺激素(alpha-melnaocyte stimulating hormone,α-MSH),检测药物对斑马鱼黑素合成和绿色荧光蛋白表达影响。结果显示,PTU可以抑制斑马鱼黑素细胞黑素合成作用,并且降低转基因斑马鱼绿色荧光蛋白表达。α-MSH可以促进斑马鱼黑素细胞黑素合成作用,并促进转基因斑马鱼绿色荧光蛋白表达。本研究成功地建立了一种新的可以用于色素性障碍疾病药物筛选的转基因斑马鱼模型。     

维药驱虫斑鸠菊药材质量标准的研究

目的对驱虫斑鸠菊药材的质量标准进行研究。方法采用薄层色谱法对驱虫斑鸠菊药材中的黄酮进行鉴别,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果建立驱虫斑鸠菊药材薄层色谱鉴别方法以及总黄酮含量测定方法,通过对不同年份生产驱虫斑鸠菊药材的测定,其总黄酮平均含量为89.0mg·g-1。结论该方法简单,稳定,可靠。     

新疆产火绒草地上部分的化学成分

采用柱层析方法进行分离纯化,通过1H,13C NMR等波谱技术,研究新疆产火绒草Leontopodium leontopodioides地上部分的化学成分。从其醇提物中分离鉴定了10个化合物,分别为:异鼠李素(1),槲皮素(2),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(3),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(4),木犀草素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(5),槲皮素-7-O-葡萄糖苷(6),3,4-二咖啡酰基奎宁酸(7),3,5-二咖啡酰基奎宁酸(8),β-谷甾醇(9),β-胡萝卜苷(10)。其中化合物1、2、7和8是首次从该植物中分离得到。     

驱虫斑鸠菊血清药物化学研究

目的研究驱虫斑鸠菊的血清药物化学。方法通过比较驱虫斑鸠菊提取物、给药及未给药大鼠血清的HPLC指纹图谱,确定灌服驱虫斑鸠菊后大鼠血中移行成分。结果经多次重复试验后,确定血清的处理方法为每100μL大鼠血清加入1 mL乙腈沉淀蛋白。驱虫斑鸠菊提取物给药组大鼠血清的HPLC图谱与不给药组空白血清对比有明显不同。含药血清中出现12个移行成分,其中有6个成分含量较高,且与提取物HPLC图谱在相同保留时间出峰,可能为原形成分,4种成分可能为代谢物。结论本研究确定了驱虫斑鸠菊的血中移行成分,为阐明驱虫斑鸠菊治疗白癜风药效物质成分奠定了基础。     

皮肤毒理学检验中的替代方法和整合测试评估方法

近些年,随着实验动物3R原则的兴起,动物替代实验的研究越来越重要.为了使国产化妆品的开发和国际标准接轨,中国加快了替代实验方法在化妆品安全性检验中的应用.针对化妆品对皮肤可能造成的刺激性、致敏性和光毒性等不良反应,本文分别对化妆品皮肤毒理学检验中的替代实验方法及毒理学终点相应的整合测试评估方法(IATA)进行概...