四物汤对小鼠离体子宫收缩模型的生物效应及物质基础评价研究

目的 分析评价四物汤及各分离部位(SW-1～SW-15)对小鼠离体子宫收缩的拮抗效应,并探讨各部位物质基础与效应之间的关系.方法 采用大孔吸附树脂法分离制备各部位样品(SW-1～SW-15);采用小鼠离体子宫收缩模型评价该方及各部位的生物效应;采用HPLC-DAD-ESI-MS法对活性显著部位SW-4中的主要色谱峰进行分析鉴定.结果 四物汤拮抗子宫平滑肌收缩的活性部位主要贡献者是SW-4、SW-7、SW-11 3个部位,部位SW-8、SW-10、SW-13、SW-14也有一定的活性;通过标准化合物对照及质谱特征对活性显著部位SW-4色谱峰进行了归属和指认,鉴定了其中9个化合物分别为没食子酸、原儿茶酸、香草酸、咖啡酸、芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H.结论 四物汤拮抗离体子宫收缩效应源于挥发油部位及除去生物大分子的水溶性部位;水溶性小分子部位经大孔树脂吸附醇梯度洗脱得到了30%～40%(SW-7～8)、60%～80%(SW-10～12)两段活性部位.     

四物汤及衍化方香附四物汤挥发性成分与子宫平滑肌收缩效应相关性分析

目的:探讨四物汤及类方香附四物汤挥发性成分与子宫平滑肌收缩效应之间的相关性.方法:采用GC-MS联用技术对四物汤、香附四物汤及组方中富含挥发性成分药材当归、川芎、香附、木香的挥发油成分进行分析鉴定;采用小鼠离体子宫收缩试验对四物汤、香附四物汤及组方药材挥发性成分的生物效应进行评价;选择相对含量高于1%的挥发性成分(53个)与子宫收缩效应的生物信息建立多变量数学模型,采用主成分分析(PCA)法对其相关性进行分析评价.结果:四物汤、香附四物汤挥发油的GC-MSTIC化学信号主要来源于当归、川芎药材的贡献;香附四物汤中对应于香附、木香的挥发性成分信号数及相对丰度表现均不及两药材挥发油各自的组成及相对含量;PCA分析结果表明21个化学成分对活性贡献率较大,其中对四物汤挥发油活性贡献率较大的成分主要有:(Z)-ligustilide、 cis-ocimene、γ-selinene、 Spathulenol、 3-butylidene phathalide、 (E)-ligustilide等;对香附四物汤挥发油活性贡献率较大的成分主要有:Dehydrocostuslactone、 Cyperene、β-caryophyllene、γ-selinene、 Curcumene、α-elemene、β-cyperone、α-cyperone、 (Z)-ligustilide、 Squalene等,分析结果支持了本实验结果.结论:香附四物汤中的挥发油部位具有显著的抑制子宫平滑肌收缩效应;香附四物汤挥发油活性优于四物汤及各组方药材挥发油,其中作为行气、止痛、调经常用药材的香附、木香挥发性成分与治疗气滞血瘀型痛经密切相关.同时,本文采用的GC-MS和PCA联用方法可以较客观的评价化学成分对活性的贡献率,分析化学成分与生物效应之间的相关性,故该方法可为方剂复杂效应物质的阐明提供思路和方法的借鉴与参考.     

治疗痛经方药的关联规则分析

目的应用关联规则方法探讨治疗痛经方药的用药规律。方法应用计算机检索中医方剂数据库(源于《中医方剂大辞典》)有关治疗痛经的217首方剂,以EXCEL 2000软件建立数据库,收录每首方剂中的单味药进行统计分析。应用关联规则方法中Apriori算法分析方剂中药对的应用规律。结果在治疗痛经的217首方剂中共使用427种药物2 450频次。其中,使用频次在10次以上的依次为当归、川芎、延胡索、赤芍、香附等56味中药,使用总频次为1 622次;关联规则方法分析出使用频次在10次以上的药对当归-川芎、当归-白芍、当归-香附等389对。结论运用用药频率统计与关联规则等数据挖掘方法,能较好地发现中医临床治疗痛经方药的用药规律,为临床遣方用药提供理论指导。     

透脓散组方对大鼠疮疡模型干预作用及其机制的血浆代谢组学研究

目的运用血浆代谢组学方法评价透脓散、穿山甲配伍皂角刺、当归配伍川芎、生黄芪对疮疡大鼠的代谢物及代谢通路的调节作用与机制。方法采用透脓散、穿山甲配伍皂角刺、当归配伍川芎、生黄芪分别干预疮疡模型大鼠,应用液相色谱与四级杆飞行时间质谱联用技术(LC-QTOF-MS)检测各组大鼠血浆代谢指纹图谱,应用主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和单变量统计分析方法探讨血浆中差异代谢物的变化。结果代谢组学分析发现,与正常对照相比,大鼠疮疡模型血浆中11个内源性差异代谢物的代谢被干扰(P0. 05或P0. 01或P0. 001),主要涉及花生四烯酸代谢及磷脂代谢通路。与疮疡炎症模型组相比,透脓散、穿山甲配伍皂角刺、当归配伍川芎、生黄芪均能不同程度回调代谢物水平,透脓散组、生黄芪组对异常代谢的调控作用显著,且优于其他药物组。结论该研究为透脓散治疗体表感染性疾病及中医外科学内治法中"补益托毒"的治疗原理提供了一定的科学依据,该治法可拓展应用于炎症相关性疾病的治疗。     

药材初加工“发汗”过程及其酶促反应与化学转化机制探讨

药材初加工是药材生产与品质形成的重要环节,长期的生产实践和经验积累形成了独具特色、内容丰富的加工方法和技术体系。药材初加工环节中的“发汗”方法是部分根及根茎类、皮类、菌核等药材在干燥加工过程中采用的独特处理方法,既有利于药用部位内部水分向外分布易于干燥,同时又调节和促进着生物组织中的酶系统与微生物群落活力,启动或加速了初生/次生代谢产物的生物转化与化学转化过程,直接影响着药材品质的形成。对药材初加工“发汗”方法形成的历史源流、目的与意义进行了阐述,并对这一独特过程中可能发生的酶活变化及其物质转化机制等进行分析探讨,以期为阐明药材初加工“发汗”原理,为合理地制定药材初加工技术标准及其SOP提供科学依据。     

少腹逐瘀汤对布洛芬在大鼠体内药动学及代谢产物的影响

目的 揭示少腹逐瘀汤（SZD）对布洛芬在大鼠体内药动学特征及代谢产物的影响。方法 采用HPLC-DAD法定量分析SZD与布洛芬合用后布洛芬药动学参数的变化;采用UHPLC-QTOF-MS联用方法,利用碰撞能量梯度（MS^E）和质量亏损过滤（MDF）技术,对SZD与布洛芬合用后布洛芬在血浆、尿液、粪便中的代谢产物变化进行研究。结果 单独给予布洛芬其在大鼠体内吸收较快,0.5 h达峰,与不同剂量SZD合用后,t_max均延长（P＜0.01）,C_max均为下降趋势,但与布洛芬组比较无统计学差异;布洛芬与临床等效量的SZD合用后,AUC显著增高（P＜0.05）,提示其生物利用度提高,表观清除率降低;与5倍临床剂量的SZD合用后,t_1/2z显著降低（P＜0.05）。服药2 h后,布洛芬与不同剂量SZD合用后其血药浓度下降均较布洛芬组缓慢。布洛芬单用时其代谢产物主要为2′-羟基布洛芬、2′-羟基布洛芬-葡萄糖醛酸苷、2′-羧基布洛芬和布洛芬-葡萄糖醛酸苷;与SZD合用后,在血浆、尿液、粪便中共发现17个布洛芬的代谢物,其中粪便中存在羟基化产物、降解产物、乙酰化产物、羟基硫酸化产物等;血浆中存在去甲基化产物、羟基化产物、乙酰化产物以及硫酸酯化产物等;尿液中代谢产物除半胱氨酸共价结合物外与布洛芬单用时一致。结论 布洛芬与SZD合用后,其在大鼠体内的药动学过程发生变化,且该变化与SZD的剂量存在一定关系,为二者临床联合用药及进一步揭示其药效变化与机制提供了一定参考。     

当归-红花药物组合效应物质基础研究

目的 研究不同配比当归-红花药物组合的物质基础与效应的相关性,探索两味中药配伍应用的变化规律。方法 利用中医方剂数据库归纳分析当归-红花配伍比例,并以此设计方案,采用HPLC法分析不同配比当归-红花共煎液与单味药材煎液中阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸、香豆酸量的变化。采用凝血时间和清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基药效指标评价当归-红花配伍的药理效应。结果 获得应用频率前10位的当归-红花不同配比;HPLC分析结果显示,当归配伍红花有利于有效成分的溶出;与同等生药量的单味药相比,当归配伍红花能延长凝血时间,增加DPPH自由基清除率。结论 当归配伍红花具有合理性,有利于两味药材中芳香酸类成分的溶出,这与配伍后凝血时间延长、DPPH自由基清除率增加具有一定的相关性。     

香附四物汤的组方结构与特点

目的:运用聚类分析方法分析香附四物汤组成药物配伍关系;应用关联规则方法Apriori算法分析香附四物汤中药对的组成规律。方法:采用SPSS 16.0软件,对香附四物汤方剂中单味药进行模糊量化处理后,对其组方原则及配伍规律进行探讨分析;从中医方剂数据库中检索出包含香附-延胡索等5个药对治疗痛经的方剂,建立数据库,对其出现频率进行统计分析。结果:香附四物汤方中的当归、香附和延胡索相似度较高,是本方主要组成单元;在154首治疗痛经的方剂中,香附-当归药对使用频次较高,香附-延胡索药对最常与四物汤配合运用。结论:运用用药频率统计与关联规则等数据挖掘方法,能较好地发现中医临床治疗痛经方药的用药规律,为临床遣方用药提供理论指导。     

药材初加工“杀青”环节与药材品质形成的探讨

杀青是药材初加工的重要环节,影响着药材的性状与品质。本文对药用生物及其药用部位经杀青加工的目的与意义、方法和技术、杀青原理,以及杀青对药材品质的影响等进行分析与论述,以期为阐明药材杀青原理和制定规范合理的药材加工标准及其SOP提供借鉴。     

蒲黄与蒲黄炭对血瘀大鼠血液流变性及凝血时间的影响

目的:比较蒲黄及蒲黄炭对血瘀模型大鼠血液流变性及凝血时间的影响。方法:SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,云南白药组0.27 g·kg-1,蒲黄生品水提组1.2 g·kg-1,蒲黄炭水提组1.2 g·kg-1,蒲黄炭粉组1.2 g·kg-1。除正常组外,其余组复制急性血瘀大鼠模型,并比较蒲黄生品、炭品对其血液流变性及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原含量(FIB)的影响。结果:蒲黄及蒲黄炭均能明显降低血瘀大鼠全血高切黏度、血沉、血沉方程K、红细胞刚性指数。在凝血时间影响方面,蒲黄炭能明显缩短血瘀大鼠PT;蒲黄及蒲黄炭均能明显缩短血瘀大鼠APTT,降低其FIB,且生品作用强于炭品。结论:蒲黄及蒲黄炭均能改善血瘀大鼠异常的血液流变学指标,缩短凝血时间,降低纤维蛋白原含量而表现出一定的化瘀止血功效,蒲黄炭的凝血途径多于蒲黄生品,生品在降低FIB方面强于炭品。