脑心清片大鼠长期毒性实验研究

目的 确定脑心清片在大鼠体内毒性的潜在靶器官和未观察到毒性反应剂量。方法 大鼠每天分别ig给予脑心清片低、中、高剂量（生药35、70、140 g/kg）1次,每周6次,连续给药180 d,停药恢复30 d。给药期间和恢复期间观察各组大鼠一般状况,每周测定大鼠体质量及进食量,给药期结束和恢复期结束检测大鼠各项血液学指标和血清生化学指标,并对大鼠脏器进行系统观察和组织病理学检查。结果 脑心清片高剂量组雄性大鼠的进食量在给药期间有一过性轻微减少;脑心清片中、高剂量组大鼠血清总胆红素（TBIL）与对照组相比有轻微降低;其他各项观察及检测指标均未发生与药物相关的异常改变。结论 脑心清片对大鼠ig给药的基本安全剂量为35 g/kg。     

甘精胰岛素注射液的临床前安全性评价

目的 通过Beagle犬长期毒性试验及其伴随的免疫原性试验,观察甘精胰岛素注射液的毒性反应,确定未观察到临床不良反应的剂量水平（NOAEL）,为临床不良反应监测及防治提供参考。方法 健康Beagle犬40条,随机分为甘精胰岛素注射液低、中和高（0.5、1.0、2.0 IU/kg）剂量组、溶媒对照组及原研对照组（来得时,2.0 IU/kg）,每组8只动物,雌雄各半。连续sc给药30天,停药恢复16天。试验期间进行一般体征观察、进食量、体质量、肛温、全血血糖及心电图检查;测定血液学常规与凝血指标、血清生化、尿液常规等指标;进行骨髓细胞形态学检查、大体剖检检查以及组织病理学检查。采用间接ELISA法检测不同时期动物血清抗药的结合抗体;采用体外生物活性HPLC法检测产生抗药抗体的阳性血清的中和活性。结果 在给药期的第8和10天,原研对照组和高剂量组各有1只雌性动物在给药后5～6 h出现抽搐和流涎等由低血糖所致的异常症状,其中高剂量组的该异常动物于次日死亡;给药期第11天的心电图检查发现高剂量组的T波倒置比例略高于溶媒对照组（5/7 vs 1/8）,停药后恢复正常;其余存活动物的体质量、肛温、进食量、尿常规、血液学、血清生化和组织病理学等均未见毒理学意义的异常改变。免疫原性结果显示,仅有高剂量组1只雄性动物于给药期第12天产生抗药抗体,抗体滴度为1:16,阳性率为14.3%,产生结合抗体的血清样品经检测为非中和活性抗体。结论 在本试验条件下,Beagle犬sc重复给予甘精胰岛素注射液的NOAEL为1.0 IU/kg,该剂量相当于临床拟用剂量的2倍。该药在高剂量下可能对个别Beagle犬具有较弱的免疫原性。     

硇砂提取物治疗小鼠Lewis肺癌的效果初步评价

目的评价硇砂提取物治疗小鼠Lewis肺癌的效果及对免疫系统的毒性.方法采用MTT法及流式细胞仪分别检测Lewis肺癌细胞的增殖和细胞周期,采用小鼠Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型观察硇砂提取物的抗肿瘤作用,通过小鼠碳粒廓清和迟发性变态反应考察硇砂提取物对免疫系统的毒性.结果硇砂提取物可剂量依赖性抑制Lewis肺癌细胞的增殖,使细胞周期停止于S期.硇砂提取物水溶液连续瘤内给药8 d对小鼠Lewis肺癌皮下肿瘤的抑瘤率为46.7%,但同时灌胃给药对肿瘤的抑瘤率仅为15.7%.硇砂提取物水溶液皮下注射或灌胃给药对小鼠碳粒廓清能力及迟发性变态反应均无明显影响.结论硇砂提取物的抗肿瘤作用与给药途径有关,其对机体自身的免疫功能无明显影响.     

国产与进口重组人胰岛素注射液Beagle犬皮下注射的生物等效性研究

目的以美国礼来公司重组人胰岛素注射液（优泌林R,Humulin R）为对照品,评价国产重组人胰岛素注射液（Insulin R）的相对生物利用度和生物等效性。方法采用自身随机交叉给药方案,12只健康Beagle犬分别sc同剂量Insulin R和Humulin R,按设计采集6 h内动态血标本。采用罗氏血糖仪与检测血药浓度同步测定动物血糖水平;放射免疫分析（RIA）法检测血药浓度;试验数据采用DAS 3.0药动学程序拟合计算参数,并进行生物等效性分析。结果 Beagle犬自身交叉sc Insulin R和Humulin R 0.5 U/kg后的血浆最低葡萄糖浓度（Cmin）分别为（1.6±0.4）、（1.6±0.2）mmol/L;达到最低浓度所需时间（tmin）分别为（1.0±0.5）、（1.1±0.6）h。Insulin R和Humulin R的主要药动学参数均值分别为：达峰时间（tmax）为（0.43±0.21）、（0.42±0.09）h;峰浓度（Cmax）为（203.2±63.3）、（193.5±63.1）μU/m L;药时曲线下面积（AUC0-6 h）为（281.2±47.5）、（266.6±62.5）μU/（m L·h）;受试药Insulin R相对于对照药Humulin R的相对生物利用度为（109.4±25.5）%。结论两种重组人胰岛素注射剂在健康Beagle犬体内具有生物等效性。     

砒霜纳米乳治疗小鼠Lewis肺癌的效果初步评价

目的评价砒霜纳米乳治疗小鼠Lewis肺癌的效果及对免疫系统的毒性。方法采用MTT法及流式细胞仪分别检测A549细胞的增殖和凋亡；采用小鼠Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型观察砒霜的抗肿瘤作用，通过小鼠碳粒廓清和迟发性变态反应考察砒霜对免疫系统的毒性。结果砒霜纳米乳可诱导A549细胞的凋亡，流式结果出现DNA亚二倍体凋亡峰；砒霜纳米乳与其水溶液连续灌胃给药8d对小鼠Lewis肺癌皮下肿瘤的抑瘤率分别为42．0％和33.2％，砒霜水溶液对小鼠碳粒廓清能力及迟发性变态反应均有降低作用，但其纳米乳对两者均无明显影响。结论砒霜纳米乳对小鼠Lewis肺癌皮下肿瘤的效果优于其等剂量水溶液，且能降低对机体免疫系统的损害。     

精蛋白重组人胰岛素注射液生物类似药非临床安全性评价

目的 通过小鼠单次给药毒性试验、Beagle犬重复毒性及免疫原性试验和豚鼠全身主动过敏试验,考察精蛋白重组人胰岛素注射液（Insulin NPH）的毒副反应、毒性靶器官或靶组织,为开展临床试验提供依据。方法 ①小鼠单次给药毒性试验：采用最大给药量法分别sc生理盐水、溶媒和Insulin NPH（2092~2488 IU/kg）,监测给药后小鼠一般状态、体质量、脏器异常。②Beagle犬重复毒性试验：sc溶媒、原研对照药（Humulin NPH,1.5 IU/kg）,低、中和高剂量（0.5、1.0和1.5IU/kg）的Insulin NPH,每天1次,连续30 d,停药恢复14 d;在给药期和恢复期内观察动物的一般体征和注射部位的局部刺激性,进行体质量、肛温、血糖及心电图检查,测定血液学、血清生化、尿液常规等指标,并进行脏器质量及组织病理学检查;免疫原性试验采用间接ELISA法检测不同给药期Beagle犬血清中抗药结合抗体。③豚鼠主动全身过敏试验：分别sc低和高剂量（4和12 IU/kg）的Insulin NPH、生理盐水和溶媒,另设卵清白蛋白为阳性对照,使用以上剂量进行5次致敏试验后,iv 3倍致敏剂量进行激发试验,观察豚鼠过敏症状。结果 小鼠sc 165倍临床常用剂量的Insulin NPH后,未见明显毒性反应;Beagle犬重复毒性试验中1.0 IU/kg是Insulin NPH的无毒反应剂量（NOAEL）,该剂量相当于临床拟用剂量的2倍,免疫原性试验各剂量组均未发现抗药结合抗体;豚鼠主动全身过敏试验中未见明显过敏症状。结论 在本试验条件下未观察到Insulin NPH明显毒性反应。     

0期临床试验:新药临床研究的新模式

0期临床试验是一种先于传统的Ⅰ期临床试验开展的研究,旨在评价受试药物的药效动力学和药代动力学特征。0期试验的特点是:小剂量、短周期、少量受试者、不以药物疗效评价为目的。0期试验主要用于作用靶点指标和(或)生物标记物的抗肿瘤候选药物的药效学和药动学评价。一般可将0期临床研究的类型分为3类。开展0期临床研究可参考美国食品与药品监督管理局的"探索性研究药物指南"。0期临床试验的局限性可以通过良好的试验设计加以克服。对于分子靶向的抗癌药物,0期临床研究可提高研究效率和后续研究的成功率。