一种复合型皮肤消毒剂对冠状病毒灭活效果的观察

摘要 目的 观察一种复合皮肤消毒剂对冠状病毒的杀灭效果。方法 采用悬液定量杀灭试验方法,对某复合型皮肤消毒剂灭活冠状病毒的效果进行观察。结果 该复合型皮肤消毒剂主要有效成分为2 000 mg/L复合双链季铵盐和600 mg/L邻苯二甲醛。以该复合皮肤消毒液原液作用30 s,对悬液内冠状病毒GX_P2V(分离于穿山甲)灭活对数值>4.5。 结论 该复合型皮肤消毒剂可快速灭活冠状病毒GX_P2V。     

“T”型单侧多功能外固定器治疗胫腓骨近关节粉碎性骨折

目的：分析手术方法治疗胫腓骨近关节粉碎性骨折,减少并发症,尽早恢复病人生活能力的效果。方法：用“T”型单侧多功能外固定器治疗胫腓骨近关节粉碎性骨折。结果：354例病人用“T”型单侧多功能外固定器治疗,术后随访,优良率高,疗效满意。结论：“T”型单侧多功能外固定器治疗胫腓骨近关节粉碎性骨折符合生物力学要求,固定坚强可靠,手术创伤小,且方法简单。适宜早期患肢功能锻炼,是一种较理想的治疗方法。     

苦瓜胶囊治疗2型糖尿病胰岛素抵抗的临床观察

目的:观察苦瓜胶囊联合西药治疗2型糖尿病胰岛素抵抗的临床疗效。方法:将2型糖尿病患者86例按随机、单盲原则分为治疗组、对照组各43例;治疗组在西药治疗的同时加服苦瓜胶囊,对照组予单纯西药治疗,疗程为14周。观察2组患者糖化血红蛋白(HbA_(1c))、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)、糖负荷后30分钟胰岛素净增值/葡萄糖净增值(△I30/△G30)。结果:1)2组患者治疗后HbA_(1c)、血糖较治疗前均明显改善(P0.05),2组治疗后比较差异有统计学意义(P0.05);2)2组患者治疗后空腹胰岛素、C肽及服糖后30分钟胰岛素、C肽较治疗前均明显改善(P0.05),2组治疗后比较差异有统计学意义(P0.05);3)2组患者治疗后HOMA-IR、HOMA-β、糖负荷后30分钟△I30/△G30较治疗前均明显改善(P0.05),2组治疗后比较差异有统计学意义(P0.05);4)2组患者治疗后总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、脂联素(APN)较治疗前均明显改善,且治疗组在改善TG、APN方面优于对照组(P0.05)。结论:苦瓜胶囊联合西药改善2型糖尿病患者胰岛素抵抗的疗效优于单纯西药。     

化浊颗粒治疗大鼠非酒精性脂肪肝的研究

目的:探讨化浊颗粒对非酒精性脂肪肝病大鼠模型血脂及肝脏病理切片的影响。方法:以高脂饲料喂养8周建立非酒精性脂肪肝病大鼠模型,随机分为5组,以罗格列酮0.36 mg.kg-1 ig作对照,观察化浊颗粒0.675,2.025 g.kg-1课题ig4周对大鼠体重、肝指数、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肝细胞脂肪变性的影响。结果:化浊颗粒组及罗格列酮组与模型组相比TG,TC均降低,且有显著性差异(P<0.05或P<0.01),化浊颗粒高剂量组和罗格列酮组治疗效果相似,明显优于化浊颗粒低剂量组。结论:化浊颗粒可降低非酒精性脂肪肝病大鼠TG,TC,从而改善了非酒精性脂肪肝病大鼠的血脂代谢异常和病理改变。     

杀菌蛋白DNA改组的初步研究

目的：运用DNA家族改组方法提高杀菌蛋白（BPI23）的杀菌活性。方法：首先将人、猴、兔BPI23基因的PCR产物等量混合，用DNAase I消化，回收50bp左右的片段，再经无引物和有引物2步PCR反应获得与原基因大小相同的改组分子，将其与载体连接获得改组文库。应用Flp-In^TM定点整合表达系统，将BPI23改组文库插入CHO细胞基因组中1个单拷贝位点，分别检测各个细胞克隆的杀菌活性，从中筛选高活性的BPI23改组分子。结果：经过2轮改组和筛选，共获得4个活性高于人BPI23约4倍的克隆，它们与人BPI23基因有7－13个氨基酸的变化。结论：探索了CHO系统中进行DNA改组和筛选的方法与技术路线，成功进行了杀菌蛋白的改组，并为其它分子的改组提供了借鉴。     

用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人-鼠嵌合抗体的研究

目的:构建含有FRT序列的CHO/dhfr-工程细胞株,并在此细胞株中用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人鼠嵌合抗体。方法:首先克隆FRT序列与HBsAg的融合基因FRT-HBsAg,然后将FRT-HBsAg亚克隆到pCI neo的MCS中,构建表达载体pCI FRT-HBsAg。以此载体转染CHO/dhfr-细胞,用1g/L的G418筛选抗性克隆。检测抗性克隆HBsAg的表达,筛选表达量高的克隆作为宿主细胞株,命名为CHO/dhfr-FRT+。将表达质粒pA FRTHFLF和pOG44以1∶9的质量比混合,取2μg转染CHO/dhfr-FRT+。转染48h后,换选择培养基(撤掉H、T)用96孔板进行克隆化,2wk后对长成的单克隆进行检测。筛选正确整合到CHO/dhfr-FRT+细胞中FRT位点的克隆,并不断提高MTX的浓度,进一步筛选表达量更高的克隆。在MTX的浓度为2×10-7mol/L时,获得稳定表达细胞株,其最后的表达量为5mg/L。对此细胞株扩大培养后,收集上清并纯化,以纯化的嵌合抗体进行SDS-PAGE及Westernblot和抗原结合活性的检测。结果:构建了高转录活性位点整合FRT序列的CHO/dhfr-细胞株,并在此细胞株中表达抗基孔肯亚病毒人鼠嵌合抗体,表达量为5mg/L。结论:构建了含有FRT序列的CHO/dhfr-工程细胞株,并在此细胞株中用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人鼠嵌合抗体,为用此系统表达抗体分子和其他蛋白分子奠定了基础     

黄金胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

目的:探讨黄金胶囊对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗(IR)的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用给大鼠腹腔一次性注射小剂量链脲佐菌素(STZ),并加饲高热量饮食(富含脂肪和蔗糖),制备T2DM伴IR大鼠模型,观察黄金胶囊对糖尿病大鼠体重、血糖、血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C),血清胰岛素和胰岛素敏感性指数的影响。结果:黄金胶囊能降低T2DM伴IR模型大鼠空腹血糖具体剂量;黄金胶囊能降低病鼠血清TC,TG的水平,并提高HDL-C的水平,黄金胶囊能降低病鼠高胰岛素血症,提高了胰岛素敏感性指数;实验中未发现明显的不良反应。结论:黄金胶囊对T2DM伴IR大鼠有降血糖,调节脂代谢紊乱及改善其IR的作用。     

基于核酶自剪切机制稳定分泌丙型肝炎病毒的细胞模型

Objective To construct a stable HCV-producing cell model for anti-HCV drug research. Methods The HCV-ribozyme recombinant plasmid pJFHl-Rbz was constructed to generate the exact 5' and 3' ends of HCV genomic RNA by placing two self-cleaving ribozymes at both ends of the HCV JFH-1 cDNA. The plasmid was then transfected into HepG2 cells and the resultant clones were screened with G418. Subsequently, immunofluorescence and Western blot were performed to detect the expression of HCV core protein, HCV RNA level was quantitated by TaqMan real-time PCR method and HCV particles was detected by electron microscopy. Results HCV core protein was detected in die screened cell clone, and the level of HCV RNA was up to 1 ×107 in the culture medium. Electron microscopy showed the viral particles in the culture suspension were approximately 55 nm in diameter. IFN-treating experiment demonstrated that the HCV RNA level decreased with the increasing concentration of IFN α. Conclusions We constructed a stable HCV-producing cell model which can be used for anti-HCV drug research.