异基因造血干细胞移植后全血细胞减少的脾切除治疗一例报告并文献复习

慢性粒细胞白血病 (CML)异基因造血干细胞移植后血细胞减少是较常见的并发症 ,其原因主要为移植物抗宿主病(GVHD)、自身免疫性疾病、脾脏因素、移植失败、巨细胞病毒(CMV)感染等 ,以往的研究主要关注移植前脾脏大小对造血恢复及复发的影响 ,而移植后脾切除对造血恢复以及完全嵌合状态 (CDC)形成的影响报道很少 ,我们报告 1例并结合文献进行复习。病例资料　　患者 ,男 ,4 2岁。因左上腹包块 3个月于 2 0 0 1年 12月 7日就诊 ,脾肋缘下 17cm ,血常规WBC 2 13× 10 9 L ,Hb 112g L ,BPC 5 4 3× 10 9 L。分类 :中幼粒细胞 0 .14 ,晚…     

白血病误诊原因分析

白血病误诊原因分析孙耘玉，陈宝安（南京铁道医学院附属医院血液科南京２１０００９）白血病是造血组织的恶性肿瘤，因白血病细胞可广泛浸润至全身各组织器官，故其临床表现复杂多样，当以某一系统症状为突出表现或首发症状时，常易被误诊为该系统疾患，从而延误诊断和治...     

骨髓增生异常综合征进展为急性白血病行自体造血干细胞移植1例

地西他滨对骨髓增生异常综合征有肯定疗效,目前已成为治疗该病的一线用药.但是,如果地西他滨治疗的效果不肯定,下一步治疗的选择至关重要.我院最近对1例地西他滨治疗后进展为急性白血病的患者进行了自体造血干细胞移植,取得良好效果.     

CIK细胞治疗难治复发性非霍奇金淋巴瘤临床观察

 目的 探讨细胞因子活化杀伤细胞（CIK细胞）用于难治复发性非霍奇金淋巴瘤的安全性及疗效。方法 健康供者及淋巴瘤患者的外周血单个核细胞,经过IFN-γ、CD3单抗和rhIL-2共同作用,体外扩增培养CIK细胞,流式细胞仪检测其免疫表型的改变,MTT法检测CIK细胞的杀伤活性。取培养15～21 d的CIK细胞回输,观察临床疗效及不良反应。结果 健康供者及恶性淋巴瘤患者的外周血单个核细胞可以成功培养出CIK细胞。培养第21天,CIK细胞扩增至52.67～64.81倍。培养期内细胞存活率95 %以上。流式细胞仪检测其免疫表型有明显的变化,CD+3 CD+56细胞比例由培养第0天的0.52 %～3.04 %上升至第21天的48.63 %～75.82 %,而CD+3 CD+8细胞则由21.2 %～33.5 %升至82.26 %～92.32 %。MTT法检测CIK细胞对K562细胞有较高的杀瘤活性,当效靶比为5∶1时,在细胞培养的第21天,CIK对K562细胞的杀伤活力为58.1 %～70.9 %。在4例接受CIK细胞治疗患者中,治疗前后临床症状有明显的改善,T细胞亚群测定显示CD4／CD8比值（1.03±0.24～1.26±0.31）及CD+16 CD+56细胞（10.91±6.23～15.68±7.42）与治疗前相比明显升高。治疗过程中及治疗后患者无明显不良反应。结论 CIK细胞可以成为难治复发性非霍奇金淋巴瘤的有效治疗手段之一。     

硼替佐米为主方案治疗复发难治性多发性骨髓瘤

 目的 探讨硼替佐米联合地塞米松等治疗复发难治性多发性骨髓瘤（MM）的疗效及毒副作用。方法 5例复发难治的MM采用硼替佐米1.1 ~ 1.3 mg／m2,联合地塞米松30 mg ~ 40 mg,第1、4、8、11天;沙利度胺100 ~ 200 mg,第1天至第21天,第4天加或不加表柔比星,3周为1个疗程,每位患者治疗1 ~ 4个疗程。根据欧洲血液病和骨髓移植组（EBMT）标准判断疗效、WHO抗癌药毒副作用的分度标准判断不良反应。结果 5例患者均有效,疗效出现在治疗3周后,1个疗程近似完全缓解（CR）2例,轻微有效（MR）2例,另1例3个疗程后达部分缓解（PR）。患者不良反应主要是贫血、白细胞和血小板减少,其减少的程度和治疗前水平相关,其次为腹泻、末梢神经炎和乏力,经对症处理缓解。结论 硼替佐米联合地塞米松等能有效治疗复发难治性MM,耐受性良好。     

羟基喜树碱对人骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞体外作用的研究

目的 观察羟基喜树碱对人骨髓增生异常综合征（MDS）MUTZ-1细胞体外生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，测定羟基喜树碱对人骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞生长的抑制作用，并绘制浓度-抑制率曲线；采用流式细胞技术检测药物诱导的凋亡细胞量；光镜及透射电镜观察羟基喜树碱处理后细胞形态学的变化。结果羟基喜树碱对MUTZ-1细胞生长抑制作用呈现剂量和时间依赖性，其作用不同时间的半数抑制浓度（IC50）分别为91．198、8．983、6．204、2．509、0．364。羟基喜树碱可诱导MUTZ-1细胞凋亡，呈现剂量依赖性。光镜下可见凋亡细胞胞膜完整、胞体固缩、核固缩、核染色质碎裂；透射电镜下可见凋亡细胞核染色质凝聚、边集，部分细胞核膜消失，细胞浆浓缩、密度增加，浆内可见大小不规则的染色质团块。结论羟基喜树碱对MUTZ-1细胞生长有明显的抑制作用，并可诱导MUTZ-1细胞凋亡。     

丙戊酸钠协同阿霉素抑制骨髓增生异常综合征细胞株增殖并诱导其凋亡

本研究探讨丙戊酸钠(SVPA)协同阿霉素(ADM)抑制骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1增殖并诱导其凋亡的作用.采用细胞形态学方法观察小剂量SVPA和ADM处理后细胞形态的政变,应用(MTT)比色法检测SVPA及ADM对细胞生长的抑制作用,流式细胞术分析细胞凋亡.结果表明不同浓度的ADM(0.039μg/ml、0.078μg/ml、0.156 μg/ml、0.317 μg/ml和0.4 μg/ml)与0.25 mmol/L SVPA联合作用于MUTZ-1细胞72小时后,细胞抑制率分别为(23.46±1.12)%、(49.87±0.84)%、(52.37±1.05)%、(78.43±4.34)%和(82.47±1.04)%,明显高于单用ADM时的(5.08±0.79)%、(12.32±2.39)%、(23.65±1.34)%、(43.33±2.38)%和(47.85±1.46)%(P＜0.05).单用0.25 mmol.L SVPA时对细胞生长无影响(P＞0.05).SVPA联合ADM作用细胞株72小时后,细胞呈现典型的凋亡细胞的形态学特征;SVPA和ADM联合作用后细胞的凋亡率比单独使用ADM明显增加,并呈浓度依赖性,与对照组相比有显著的统计学意义,其中以0.078μg/ml浓度ADM为最佳抑制浓度.结论小剂量的SVPA能增敏ADM诱导骨髓增生异常综合征细胞株MUT-Z-1发生凋亡.     

环孢菌素A、雷洛昔芬及其联合应用逆转K562/A02细胞多药耐药的研究

本研究探讨环孢菌素A（CsA）、雌激素受体抑制荆雷洛昔芬及其联合应用对K562／A02细胞多药耐药的逆转作用。采用甲基四唑蓝法（MTT）测定柔红霉素（DNR）的半数抑制量，RT-PCR法检测mdr1基因mRNA表达水平，FCM检测P-gp的表达和细胞内DNR浓度。结果表明：DNR对K562／A02和K562细胞的IC50分别为23．51和0．29mg／L，雷洛昔芬（2．5mg／L）及CsA（1mg／L）单用和两药联合处理K562／A02细胞时，DNR的IC50值分别为5．98、8．15和3．68mg／L，两药对DNR作用K562细胞的IC50没有影响。CsA及雷洛昔芬单独作用后耐药株mdr1mRNA下调微弱，联合用药下调效果明显。CsA及雷洛昔芬均可降低P-gP蛋白的表达，且具有协同作用。同时还观察到逆转剂雷洛昔芬和CsA作用后细胞内柔红霉素浓度增加，两药联合作用时效果增强。结论：CsA及雷洛昔芬均可逆转耐药。且联合作用效果增强。     

诺雷德联合左炔诺孕酮治疗重型再生障碍性贫血月经过多二例

例1,女,25岁.18个月前在外院诊断为"重型再生障碍性贫血",给予抗胸腺细胞球蛋白1个疗程,以及十一酸睾丸酮、环孢素(CsA)(3-5 mg·kg-1·d-1)和G-CSF治疗3个月,疗效欠佳.HLA配型未找到合适供者,间断口服CsA及十一酸睾丸酮.血常规检查:Hb(20-50)g/L,WBC<1.0×109/L,BPC(1～30)×109/L.患者经期延长,出血量大,先后给予止血敏、止血芳酸、丙酸睾丸酮、敏定偶治疗无效,予达英-35治疗后阴道出血停止.为进一步治疗收住我院.查体:重度贫血貌,口腔黏膜可见数枚血疱,下肢皮肤有散在出血点,心、肺听诊未见异常.肝、脾肋缘下未及.     

Effect of hypoxia inducible factor1-α inhibitor on reversal of multidrug resistance of K562/A02 cell line

Objective To study the reversal effect of the hypoxia inducible factor( HIF)-1α inhibitor,YC-1 ,on muitidrug resistance of K562/A02 cells and its mechanism. Methods Pre- and post- incubation with adriamycin (ADM) alone or in combination with YC-1 for 48 h, the proliferation capacity of K562/A02 and K562 cells were evaluated by MTT assay. The apoptosis rate of K562/A02 cells after treated with 0,5,10 and 20 μmol/L YC-1 alone or in combination with 1 mg/L ADM and intracellular ADM concentration were analyzed by flow cytometry(FCM). The mRNA levels of HIF-1α and mdr1 genes were determined by semi-quantitative RT-PCR. The protein levels of HIF-1α and P-glycoprotein (P-gp) were detected by Western blot. Results The IC50 of ADM for K562 and K562/A02 cells were ( 1.56 ± 0.07 ) mg/L and (42.98 ±3.15) mg/L respectively. The resistance of K562/A02 cells to ADM was 27.55- fold higher of that of K562cells. After treatment with YC-1 (5μmol/L, 10μmol/L, 20 μmol/L) for 48h, the resistances of K562/A02cells to ADM were 24.63-, 16.38- and 10.71- fold increase respectively. After treatment of K562/A02 cell with YC-1(0 μmol/L, 5 μmol/L, 10 μmol/L, 20 μmoL/L) alone or in combination with 1 mg/L ADM for 48 h, the apoptotic rates were ( 1.9 ± 0. 9) %, (4.9 ± 0. 9 ) %, ( 5.8 ± 1.1 ) %, and ( 9.3 ± 1.4 ) % and(2.3 ± 0.7 ) %, (8.2 ± 1.2) %, ( 19.0 ± 1.7 ) %, and ( 34.5 ± 2.4 ) % respectively. The intracellular flucorescence intensity of ADM were 232 ±33, 1300 ±219, 1961 ±240 and 3342 ±269 in the combined treatment group. With the increase in YC-1 concentration, the levels of mdr1 mRNA reduced, while that ofHIF-1α mRNA had no obvious change.Furthermore.the expressions of HIF-1α and P-gp were also decreased in K562/A02 cells.Conclusion YC-1,as a HIF-1 inhibitor,cau reverse multidrug resistance of K562/A02cells through down-regulating HIF-1α and p-gp.