亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态与多发性骨髓瘤易感性的关系

国外研究发现亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T多态改变与多发性骨髓瘤（MM）易感相关。由于基因多态与疾病易感的相关性有人种、地域的差异，我们对中国人群进行了相关研究。     

汉防己甲素、托瑞米芬及其联合应用逆转K562/A02细胞多药耐药的研究

本研究探讨汉防己甲素（Tet）、雌激素受体抑制剂托瑞米芬（Tor）及其联合应用对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用。采用噻唑蓝法（MTT）测定阿霉素（ADR）的半数抑制量,RT-PCR法检测MDR1基因mRNA表达水平,FCM检测P-gp的表达和细胞内ADR浓度。结果表明：ADR对K562/A02和K562细胞的IC50分别为57.43和1.16mg/L,Tet（1μmol/L）和Tor（2.5μmol/L）单用及两药联用处理K562/A02细胞时,ADR的IC50值分别为14.12,20.74和9.14mg/L。Tet及Tor单独作用后耐药株MDR1 mRNA下调微弱,联合用药下调效果明显。Tet及Tor均可降低P-gp蛋白的表达,且具有协同作用。Tet及Tor作用后细胞内ADR浓度增加,两药联合作用时效果增强。结论：Tet及Tor均可逆转K562/A02细胞多药耐药,联合作用时效果增强。     

CIK细胞在恶性血液系统疾病中的应用研究

细胞因子诱导的杀伤 (Cytokine inducedkiller ,CIK)细胞是一种非主要组织相溶性复合体 (MHC)限制的免疫效应细胞 ,同时表达CD3和CD5 6。CIK细胞可以由人外周血的单个核细胞在体外经与多种细胞因子和CD3单克隆抗体共同培养获得 ,其增殖能力强、杀瘤活性高、副作用小 ,是目前恶性血液病细胞免疫治疗中最具前景的细胞之一。     

累及心脏的B淋巴母细胞淋巴瘤白血病1例报道

累及心脏的恶性肿瘤甚为少见。近来我院收治1例累及心脏伴大量胸腔、心包腔积液的B淋巴母细胞淋巴瘤白血病,现报道如下。男患,29岁,因浅表淋巴结肿大伴胸闷,气喘2周于1991年8月31日住院。入院前曾在上海某医院诊治,作左锁骨上淋巴结穿刺活检,诊为B淋巴母细胞性淋巴瘤,未予化疗转入我院。入院查体:T36。4℃、P120次/分,全     

非清髓性外周血干细胞移植治疗慢性粒细胞性白血病慢性期及加速期的疗效观察

目的:观察非清髓造血干细胞移植对慢性粒细胞白血病慢性期(CMLCP)、加速期(CMLAP)的疗效。方法:用福达华30mg/m2×6d,白消安4mg/kg×2d,环磷酰胺600mg/d×2d,部分患者加阿糖胞苷0.5g,q12h×4次,对12例人类白细胞抗原(HLA)全相合者进行预处理,并对其造血恢复等指标动态观察。结果:12例患者造血顺利恢复,中性粒细胞(ANC)>0.5×109/L平均为13d,血小板计数(PLT)>20×109/L平均为11.5d。+30d时经短串重复系列(STRPCR)检测12例植活患者中9例为完全嵌合状态(CDC),3例为混合嵌合体。+90d时又有1例患者转为CDC。中位随访8(2～20)个月,11例患者无病生存,1例患者死于严重移植性抗宿主疾病。结论:非清髓造血干细胞移植是CMLCP、CMLAP的有效治疗手段,对于年龄较大患者亦有良好耐受性。     

用原子力显微镜表征K562/A02细胞Mdr1基因DNA的实验研究

目的:运用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)表征K562/A02细胞多药耐药基因Mdr1启动子区域的DNA。材料与方法:PCR扩增K562/A02细胞Mdr1基因启动子区域769bp的DNA,产物纯化后,分别按终浓度为5ng/μl、10ng/μl、20ng/μl固定在用1ng/μlL型多聚赖氨酸预先处理过的新剥离的云母片制备成观测样本。原子力显微镜观测样本,获取扫描图像后追踪DNA分子轮廓,进行模数分析。结果:用原子力显微镜能够成功地表征K562/A02mdr1基因启动子区域769bp的DNA片段,获得清晰的二维及三维图像。我们推测原子力显微镜观测该长度的DNA样本的最佳浓度为10ng/ul左右,在此浓度下对其三维图像进行图像处理后分析的DNA分子轮廓结果如下:DNA分子链的长度为(260.13±2.29)nm(n=50),平均宽度为(11.88±0.92)nm,双链的平均高度为1.2nm。结论:原子力显微镜能够成功地表征K562/A02细胞Mdr1基因启动子区域的DNA,获得清晰的二维及三维图象,并且能够直观地分析DNA轮廓,为进一步在分子层面上探讨研究Mdr1基因遗传信息提供了一种新的简单、直观、可靠的方法。     

丙戊酸钠诱导骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1凋亡的实验研究

为了探讨丙戊酸钠（sodium valproate,VPA）对骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1的生长抑制及诱导凋亡作用,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测VPA对细胞生长的抑制作用;采用光学显微镜和电子显微镜观察VPA作用后细胞形态的变化;应用流式细胞术（FCM）检测不同浓度VPA作用后细胞凋亡的比例和细胞周期分布的变化。结果显示：VPA对MUTZ-1细胞的生长抑制作用呈现时间和剂量依赖性;经4mmol/LVPA处理MUTZ-1细胞72小时后,细胞呈现典型的凋亡形态特征,光学显微镜下可见凋亡细胞胞体固缩、核固缩、核碎裂及凋亡小体;透射电子显微镜下可见凋亡细胞核染色质边集、胞浆浓缩、密度增加,胞浆内大小不规则的染色质团块;流式细胞术结果表明,细胞凋亡率随着VPA浓度的增加而逐步增高,G0/G1期细胞比例随着VPA浓度的增加而逐渐增多,S期细胞比例逐渐减低,细胞被阻滞在G0/G1期。结论：VPA通过G0/G1期阻滞诱导MUTZ-1细胞凋亡,从而抑制MUTZ-1细胞增殖。     

Effect of hypoxia inducible factor1-α inhibitor on reversal of multidrug resistance of K562/A02 cell line

Objective To study the reversal effect of the hypoxia inducible factor( HIF)-1α inhibitor,YC-1 ,on muitidrug resistance of K562/A02 cells and its mechanism. Methods Pre- and post- incubation with adriamycin (ADM) alone or in combination with YC-1 for 48 h, the proliferation capacity of K562/A02 and K562 cells were evaluated by MTT assay. The apoptosis rate of K562/A02 cells after treated with 0,5,10 and 20 μmol/L YC-1 alone or in combination with 1 mg/L ADM and intracellular ADM concentration were analyzed by flow cytometry(FCM). The mRNA levels of HIF-1α and mdr1 genes were determined by semi-quantitative RT-PCR. The protein levels of HIF-1α and P-glycoprotein (P-gp) were detected by Western blot. Results The IC50 of ADM for K562 and K562/A02 cells were ( 1.56 ± 0.07 ) mg/L and (42.98 ±3.15) mg/L respectively. The resistance of K562/A02 cells to ADM was 27.55- fold higher of that of K562cells. After treatment with YC-1 (5μmol/L, 10μmol/L, 20 μmol/L) for 48h, the resistances of K562/A02cells to ADM were 24.63-, 16.38- and 10.71- fold increase respectively. After treatment of K562/A02 cell with YC-1(0 μmol/L, 5 μmol/L, 10 μmol/L, 20 μmoL/L) alone or in combination with 1 mg/L ADM for 48 h, the apoptotic rates were ( 1.9 ± 0. 9) %, (4.9 ± 0. 9 ) %, ( 5.8 ± 1.1 ) %, and ( 9.3 ± 1.4 ) % and(2.3 ± 0.7 ) %, (8.2 ± 1.2) %, ( 19.0 ± 1.7 ) %, and ( 34.5 ± 2.4 ) % respectively. The intracellular flucorescence intensity of ADM were 232 ±33, 1300 ±219, 1961 ±240 and 3342 ±269 in the combined treatment group. With the increase in YC-1 concentration, the levels of mdr1 mRNA reduced, while that ofHIF-1α mRNA had no obvious change.Furthermore.the expressions of HIF-1α and P-gp were also decreased in K562/A02 cells.Conclusion YC-1,as a HIF-1 inhibitor,cau reverse multidrug resistance of K562/A02cells through down-regulating HIF-1α and p-gp.     

葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂PDMP对K562/A02细胞柔红霉素耐药逆转的研究

本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)hydrochloride对K562/A02细胞株柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的逆转作用及其逆转机制。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度PDMP对K562细胞和K562/A02细胞的增殖抑制效应及其对K562/A02细胞DNR耐药逆转作用;用流式细胞术检测PDMP对K562/A02细胞内DNR浓度及细胞凋亡率的影响;半定量RT-PCR和Western blot方法检测K562及K562/A02细胞mdr1、GCS基因的表达以及PDMP对K562/A02细胞两种基因表达的影响。结果表明:DNR对K562和K562/A02细胞的IC50分别为0.23±0.02和7.15±0.24μg/ml,当PDMP≤20μmol/L时,对K562及K562/A02细胞株无明显生长抑制作用;20μmol/L和10μmol/L PDMP均能增加K562/A02细胞对DNR的敏感性,其耐药逆转倍数分别为2.59和1.69;两种浓度PDMP作用于耐药株48小时后能增加细胞内DNR浓度(p0.05)和细胞凋亡率(p0.01)。20μmol/L PDMP处理K562/A02细胞48小时后可在mRNA和蛋白水平下调GCS和mdr1基因的表达(p0.01)。结论:PDMP可以增强K562/A02细胞对DNR的敏感性,其机制可能与增加细胞内药物浓度及细胞凋亡率、下调GCS和mdr1基因表达有关。     

危重症患者医疗风险管理体系的探索△

目的：建立早期危重症患者医疗风险管理体系,规范危重症患者的救治,提高医疗质量。方法：在院区医疗质量与安全管理小组领导下,由职能科室联合相关医疗、医技科室对危重症患者实施早期的多学科诊疗,发现诊疗缺陷,规范诊治流程,提高救治水平。结果：实施后,院区Ⅰ、Ⅱ级不良事件发生例数、非计划重返手术发生率和重大手术并发症发生率明显下降,差异有统计学意义;各临床科室建立的专科抢救流程图、评分表数量以及医务人员知晓率逐年上升;抗菌药物及辅助用药使用日趋合理。结论：建立早期危重症患者医疗风险管理体系,构建由决策层、控制层和执行层组成的三级医疗质控网络,能更好地提高医院的医疗质量管理水平,保障危重症患者的安全。