核糖体失活蛋自在生物医学方面的应用研究进展

核糖体失活蛋白（ribosome inactivating proteins，RIPs）是一类具有N端糖苷酶活性的蛋白，可以断开核糖体RNA的特定位点从而抑制蛋白质的合成。RIPs在植物界中的分布较为广泛，并且在真菌和细菌中也都有发现。研究显示RIPs具有多种生物学活性，如抗菌、抗寄生虫、抗肿瘤和抗病毒等，这也使人们对如何开发利用RIPs资源产生了极大的兴趣。     

不同剂量吡唑啉酮希夫碱衍生物铜配合物对小鼠的急性毒性实验

目的: 研究吡唑啉酮希夫碱衍生物铜配合物[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)]对小鼠腹腔注射后急性毒性反应,评估其安全性。方法: 采取腹腔注射法给小鼠一次性给药,观察15 d内12.5,25,50,200,400,800 mg·kg^-1共6个剂量组小鼠的生长发育、行为变化、血液学变化。计算[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)]腹腔注射半数致死率(LD₅₀)及95%的可信区间。结果: 高剂量组中毒小鼠均出现不同程度的呼吸心跳加快、抽搐等症状。经腹腔注射[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)] LD₅₀为:33 mg·kg^-1,95%的可信限为:25.5~43 mg·kg^-1。25 mg·kg^-1剂量组与阳性药物(顺铂,DDP,12.5 mg·kg^-1)组相比具有相似的毒性作用。结论: 低浓度的[Cu(PMPP-SAL)(EtOH)]毒性较小,具有较好的安全性。     

新疆地区虫媒病毒调查研究状况

近年来新疆陆续发现的一些新的虫媒病毒与虫媒病毒病对当地人畜健康造成一定危害.新疆地理生态环境的复杂多样性为多种虫媒病毒的传播提供了有利条件,虫媒病毒在新疆分布广泛,存在地域差异性.随着分子流行病学的发展,基于核酸分子和细胞培养检测技术方法从新疆的多种昆虫媒介和宿主动物中鉴定并分离得到分属于黄病毒科,披膜病毒科,呼肠孤病毒科和布尼亚病毒科的多种病毒,部分病毒属在新疆系首次发现.本文对新疆多个地区近年来已报道的虫媒病毒在宿主中的检测和感染人畜引起的疾病的情况进行了汇总整理,有利于对新疆各地虫媒病毒的流行病学进行深入的调查与研究.     

新疆地区克里米亚刚果出血热病毒M片段的遗传分析

目的 为进一步了解克里米亚刚果出血热病毒（CCHFV）M基因的特征，对新疆地区4侏克里米亚刚果出血热病毒分离株亚东璃眼蜱的部分M片段核苷酸序列进行测定及分析。方法 从感染CCHF病毒的鼠脑中提取RNA，应用逆转录聚合酶链反应扩增，测定CCHF病毒的部分M片段核苷酸序列，与GenBank中的已登录的部分CCHF病毒M基因的同源序列进行比较分析和种系进化分析。结果 经测序得到了4株病毒的3962～4385nt位点的424bp核苷酸序列（位点依据IbAr10200的M基因序列），该序列共编码139个氨基酸。前3株病毒序列有相当高的核苷酸同源性（99．5％～99．8％），将所得到的序列与已发表的中国、尼日利亚、巴基斯坦、乌兹别克斯坦、塔吉克斯坦和俄罗斯病毒株相比，中国株之间的核苷酸同源性为78．1％～99．8％，而非中国株则为42．9％～94．8％。但它们所编码的氨基酸序列变异不大，同源性非常高。系统发生树表明，所有的毒株被分为5个进化支（所比较的M基因长度为3962～4385nt核苷酸），来自新疆南部和东部的YT05099、YL04041和YL05035共处于同一分支。结论 相比于新疆其他分离株，YT05099、YL04041和YL05035的部分M基因特征有极高的相似性。新疆株CCHF病毒M基因与中东和远东病毒株之间有较近的亲缘关系。     

古尔图病毒重组截短糖蛋白基因的表达及抗体的制备

目的:原核表达古尔图病毒(Guertu virus,GTV)糖蛋白截短片段(Gn、Gn1、Gn2、Gn3、Gc1和Gc2),分别纯化Gn-His、Gc1-His和Gc2-His重组蛋白并制备其多克隆抗体。方法:采用RT-PCR的方法分别扩增得到GTV DXM毒株截短糖蛋白Gn、Gn1、Gn2、Gn3、Gc1和Gc2基因片段,并将其构建到原核表达载体pET-32a(+)中,继而转化到E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白质大小。经镍柱亲和层析纯化Gn-His、Gc1-His和Gc2-His重组蛋白,用GTV阳性羊血清通过Western blot法检测重组蛋白的抗原性。用纯化的蛋白质分别免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA法检测血清效价。将构建的真核表达载体pcDNA3.1-Gn和pcDNA3.1-Gc1/Gc2转染至哺乳动物Vero细胞,并用间接免疫荧光法评估前述制备的兔多克隆抗体的结合活性。最后用Western blot法检测血清与重组蛋白的特异性反应能力。结果:双酶切鉴定和测序结果表明pET-32a-Gn、pET-32a-Gn1/Gn2/Gn3、pET-32a-Gc1/Gc2、pcDNA3.1-Gn和pcDNA3.1-Gc1/Gc2重组表达载体构建正确,重组表达蛋白Gn-His、Gn1/Gn2/Gn3-His、Gc1/Gc2-His相对分子质量(Mr)大小分别约为63.4×103、37.1×103、31.9×103、30.8×103、40×103和54.4×103。重组表达蛋白能够被GTV阳性羊血清所识别;获得的抗GTV Gn、Gc1和Gc2兔多克隆抗体效价分别为1∶409600、1∶204800和1∶6400。间接免疫荧光检测和Western blot结果表明制备的多克隆抗体能够与真核表达产物或重组蛋白发生特异性反应。结论:重组GTV糖蛋白Gn-His、Gc1-His和Gc2-His得到了高效表达和纯化,具有较好的免疫性。制备的多克隆抗体效价高,特异性好。本研究结果为进一步开展GTV糖蛋白生物学功能及其检测方法和疫苗研究提供参考资料。