抗肝癌单链抗体(鼠及人源化)融合突变型TNF-α的构建、表达及其作用研究

我室从HAb25抗肝癌单克隆抗体中制备并高效表达了抗肝癌鼠及人源化单链抗体m/hscFv25(人源化工作由军事医学科学院袁清安等完成),与人天然型TNF-α连接后取得了一定的治疗效果.但由于天然型TNF-α的毒副作用很大,我们尝试用高活性、低毒性的突变型TNF-α(mTNF-α)将之替代,构建新型、高效、低毒的抗肝癌抗体原核表达载体pGEX4T-1/scFv25-mTNF-α,通过诱导表达、纯化后,对SMMC-7721肝癌细胞及荷肝癌裸鼠进行导向治疗研究.     

罕见重症鼻出血的诊治体会

鼻出血是耳鼻咽喉科最常见症状之一。临床常以鼻出血的量、出血的速度和治疗的难易判别鼻出血的程度。临床大多数鼻出血患者经过局部处理（纱球、止血药物、海绵、气水囊填塞等）和全身辅助治疗（止血、降压、抗炎、病因治疗）,多能收到较好疗效,上述方法无效时,遂根据出血部位的供血来源采用上颌动脉、筛动脉、颈外动脉血管结扎术,电凝、微波、冷冻、YAG激光和鼻内镜下低温等离子射频等治疗。我科近3年来共收治了80余例鼻出血患者,其中3例重症鼻出血患者病情十分复杂,处理十分棘手,对诊治鼻出血患者有借鉴价值,现介绍如下。     

人CD20跨膜区与g3pN端融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的 :构建g3pN1 hCD2 0跨膜及胞外区基因表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法 :利用反转录PCR和PCR方法 ,分别从Daudi细胞和M13K0 7噬菌体中扩增hCD2 0基因和编码g3pN1蛋白N1端的基因 ,并重组到pTIG Trx表达载体中 ,在大肠杆菌中融合表达。结果 :表达产物可被抗CD2 0分子的单克隆抗体 (mAb)识别。结论 :成功地表达并鉴定了目的蛋白。     

氯化镉抗肿瘤作用的体内实验研究

[目的]研究氯化镉(CcCl2)抗肿瘤作用及对体内正常组织影响. [方法]体内建立人肝癌裸小鼠移植瘤模型,阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予5-Fu 25 mg/kg,实验组分别给予CdCl2 0.5、1.0、2.0mg/kg,锌保护组预先给Zn2 10 mg/kg,24 h后给予CdCl2 2.0 mg/kg.观察CdCl2抑瘤效应及对正常组织影响. [结果]CdCl2在体内可显著抑制SMMC-7721增长,同时可引起外周血白细胞数减少,肝指数降低. [结论]CdCl2具有显著抑瘤效应,锌作为保护剂可能通过诱导金属硫蛋白表达拮抗镉部分毒副作用.     

镉诱导HL-7702细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3的表达

镉是一种有毒的重金属元素，易在体内蓄积，镉对机体毒性效应十分复杂。肝脏是镉损伤的主要靶器官之一，目前对镉致肝细胞损伤机制尚不十分清楚。镉可诱导多种细胞发生凋亡，如大鼠肝细胞、人肝癌细胞株和原代培养的鼠肺上皮细胞等。我们就镉诱导人正常肝细胞系HL-7702细胞凋亡作用进行研究，并对其凋亡机制进行了初步探讨。     

五味消毒饮治疗腰间盘突出术后椎间隙感染

腰间盘突出症术后合并椎间隙感染，临床虽然少见，但临床症状较重，严重影响术后的生活质量。我科自2000年至2006年共收治30例椎间隙感染病人，应用中药五味消毒饮治疗，取得良好的疗效。现报告如下。     

建构主义理论指导下现代教育技术与医学课程的整合

医学课程体系的改革是提高医学生培养质量的关键，现代教育技术与医学课程的整合是改革的重要内容，建构主义为这种整合提供了理论指导。文章首先分析了目前医学课程体系改革所面临的问题，然后说明了现代教育技术与医学课程整合的意义，最后着重阐述了建构主义理论对现代教育技术与医学课程整合的指导。     

二硫键稳定的抗肝癌人源化单链抗体—突变体人TNFα融合基因在CHO（dhfr^—）细胞中的表达

目的：提高抗肝癌靶向人肿瘤坏死因子（hScFv25-hTNFα)的稳定性和杀伤活性,构建二硫键稳定的抗肝癌人源化单链抗体－突变体人TNFα融合基因（ds-ScFv-hTNFα）,并在CHO细胞中表达。方法：常规构建ds-ScFv-hTNFα融合基因,并克隆入真核表达载体pCI(dhfrl）,磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠卵巢细胞株（CHO－dhfr^-）,甲氨蝶呤（MTX）高压筛选高表达细胞株,免疫荧光染色和MTT法检测重组蛋白的抗体和突变体hTNFα的双重活性。结果：目的基因在CHO（dhfr^－）中获得了表达,表达产物具有抗体和突变体hTNFα的双重活性,且稳定性得到大幅度提高,达到4℃放置4个月活性无明显下降。结论：抗肝癌人源化ds-ScFv-hTNFα融合基因在CHO细胞中获得功能性表达,为进一步的临床应用研究奠定了基础。     

复方磷酸萘酚喹及其组分单药治疗恶性疟的临床研究

为了对比观察复方萘酚喹(Co NQ)与组分单药磷酸萘酚喹(NQ)和青蒿素(QHS)对恶性疟的疗效和安全性,本研究用Co -NQ (总量含NQ 4 0 0mg及QHS10 0mg)、NQ (总量10 0 0mg)和QHS (总量2 5 0 0mg)分别治疗恶性疟患者30例。所有患者住院7天,随访2 8天,观察疗效和安全性。结果显示Co NQ、NQ和QHS 3组的平均退热时间分别为2 0 1±11 .8h、2 4 . 4±16. 1h和18 .0±9. 3h ;平均原虫转阴时间分别为30 . 1±5 . 7h、4 4 7±9 .2h和2 8 .9±5 . 6h ;2 8天治愈率分别为10 0 %、10 0 %和6 3 .3%。提示复方萘酚喹治疗恶性疟具有良好的临床效果。     

甲基汞对发光菌的毒性及锌的拮抗作用

目的：研究甲基汞（MeHg）对明亮发光杆菌的毒性作用及锌（Zn）对MeHg毒性的拮抗作用。 方法：采用发光菌毒性试验法检测MeHg、Zn对发光杆菌的相对发光率的影响。结果：MeHg、Zn单独作用时半数致死浓度（EC₅₀）分别为为0.00248和0.28 mg•L^-1。随着MeHg剂量加大,发光菌相对发光率均降低,并呈剂量依赖性。MeHg、Zn联合作用15和30 min后,呈拮抗作用。 结论：Zn可以抑制MeHg对发光杆菌发光率的影响,拮抗甲基汞的毒性。