不同阶段 HBV 相关 ACLF 患者外周血 DC 及T 淋巴细胞免疫功能特点研究

目的：比较不同阶段的 HBV 相关慢加急性（亚急性）肝衰竭（HBV-ACLF）患者外周血树突状细胞（DC）、T淋巴细胞（TC）相关细胞免疫功能,阐述 DC-TC 轴在 HBV-ACLF 发病过程中可能的细胞免疫学机制。方法HBV-ACLF患者30例,分为早期组15例与中晚期组15例,另设健康对照组8例,以外周血来源的 PBMC 体外分离诱导培养 DC 与TC,应用流式细胞计数检测 DC 细胞表型 HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CD1α的表达率,及 TC 表面分子 CD3＋、CD4＋ T、CD8＋ T 淋巴细胞百分比,并检测 DC 上清液中 IFN-α、IL-4的分泌水平,比较不同阶段 HBV-ACLF 患者免疫细胞及炎性因子表达的差异。结果与健康人比较,HBV-CLF 患者 DC 表型 HLA-DR、CD1α、CD83、CD80、CD86表达率显著下降（t 值分别为5．3356、13．269、10．8742、13．3685和23．021,均 P ＜0．01）,DC 分泌因子 IFN-α显著升高（t 值为16．4569,P ＜0．01）;TC 表面分子 CD3＋、CD4＋ T、CD4＋／CD8＋细胞比值显著下降（t 值分别为7．4441、12．5557、11．0771,均 P ＜0．01）, CD8＋ T 细胞百分比显著上升（t＝4．4359,P ＜0．01）;HBV-ACLF 患者中晚期组 DC 表型 CD83、CD86表达率显著低于早期组（P 值分别为：0．0000,0．0057）,DC 分泌因子 IFN-α表达在早期组显著增多（P ＝0．0000）,IL-4表达在中晚期组显著增多（P ＝0．0000）,TC 表面分子中晚期组 CD4＋ T 细胞百分比、CD4＋／ CD8＋细 胞 比 值 显 著 下 降 （P 值分别为：0．0268、0．0002）,CD8＋ T 细胞百分比显著上升（P ＝0．0001）。结论不同阶段 HBV-ACLF 患者的 DC、TC 功能状态均表现为细胞免疫功能低下,中晚期患者的细胞免疫功能更为低下;HBV-ACLF 全病程存在促／抑炎性细胞因子功能紊乱,早期患者存在炎症因子过度释放,中晚期患者存在抗炎症细胞因子表达增强。     

参仙乙肝灵联合替比夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎随机平行对照研究

[目的]观察参仙乙肝灵联合替比夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例门诊HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随机分两组。单用组30例替比夫定600mg口服,1次/d。联合组30例参仙乙肝灵片8粒/次,3次/d;替比夫定600mg口服,1次/d。均连续给药52周。治疗12周、24周、52周检测HBV DNA、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、中医症候改善、肝功能指标变化及药物不良反应,随访1年,判定疗效。[结果]HBV-DNA阴转率及HBeAg/HBeAb血清转换率12周两组均无明显差异(P>0.05);24周、52周联合组均优于单用组(P<0.05);中医症候疗效联合组优于单用组(P<0.05);治疗12周、24周、52周两组肝功能均有明显改善(P<0.05),组间无显著差异(P>0.05);两组均未发现明显副作用。[结论]参仙乙肝灵联合替比夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎优于单用替比夫定,可提高治疗慢性乙型肝炎的疗效。     

温法干预对HBV相关慢加急性肝衰竭阳黄证患者外周血树突细胞功能的影响

目的:研究温法干预对HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)阳黄证患者外周血树突状细胞(DC)功能的影响。方法:分别选取8例HBV-ACLF阳黄证患者作为阳黄组和8名健康对照者,收集两组人员外周抗凝血,体外诱导培养成成熟的DCs。将两组人员的DCs细胞分为5组：正常组、模型组、温法干预组、去温法干预组和空白组。并用大鼠温阳解毒化瘀方(温法)及温阳解毒化瘀方减附子、白术方(去温法)含药血清干预模型组(HBV-ACLF阳黄证患者)DCs。流式细胞仪分析DCs表面CD80、CD86、CD83、HLA-DR表达及平均荧光强度;ELISA法检测DCs分泌细胞因子IL-12、IL-6、IL-10水平;混合淋巴细胞反应(MLR)检测DCs对T淋巴细胞增殖的影响。结果:与正常组DCs比较,模型组DCs表面CD80、CD86、CD83、HLA-DR表达及平均荧光强度明显降低,DCs分泌细胞因子IL-12、IL-10显著减少,IL-6增多,促T淋巴细胞增殖功能下降(P<0.01);与模型组比较,温法干预组DCs表面CD80、CD86、CD83、HLA-DR表达及平均荧光强度显著升高,DCs分泌细...     

基于网络药理学和分子对接技术探析鳖龙软肝汤治疗肝癌的机制

目的运用网络药理学与分子对接技术探析鳖龙软肝汤治疗肝癌的关键靶点及作用机制。方法采用TCMSP、PubChem数据库、PharmMapper等数据库, 检索并筛选鳖龙软肝汤化学成分及其相关靶点、肝癌疾病的靶点, 构建鳖龙软肝汤-中药-活性成分-预测靶点-疾病网络图;采用String数据库做蛋白质相互作用(PPI)网络分析;采用WebGestalt数据库进行基因本体(GO)富集分析;采用KOBAS数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;利用PyMOL和Auto DockVina等软件对鳖龙软肝汤活性成分和核心靶蛋白进行分子对接。结果鳖龙软肝汤有效成分67个, 调控肝癌靶点154个和通路244条。网络药理学分析鳖龙软肝汤可能通过表皮生长因子受体(EGFR)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、雌激素受体1(ESR1)、MAPK8、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、MAPK14、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、醛糖还原酶(AKR1B1)等关键靶点发挥抗癌作用;KEGG富集分析显示, 鳖龙软肝汤治疗肝癌涉...     

肝硬化中西医结合诊疗指南

肝硬化是各种慢性肝病进展至以肝脏慢性炎症、弥漫性纤维化、假小叶形成及门-体侧支循环形成等为特征的终末病理阶段,属于中医学“黄疸”“胁痛”“鼓胀”等的范畴。目前尚缺乏特效的临床治疗手段,中西医结合治疗可以有效延缓肝硬化的病情进展。本指南工作组在遵循循证医学原则的基础上,结合近年的临床实践总结,参考国内外最新发表的相关指南与专家共识,客观评价肝硬化中西医结合诊治证据,广泛征求中医学、临床医学、临床流行病学等多学科专家的意见,最终形成本指南,旨在为中西医结合诊治肝硬化的临床实践提供参考。     

急肝方对急性肝炎辨证分型疗效比较

总结了急肝方治疗急性病毒性肝炎154例，分热重和湿重两组进行比较，结果两组有效率无明显差异，分别为98．65％和97．5％（P＞0．05），但临床治愈率，热重组明显高于湿重组，分别为86．49％和73．75％（P＜0．05），说明热重组疗效较好，这是因为热为阳邪，侵犯在表较易清除，故治愈率较高，而湿为阴邪入里，羁留难除，故治愈率较低。     

中药治疗肝衰竭机制的研究进展

肝衰竭是各类肝脏疾病进展的终末结局,致死率高。近年来研究发现,中药可通过抑制Fas/FasL结合、抑制NF-κB和Caspase途径、抗氧化应激来抑制肝细胞凋亡,通过调节Th17/Treg平衡、CTL/Treg平衡和下调HMGB1表达来增强机体免疫功能,以及通过清除LPS、减少细胞因子释放、改善肠道菌群和内毒素血症等方式拮抗肝衰竭,提升患者的生存率。本文对中药抑制肝衰竭的多机制和多层面进行综述,为肝衰竭的治疗提供新思路。     

补肾解毒方中马钱苷和黄芩苷含量的高效液相色谱测定

目的 建立测定补肾解毒方中马钱苷和黄芩苷的含量的方法.方法 采用HPLC,色谱柱为Kromasil ODS-1 C18柱(100mm×4.6 mm,5μm).①黄芩苷:流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液(42∶58),检测波长280 nm;流速1.0ml/min;选样量5.0μl;②马钱苷:流动相为水-乙腈(85∶15),检测波长236 nm,柱温为40℃,流速1.0 ml/min,进样量10μl.结果 补肾解毒方中黄芩苷在0.005 ～2.2 μg浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为98.18％;马钱苷在0.999 6～ 199.92 μg浓度范围内线性关系良好(r=1.0),平均回收率为99.72％.结论 该方法简便、准确、分离效果好,可用于补肾解毒方的质量评价.     

恩替卡韦联合参仙乙肝灵治疗e抗原阳性慢性乙型肝炎患者48周的疗效观察

目的比较恩替卡韦(entecavir,ETV)联合参仙乙肝灵和单纯ETV治疗乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B virus e antigen,HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B patients,CHB)患者48周的疗效和安全性。方法 164例患者按队列研究方法分为ETV联合参仙乙肝灵治疗组及单纯ETV治疗的对照组。观察治疗前后患者ALT复常率、HBV DNA低于检测值下限率、HBeAg阴转率和HBeAg血清转换率。结果治疗48周时,ETV联合参仙乙肝灵组和ETV组ALT复常率分别为67.61%和70.00%(P>0.05),HBV DNA低于检测值下限患者比例分别为73.24%和72.50%(P>0.05);HBeAg阴转率分别为39.44%和23.75%(P<0.05);HBeAg血清转换率分别为32.39%和15.00%(P<0.05)。结论 ETV联合参仙乙肝灵可能通过对机体免疫功能的恢复从而促进HBeAg血清转换率的提高。     

健脾解毒方中甘草酸铵含量的高效液相色谱法测定

目的 建立测定健脾解毒方中甘草酸铵的含量的方法.方法 采用HPLC,色谱柱为Kromasil ODS-1 C18柱(l00mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.2 mol/L醋酸铵(67:33),检测波长250 nm;流速:1.0 ml/min;进样量20.0μl.结果 健脾解毒复方中甘草酸铵在0.02 ～ 4.0μg浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为98.45％,RSD为1.27％.结论 该方法简便、准确、分离效果好,可用于健脾解毒方的质量评价.