柴胡-白芍含药血浆通过miR-1297/PTEN信号轴对HepG2肝癌细胞的影响及机制研究

研究柴胡-白芍含药血浆通过微小RNA-1297(microRNA-1297,miR-1297)/第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)信号轴对肝癌细胞HepG2的影响及作用机制。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测miR-1297、PTEN mRNA在肝癌细胞株中的表达,双荧光素酶报告实验验证miR-1297与PTEN的靶向关系。将HepG2肝癌细胞分为空白血浆组、含药血浆组、miR-1297 inhibitor组、miR-NC组、miR-1297 inhibitor+含药血浆组。细胞计数试剂(CCK-8)法检测细胞增殖,筛选含药血浆最佳干预浓度及时间。细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,碘化丙啶(PI)染色法检测细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平。RT-qPCR检测miR-1297、PTEN、蛋白激酶B(Akt)、磷脂酰肌醇3...     

An Experimental Study on Drugs for Improving Blood Circulation and Removing Blood Stasis in Treating Mild Chronic Hepatic Damage

Large and small doses of drugs for improving blood circulation and removing blood stasis were used inmodel rats to treat mild chronic hepatic damage induced by carbon tetrachloride (CCl_4).The resultsshow that large dose of Dang Gui (当归 Radix Angelicae Sinensis) and Dan Shen (丹参 Radix SaiviaeMiltiorrhizae) (drugs for regulating blood flow) and small dose of Yu Jin (郁金 Radix Curcumae) andNiu Xi (牛膝 Radix Achyranthis Bidentatae) (drugs for activating blood flow) can significantly elevatethe activity of SOD (P<0.05) and/or lower the T/K ratio,markedly reduce the MDA content (P<0.05 orP<0.01) and significantly decrease the activities of ALT and AST (P<0.05 or P<0.01),demonstratingthat these drugs are effective in combating oxygen free radicals (OFR) in chronic liver damage.On thecontrary,large dose of Tu Bie Chong (土鳖虫 Eupolyphaga seu Steleophaga) and E Zhu (莪术Rhizoma Curcumae) (drugs for removing blood stasis) tend to increase the ALT and AST (P<0.05)activities.The results suggest that the synergism of elevation of the SOD activity and reduction of T/Kratio contributes to the action of drugs for improving blood circulation and removing blood stasis incombating the liver damage induced by CCl_4.     

温阳解毒化瘀方对HBV相关肝衰竭患者肠道菌群的影响

目的：观察温阳解毒化瘀方对HBV相关肝衰竭患者肠道菌群、血浆内毒素的影响。方法：将60例中医辨证为＂脾虚瘀黄＂的HBV相关慢加亚急性肝衰竭患者随机分为两组,治疗组（西医治疗＋温阳解毒化瘀方）30例,对照组（西医治疗）30例,疗程共4周。测定两组患者治疗前后肠道菌群的计数、血浆内毒素水平。结果：治疗组的有效率（92.8%）优于对照组（71.4%）;治疗组患者治疗后较治疗前双歧杆菌的菌落数增加（P〈0.01）,肠杆菌数量下降（P〈0.05）,血浆内毒素下降（P〈0.05）;治疗组患者治疗后比对照组患者双歧杆菌数量明显增加（P〈0.05）,血浆内毒素明显下降（P〈0.05）。结论：温阳解毒化瘀方治疗HBV相关肝衰竭可改善患者肠道菌群,降低血浆内毒素的水平,从而提高临床疗效。     

温法干预治疗慢性乙型重型肝炎阳黄湿热内蕴(湿重于热)证的临床疗效与安全性研究

目的:比较清热利湿法加与不加温阳健脾药物治疗慢性重型肝炎(阳黄、湿重于热型)的疗效。方法:采用随机、对照方法,将60例中医辨证为湿重于热的慢性重型肝炎分为两组,分别给予甘露消毒丹(非温法干预组)和甘露消毒丹加附片、白术(温法干预组)治疗。结果:治疗4周,温法干预组和非温法干预组有效率分别为93.1%和72.41%。两组患者的TBil均有明显下降,温法干预组的下降幅度较非温法干预组明显,治疗前后差值分别为(228.62±89.18)和(176.70±97.94)μmol/L,两组比较,P0.05。PTA水平都有不同程度的升高,温法干预组PTA水平上升的幅度大于非温法干预组,上升幅度均数比较,P0.05。未发现温法干预组患者出现感染、出血及黄疸加重等不良反应。结论:清热利湿法加用附片、白术可提高慢性重型肝炎湿重于热证的疗效,且安全性良好。     

莪术治疗慢性肝损伤时的肝毒作用研究

目的：观察不同剂量莪术治疗重度慢性肝损伤时的肝毒作用，方法：采用牛血清白蛋白（BSA）制造大鼠免疫性重度慢性肝损伤模型，观察肝功能，脂质过氧化反应及肝细胞膜ATP酶的变化，结果：大剂量莪术级大鼠的血清ALT升高，Alb降低（P值均小于0．05），肝细胞膜Ca^2 -ATPase降低（P值小于0．01），结论：大剂量莪术可加重慢性肝损伤，临床治疗慢性肝病应禁用。     

比较不同方法肝脏靶向性导入抗TGF-β_1 siRNA对肝细胞TGF-β/Smad信号传导通路的影响

目的比较抗TGF-β1 siRNA靶向性进入肝细胞的4种转染方式在抗肝损伤与纤维化及对TGF-β/Smad信号传导通路影响中的效果差异,并探讨各自的优劣。方法已启动肝组织中的TGF-β/Smad信号传导通路的50只模型鼠,随机分为模型对照组、尾静脉直接注射组、脂质体包裹组、流体动力学法组和肝动脉插管组,每组10只;将构建的TGF-β1 siRNA质粒分别通过尾静脉直接注射、脂质体包裹、流体动力学法、肝动脉插管等方式导入肝脏靶细胞;分别检测血清指标ALT、AST、HA;取肝组织,HE染色病理检测;RT-PCR技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β1和Smad3 mRNA表达;免疫组化技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β和Smad3蛋白表达。结果抗TGF-β1siRNA质粒经过以上4种导入方法转染入靶细胞,均能有效地阻断大鼠肝组织中的TGF-β/Smad信号传导通路的传导（P〈0.05）;4种导入方法比较,肝动脉插管组与脂质体包裹组效果相当（P〉0.05）,优于尾静脉直接注射组及流体动力学法组（P〈0.05）,尾静脉直接注射组效果最差（P〈0.05）。结论抗TGF-β1siRNA质粒经肝动脉插管途径转染,是一种安全、高效的外源基因肝脏靶向导入转染方法。     

苦参素注射液治疗慢性乙型肝炎高胆红素血症疗效分析

慢性乙型肝炎(慢乙肝)高胆红素血症病情较重，且容易发展成为慢性重型肝炎，故其治疗非常重要。我们在2003年2～11月，试用苦参素注射液治疗慢乙肝高胆红素血症患者48例，取得了较好疗效，现将结果报告如下。     

柴芍六君子汤拮抗莪术致大鼠肝细胞线粒体损伤的研究

目的 比较莪术及莪术配伍柴芍六君子汤后治疗大鼠肝硬化的疗效和副作用。方法 运用牛血清白蛋白（BSA）致大鼠免疫性肝硬化模型，应用不同剂量和不同疗程的莪术和莪术＋柴芍六君子汤治疗，分别在用药20和40d时处死大鼠，运用超速离心法分离线粒体。检测肝细胞线粒体还原性谷胱甘肽（GSH）、Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶、Ca^2＋含量。结果 莪术能够促使肝细胞线粒体的钙超载，降低其ATP酶的活性，大剂量的莪术能够诱导线粒体内的脂质过氧化反应，增加脂质过氧化产物。同时，莪术还可以降低Bcl-2在肝细胞上的表达量；柴芍六君子汤可以在一定程度上拮抗莪术对肝细胞线粒体的损伤（以ATP酶升高及钙离子下降最为明显）及升高Bcl-2在肝细胞上的表达量。结论 肝硬化时大剂量莪术可加重肝细胞损伤，莪术配合柴芍六君子汤可以降低其对肝细胞的损伤。     

中医黄疸病专题文献数据库建设的理论与实践探讨

中医黄疸病文献数据库是实现中医肝病证治标准化、数据化的重要手段。本文分析了黄疸病文献数据库建立的背景及意义,从文献数据来源、中医黄疸病叙词表的建立、文献资料采集与分析等方面来阐述中医黄疸病数据库的构建,对该数据库包涵的内容、功能进行简介,并从文献数据库的标准化、质量、维护、培养人才及团队建设等方面说明中医黄疸病数据库建设存在的不足,以期继承与发展中医黄疸病理论体系和辨证论治体系,提高中医黄疸病辨证论治水平。     

清热解毒、活血化瘀法治疗慢性肝功能衰竭临床观察

目的:观察清热解毒、活血化瘀法治疗慢性肝功能衰竭的临床疗效。方法:收集广西中医药大学第一附属医院2015年1月—2016年6月确诊为慢性肝功能衰竭的住院患者90例,随机分为试验组49例和对照组41例。对照组给予基础治疗、对症支持治疗及中成药护肝退黄,试验组在对照组治疗的基础上加用解毒化瘀颗粒治疗。治疗2个疗程后,记录两组患者中医证候积分情况,记录治疗第4周和第8周后肝功能[包括总胆红素(total bilirubin,T-BIL)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、血清白蛋白(serum albumin,ALB)];凝血功能[凝血酶原时间(blood prothrombin time,PT)、凝血酶原活动度(prothrombin activityprothrombin time activity,PTA)]的变化情况;记录腹水最深度及两组治疗后终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分情况。结果:试验组治疗后TBi L、ALT、AST水平优于对照组(P0.05);试验组治疗后ALB、胆碱酯酶、MELD评分优于对照组(P0.05);试验组治疗后凝血酶原时间、腹水最深度水平、凝血酶原活动度优于对照组(P0.05);试验组有效率为81.6%,对照组有效率为53.7%,试验组明显优于对照组(P0.05)。结论:清热解毒、活血化瘀法治疗慢性肝功能衰竭疗效优于单一西医综合治疗,能显著改善患者临床症状,改善肝脏功能,降低死亡率。