人MAdCAM-1真核表达载体的构建及其表达细胞株的建立

目的:建立表达人MAdCAM-1的细胞模型。方法:从pUC21/hMAdCAM-1质粒酶切下hMAdCAM-1全长cDNA片段,将其克隆于巨细胞病毒载体pCIneo中,构建出由CMV启动子控制的重组真核表达载体pCIneo-hMAd,经脂质体介导转染至CHO细胞,以G418筛选抗性克隆。结果:筛选出的阳性克隆细胞以免疫荧光和免疫酶标染色法检测,表明有人MAdCAM-1分子表达;其细胞裂解物经免疫印迹分析,证实约63 kD的新增蛋白带与抗 hMAdCAM-1抗体有特异性结合反应;淋巴细胞粘附实验结果提示表达产物具有一定的功能活性。结论:成功地获得了表达人MAdCAM-1分子的细胞株,为进一步研究其生物学功能及其作用机制奠定了基础。     

新生儿窒息复苏的护理体会

1999年 1月— 2 0 0 1年 12月我院共抢救窒息新生儿 3 3 2例 ,现将复苏护理过程总结如下。1　临床资料上述时期我院共分娩新生儿 6187例 ,有 3 3 2例发生窒息。其中早产 13 3例 ,妊高征、慢性高血压妊娠、过期妊娠和产前出血等引起的胎盘功能不良 46例 ,脐带过长、过短或脱垂等异常 2 9例 ,臀位分娩 16例 ,吸引器牵引困难、助产时间 >15min 2 0例 ,宫缩过强、过频、滞产或第二产程延长以及孕妇合并内科病者 88例。本组重度窒息 74例 ,死亡 17例 ,余痊愈。2　观察与护理2 1　常规护理　首先要保持患儿呼吸道通畅 ,清除口鼻腔内的黏液。患儿…     

黄芪甲苷治疗缺血性脑卒中的网络药理学

目的 使用网络药理学的方法研究黄芪甲苷治疗缺血性脑卒中的机制。方法 在药物靶点预测平台Swiss Target Prediction上预测黄芪甲苷的靶点,借助人类基因数据库（GeneCards）,药物靶标数据库（TTD）,中医药研究综合数据库（TCMID）及中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）检索缺血性脑卒中疾病的靶点;将化合物靶点与疾病靶点作交集得到黄芪甲苷作用于缺血性脑卒中的潜在靶点。使用蛋白质相互作用平台（STRING）构建蛋白相互作用（PPI）网络,并通过网络拓扑分析筛选核心靶点。在生物学信息注释数据库（DAVID）中对交集靶点进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。最后进行分子对接验证,进一步明确黄芪甲苷作用于缺血性脑卒中的核心靶点。结果 黄芪甲苷与缺血性脑卒中的靶点取交集后获得44个共同靶点,PPI网络拓扑分析发现蛋白激酶B1（Akt1）,肾素（REN）,表皮生长因子受体（EGFR）,血管内皮生长因子A（VEGFA）,非受体酪氨酸蛋白激酶Src（SRC）是黄芪甲苷治疗缺血性脑卒中的核心靶点。KEGG通路富集分析结果显示,黄芪甲苷作用于缺血性脑卒中的通路涉及神经活性配体-受体相互作用通路,环磷酸鸟苷（cGMP）/cGMP依赖的蛋白激酶（PKG）信号通路、钙信号通路、小分子G蛋白（Rap1）信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路等。结论 黄芪甲苷可能通过作用于Akt1,REN,EGFR,VEGFA,SRC等靶点促进血管生成及抑制血小板活性进而改善脑血流量,又可以抑制脑部缺血组织细胞的凋亡及炎症反应等减轻神经功能的损伤,最终产生治疗缺血性脑卒中的效果。该研究结果为深入探究黄芪甲苷治疗缺血性脑卒中的作用机制提供了思路和引导方向。     

类风湿关节炎滑膜血管生成和血管翳

血管翳的形成是类风湿关节炎(RA)的重要病理过程,是引起关节病变、软骨破坏的主要原因及病理基础,而滑膜血管增生是血管翳形成的主要病理特点。本文从滑膜血管生成过程及其影响因素以及以滑膜血管或血管翳为靶标的RA治疗策略3个方面进行了初步的阐述,以期为RA临床的防治研究提供思路和参考。     

活骨Ⅱ方加不同引经药对股骨头坏死兔股骨头内血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察比较活骨Ⅱ方配伍不同引经药对股骨头坏死(0NFH)兔股骨头内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其防治ONFH的作用机制.方法:84只兔经液氮冷冻法建立股骨头坏死模型后,随机分为以下6组:模型组活骨Ⅱ方组、活骨Ⅱ方加不同引经药组(牛膝、独活、细辛和桔梗),另14只设为伪手术组.造模后中药组立即分别给予活骨Ⅱ方(6 g·kg-1·d-1)、活骨Ⅱ方(6 g·kg-1·d-1)加引经药(牛膝0.75 g·kg-1·d-1,细辛0.15 g·kg-1·d-1,独活0.75 g·kg-1·d-1,桔梗0.75 g·kg-1·d-1,分别相当于临床等效量)灌胃,连续4周;模型和伪手术组给予生理盐水灌胃,所有动物均皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 30 μg· kg-1 ·d-1,连续7d.实验2周和4周时取左侧股骨头,分别行苏木精-伊红(HE)染色观察其组织病理学改变和墨汁灌注染色观察股骨头内血管形态变化,并经免疫组织化学法检测股骨头内VEGF的表达水平.结果:与伪手术组相比,模型组实验2周和4周时股骨头空骨陷窝率显著增多,血管面积及VEGF表达明显减少(P ＜0.01或P ＜0.05).活骨Ⅱ方能显著降低股骨头空骨陷窝率,并提高血管面积及VEGF的表达(P＜0.01或P＜0.05).与活骨Ⅱ组相比,牛膝组4周时空骨陷窝率显著减少,血管面积明显增多(P＜0.01或P＜0.05),2周和4周VEGF表达均明显增多(P＜0.01);桔梗组4周时VEGF表达显著降低;细辛和独活组无显著变化.结论:引经药牛膝具有进一步提高活骨Ⅱ方上调股骨头内VEGF表达的作用,这可能是其有效改善股骨头血循环、防止坏死的机制之一.     

哮喘缓解期患儿Th亚群功能状态的研究

大量研究显示急性期哮喘发作存在Th2 亚群功能亢进、Th1亚群功能低下的失衡。而在容易复发的哮喘缓解期患儿Th亚群免疫功能状况尚缺乏系统全面的研究。本研究拟通过观察哮喘缓解期患儿周围血单核细胞 (Peripheralbloodmon nuclearcell ,PBMC)培养 2 4h后上清液中IL 4、IFN γ、IL 10浓度以及血清IgE浓度 ,以及PBMC培养 5h后细胞内合成IL 4和IFN γ的阳性细胞百分比 ,同时计数外周血嗜酸粒细胞 (Eosinophil ,EOS) ,较全面的评估哮喘缓解期患儿TH亚群功能状态 ,探讨支气管哮喘容易复发的免疫学机制。1　资料与方法1 1　对象资料…     

眼睑及双下肢水肿、乏力、恶心呕吐 ——临床病例(理)讨论第70例

1　病历摘要患儿女 ,11岁。因“眼睑及双下肢水肿 1月余 ,乏力、恶心、呕吐 3天”于1998年 12月 2 9日入本院。患儿 1998年 11月初无明显诱因出现行走乏力 ,家人发现其眼睑及双下肢水肿 ,按之凹陷 ,晨轻暮重 ,无发热、恶心、呕吐及腹泻 ,尿、粪正常。患儿水肿逐日加重 ,遂于 11月 13日到当地县人民医院就诊 ,诊断为“肝炎 ?心肌炎 ?肾炎 ?” ,予以输液等治疗 ,眼睑及双下肢水肿缓解 ,11月 2 1日出院 ,院外服用中药治疗。12月 2 6日起患儿觉乏力加重 ,并恶心、呕吐数次 ,呕吐呈非喷射状 ,为胃内容物 ,不伴腹痛及腹泻 ,尿量减少 ,每日2次 ,淡…     

实验性缺锌大鼠大脑神经元DNA含量的初步观察

实验性缺锌大鼠大脑神经元ＤＮＡ含量的初步观察孔祥英，付晓兰，吴嘉惠，白家驷，贺光友，吴水冰第三军医大学第一附属医院儿科（重庆６３００３８）ＡｂｓｔｒａｃｔＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｃｙｏｎｔｈｅＤＮＡｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｅｒｅｂｒ...     

孕母及其新生儿血清维生素A含量分析

对75例健康初孕妇女及其足月健康新生儿进行血清维生素A测定，并与血清蛋白质、血红蛋白、血清铁、铁蛋白、锌等进行综合分析。母亲血清VA为3．06±1.03μmol/L，高于新生儿2.74±1.0μmol/L。夏季母、子血清VA均高于秋季，但无显著性差异。孕母临界性VA缺乏占27％、新生儿占45．3％。其血清VA与血红蛋白、血清铁、血清锌呈显著正相关，与血清铁蛋白无相关性。同时VA与新生儿出血体重，胎盘质量也呈显著相关性。提示VA对铁代谢及胎儿生长发育有重要作用。因此，重视VA对母子健康的研究，对临界VA缺乏者进行干预处理，对优生优育有重要意义。     

重症肺炎合并呼吸衰竭82例的急救

我科自1975年8月至1984年2月,8年半期间内共收治小儿肺炎1,632例,重症肺炎731例,合并呼吸衰竭82例(11.2%),其中死亡15例(18.3%)。