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231.
232.
目的 探讨LINC00839靶向调控miR-124-3p对膀胱癌细胞生物学行为的影响。方法 实时荧光定量PCR(qPCR)检测膀胱癌和癌旁正常组织、膀胱癌细胞株(T24、5637、EJ)中LINC00839表达及抑制LINC00839后对miR-124-3p表达的影响。构建3条小干扰RNA-LINC00839(si-LINC00839-1组、si-LINC00839-2组和siLINC00839-3组)序列转染膀胱癌细胞。沉默LINC00839表达后,CCK-8检测LINC00839对细胞增殖的影响;Transwell检测LINC00839对细胞侵袭的影响;流式细胞术检测LINC00839对细胞凋亡的影响;双荧光素酶实验检测LINC00839与miR-124-3p的相互作用;免疫蛋白印迹法检测抑制LINC00839后对内皮素受体B(EDNRB)蛋白表达的影响。结果 q PCR检测结果显示,与癌旁正常组织比较,膀胱癌组织中LINC00839表达增高(P<0.05);LINC00839在膀胱癌细胞5637表达最高。3条siRNA序列中,si-LINC00839-2抑制效率最高。与si... 相似文献
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目的:探讨LINC00475在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)组织中的表达及对肾癌细胞增殖和侵袭的影响及可能机制。方法:高通量转录组学测序筛选出ccRCC和癌旁正常肾组织差异表达长链非编码RNA。实时荧光定量PCR(q-PCR)检测20例ccRCC组织和癌旁正常肾组织、肾癌ACHN、caki-1、caki-2细胞中LINC00475表达。RNA干扰研究LINC00475的生物学功能,分别用CCK8和Transwell实验研究LINC00475对肾癌细胞增殖和侵袭的影响。免疫蛋白印迹法检测PYCR1 mRNA和蛋白表达。结果:与癌旁正常肾组织比较,LINC00475在ccRCC组织过表达(P<0.05);LINC00475在肾癌ACHN细胞中表达最高。沉默LINC00475表达后,抑制肾癌ACHN细胞增殖和侵袭(P<0.05),下调PYCR1 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:LINC00475过表达可能与肾癌的发生发展有关,沉默LINC00475可能调控PYCR1表达,从而抑制肾癌细胞增殖和侵袭等恶性... 相似文献
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目的 建立槲寄生黄酮类成分的特征指纹图谱,同时测定槲寄生中高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素的含量,结合化学计量法分析,为其质量控制提供参考。方法 采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min-1,检测波长为285 nm,柱温30℃。建立14批槲寄生药材的黄酮类成分指纹图谱,结合化学计量学软件进行聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)。在同一色谱条件下,经方法学验证,HPLC法同时测定14批槲寄生药材中高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素。结果 建立了槲寄生药材黄酮类成分的指纹图谱,标定了7个共有特征峰,指认了其中2个峰:峰4 (高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷)、峰6(高圣草素);其中12批槲寄生药材相似度达到0.9以上,聚类分析将14批样品分为2类;PCA分析共得到2个主成分,主成分1主要反映了特征峰2~7的信息,主成分2主要反映特征峰1的信息,峰4与峰6的峰面积较大,且对第1主成分的贡献也较大;PLS-DA结果表明,3个共有特征峰的变量重要性投影(VIP)值>1,依次为峰7、峰6、峰4。高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素2个指标成分在一定质量浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为103.17%、101.47%,RSD分别为2.0%、0.7%,方法学考察结果均符合相关要求,14批样品中2种成分总质量分数为2.32~5.17 mg·g-1。结论 建立的方法准确、简便、重现性好,可为槲寄生药材的质量控制提供参考。 相似文献
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目的:优化海马万应膏的前处理过程,建立海马万应膏质量评价方法,完善海马万应膏的质量标准。方法:对海马万应膏中血竭和肉桂进行显微鉴别,采用TLC及HPLC法比较直接提取和硅藻土分散法对血竭提取能力定性鉴别及方法学验证;同时进行海马万应膏质量标准研究。结果:显微鉴别可快速检视海马万应膏中血竭、肉桂相应植物组织特征;硅藻土分散法提取能力强,TLC法斑点清晰,HPLC法分离度良好,阴性无干扰,可快速定性鉴别血竭投料情况;软化点限度合理,重量差异测定结果符合规定。结论:所优化硅藻土分散法提取率高,鉴别方法重现性好,可有效地控制海马万应膏的质量,为黑膏药质量标准提供依据和参考。 相似文献