中药复方血清药理方法学探讨-Ⅲ

将所采集的含药血清分为２份,其中１份经５６℃３０ｍｉｎ灭活,对比灭活前后血清对病毒致细胞病变作用的影响,结果：正常血清灭活后相对作用强度平均降低５０％左右,抑制病毒致细胞病变的作用基本消失;１次给药采集的含药血清灭活后相对作用强度平均降低５０％左右,２次给药采集的含药血清灭活后相对作用强度平均降低３５％左右,但两者灭活前所表现的有效时间点均仍然存在。     

桂枝汤对发热及低体温大鼠下丘脑中腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶活性的影响

目的：观察桂枝汤对发热和低体温模型大鼠下丘脑中腺苷酸环化酶（AC）和磷酸二酯酶（PDE）活性的影响。方法：采用放射性同位素方法测定模型动物下丘脑中AC及PDE活性。结果：在酵母诱导发热模型大鼠中，桂枝汤可使下丘脑中AC活性明显降低（P＜0．05）；而在安痛定诱导的低体温模型大鼠中，它可使AC活性明显增强（P＜0．05）。在两种模型中，桂枝汤对PDE活性的影响均不明显。结论：桂枝汤对体温的双向调节作用可能是部分通过影响AC活性来实现的。     

桂枝汤有效部位A对体温双向调节作用机理研究——对下丘脑三磷酸肌醇和钙调蛋白含量的影响

桂枝汤有效部位Ａ（Ｆｒ．Ａ）对酵母致热大鼠下丘脑三磷酸肌醇（ＩＰ３）和钙调蛋白（ＣａＭ）的降低及安痛定诱致低体温大鼠下丘脑ＩＰ３和ＣａＭ含量的升高均有明显的逆转效应，即使高体温大鼠下丘脑ＩＰ３和ＣａＭ升高，低体温大鼠ＩＰ３和ＣａＭ降低，分别使之趋向正常。结果提示，Ｆｒ．Ａ对体温的双向调节有中枢神经细胞内信息传递系统ＩＰ３和ＣａＭ参予。     

桂枝汤有效部位A对体温双向调节作用及其机理研究————对下丘脑NE、DA、5-HT含量的影响

在酵母诱导的发热大鼠中，桂枝汤有效部位Ａ能降低下丘脑５－ＨＴ、ＮＥ、ＤＡ含一；在安痛定诱导的低体温大鼠中，能升高５－ＨＴ含量，结果提示，Ｆｒ，Ａ为桂枝汤体温双向作用的一种物质基础，影响中枢神经递质５ＨＴ的水平是其机理之一；其解热作用与影响中枢神经递质ＮＥ和ＤＡ的含量有关。     

内皮细胞功能及其异质性研究的进展

血管内皮细胞具有广泛的生理功能，本文从血管形成、凝血及血小板和内皮细胞的相互作用、炎症和免疫反应、合成基质成分、调节血管张力和脂质代谢等方面，综述了内皮细胞的功能。重点介绍了各类组织和动物内皮细胞之间的区别，主要体现在形态、功能、表面抗原及对内皮损伤后的反应等方面。     

白细胞介素1β刺激对脑微血管内皮细胞COX活性、mRNA表达和PGE2释放的影响

目的： 探讨白细胞介素1β（IL-1β）刺激不同时间对大鼠脑微血管内皮细胞（rCMEC）的环氧合酶（COX）活性及其mRNA表达和PGE₂释放的影响。 方法: 建立rCMEC培养，进行Ⅷ因子相关抗原鉴定。细胞长至融合状态后加入IL-1β（30 μg/L），分别刺激0.5、1、2、4、8、12、24 h，ELISA测定细胞内COX-1、COX-2的活性及细胞外液PGE₂含量，荧光实时定量PCR检测COX-1、COX-2的mRNA表达量，扩增产物进行熔解曲线图及琼脂糖电泳分析，并与未刺激的rCMEC作比较。 结果: ①Ⅷ因子抗体免疫组化染色可见90％以上的培养细胞呈阳性，确认为rCMEC。②IL-1β刺激4 h时细胞培养液PGE₂含量已明显高于未刺激组（P<0.05）；12 h时PGE₂含量达到最大值（P<0.01）；24 h时PGE₂含量有所回降，但与未刺激组比较仍有显著差异（P<0.05）。③IL-1β刺激不同时间rCMEC内COX-1活性与未刺激组相比无统计学差异（P>0.05）；COX-2活性在第8 h时已明显高于未刺激组（P<0.05），12 h活性达峰值（P<0.01），24 h活性有所回降，但仍具显著差异（P<0.05）。④IL-1β刺激不同时间COX-1 mRNA表达与未刺激组比较无明显差异（P>0.05）；未刺激组在本实验条件下未检测到COX-2 mRNA表达，IL-1β刺激1h时可见COX-2 mRNA表达，4 h时COX-2 mRNA表达至峰值，而后开始回降，第12 h时已未见表达。熔解曲线图显示无非特异性扩增；琼脂糖电泳可见扩增基因与目的基因长度相符，结果与荧光定量PCR一致。 结论: IL-1β作用下，rCMEC释放的PGE₂持续增加并于12h达峰值，这一过程主要与COX-2 mRNA表达激活及COX-2活性增加有关。     

青蒿素耐药与脾脏清除疟原虫机制研究进展

疟原虫对青蒿素类药物产生耐药性的定义是:疟疾患者进行青蒿素联合疗法(artemisinin-based combination therap,ACTs)三日治疗后,患者血液内的疟原虫清除时间延长。疟原虫的体内清除不单单与抗疟药物的杀虫效用相关,还受疟原虫本身的变异、人体免疫功能调节如吞噬细胞的识别处理、免疫器官如脾脏的外排异物等因素的影响。本文主要从疟原虫本身的变异、脾脏清除疟原虫的研究进行了综述:包括K13突变;脾脏的两条血液循环通路;脾静脉窦可通过物理机械传感方式截留疟原虫或红细胞碎片;红髓是过滤血液的主要场所,其中的免疫细胞负责疟原虫残留物的清除工作;脾静脉窦截留疟原虫的过程称为孔蚀,其发生率受疟原虫的生长周期及治疗药物的影响。现就脾脏清除疟原虫的功能进行阐述,以期为疟原虫对青蒿素产生耐药性的生物学本质提供新的思路和参考。     

黄连解毒汤含药血清对Toll样受体34、型及其下游信号转导通路的影响

目的：研究黄连解毒汤含药血清对细菌脂多糖和双链RNA病毒核酸类似物聚肌胞刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7 Toll样受体（TLR）及其下游主要信号转导通路的影响。方法：用脂多糖、聚肌胞分别刺激RAW264.7细胞,同时给予黄连解毒汤含药血清进行干预,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α和IFN-β的含量,荧光定量PCR方法测定TLR3、TLR4和下游信号转导通路髓样分化因子88（MyD88）,肿瘤坏死因子受体相关因子-6（TRAF-6）,TOLL样受体相关分子（TRAM）和TOLL样受体相关的干扰素活化子（TRIF）mRNA的表达,Western blotting法分析TLR3、TLR4蛋白的表达,同时用细胞免疫荧光法分析MyD88,TRAF-6蛋白表达的强弱,在mRNA水平和蛋白水平探讨黄连解毒汤对Toll样受体的作用机理。结果：黄连解毒汤含药血清显著降低LPS诱导的TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM和TRlF的高表达（与单纯LPS刺激组比较,P〈0.05或P〈0.01）;Poly（I：C）刺激后,黄连解毒汤含药血清仅对TRAM利TRIF的表达有明显的降低作用（P〈0.01）。结论：黄连解毒汤能阻断TLR4高表达,阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖和非依赖两条途径（以阻断非依赖途径为主）,抑制相关基因表达产物TNF-α、IFN-β过度分泌,具有TLR4拮抗剂样作用。黄连解毒汤也可直接作用于接头蛋白TRAM和TRIF,影响TLR3信号转录的MyD88非依赖性途径,抑制IFN-β的过度分泌。     

六味地黄汤对氨基甲酸乙酯诱发肺腺瘤的抑制作用

我们曾经报道六味地黄汤能降低亚硝胺引起的小鼠前胃鳞癌的诱发率,对人食管癌的癌前病变——食管上皮细胞重度增生有某些疗效。为进一步探讨其作用,又作了它对氨基甲酸乙酯诱瘤作用的影响。一、实验方法:用本院饲育的6周龄昆明种雄性小鼠,按体重均     

猪苓提取物对脾细胞杀伤瘤细胞作用和骨髓干细胞的影响

以往的资料表明,猪苓提取物,(“757”)对增强荷瘤机体内固定和游走的巨噬细胞吞噬功能,提高脾细胞的空斑形成,影响移植物抗宿主反应,具有较明显