银杏内酯和银杏黄酮干预β－淀粉样蛋白跨血脑屏障低氧模型转运的体外研究

目的：观察银杏内酯和银杏黄酮干预β－淀粉样蛋白（Aβ）跨血脑屏障（BBB）低氧模型的转运情况及与晚期糖基化终产物受体（RAGE）、低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP1）表达的相关性。方法利用 Tran－swell 装置共培养大鼠脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞建立 BBB 模型,并分为对照组、低氧模型组、银杏内酯组、银杏黄酮组及联合用药组。观察 Aβ由脑侧向血管侧的转运情况,并检测 TEER 值及 FD4通透率以评价 BBB完整性,采用 RT －qPCR 及 Western blot 法检测转运体 RAGE、LRP1的表达。结果在低氧条件下,受试药物单独或联合干预后,Aβ的外向转运率明显上升,差异有统计学意义,且联合用药效果更优。各组处理均未破坏 BBB 的完整性;低氧上调 RAGE 的表达,下调 LRP1的表达,药物单独干预均能改善低氧对 LRP1的抑制作用,但不影响RAGE 的表达;而联合用药下调 RAGE 表达,同时上调 LRP1表达。结论银杏叶活性成分银杏内酯和银杏黄酮通过干预 BBB 低氧模型 RAGE 及 LRP1的表达,促进 Aβ的外向转运,从而降低脑 Aβ水平,延缓了阿尔茨海默病的进展。     

案例式教学在病理学教学中的应用初探

病理学是一门理论性和实践性均很强的学科,为了提高病理学教学质量,改革传统教学方法,在本科生病理学教学的部分章节采用案例式教学法。文章就案例式教学法的具体实施过程,与传统教学法相比具有的优势,以及在实施过程中发现的问题做初步探讨。     

银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默病家兔模型ACAT1和LCAT mRNA表达的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默(AD)病家兔模型胆固醇酰基转移酶(ACAT1)和卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)mRNA表达的影响。[方法]以2%高胆固醇饲料喂养雄性新西兰大白兔,建立AD家兔模型。模型建立后,用50 mg/(kg·d)EGB761灌胃3周作为EGB761组,以5 mg/(kg·d)辛伐他汀作为阳性药对照组。干预结束后,通过实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测海马卵磷脂-胆固醇酰基转移酶mRNA和胆固醇酰基转移酶1 mRNA的表达。[结果]银杏叶提取物EGB761可以下调ACAT1 mRNA的表达,不影响LCAT mRNA的表达。[结论]银杏叶提取物EGB761可下调AD家兔模型ACAT1 mRNA表达,对LCAT mRNA表达无调节作用。     

银杏内酯A、B对高胆固醇诱导的PC12细胞胆固醇代谢的影响

[目的] 基于体外血脑屏障(BBB)环境, 观察高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇的代谢情况及银杏内酯A、B对其的影响。[方法] 利用Transwell装置共培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞建立体外BBB, 并与PC12细胞共培养。在Transwell 内皮细胞侧添加40 μmol/L胆固醇, 并分别给予30 μmol/L 银杏内酯A和25 μmol/L 银杏内酯B进行干预。干预结束后, 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术, 检测胆固醇代谢关键酶低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)、胆固醇酰基转移酶(ACAT)、ATP结合盒转运子A1(ABCA1)及胆固醇24S-羟化酶基因(CYP46)在mRNA水平的表达。[结果] 高胆固醇环境下, LRP-1表达下调(P<0.01), ACAT 及ABCA1表达上调(P<0.05), CYP46的表达有上调趋势;药物干预后, 除LRP-1有不同程度的升高(P<0.05), 其余各指标均无明显变化。[结论] GKA、B对高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇代谢关键酶LRP-1的表达有一定影响。     

TIMP-3甲基化调控与大肠癌转移的关系研究

目的探讨TIMP-3基因启动子5’CpG岛甲基化状况与大肠癌转移的关系。方法随机收集45例大肠癌病例。用甲基化特异性PCR检测TIMP-3基因启动子5’CpG岛甲基化状况;用免疫组化方法检测TIMP-3蛋白的表达水平;分析TIMP-3基因启动子甲基化与大肠癌转移之间的关系。结果大肠癌肝转移组、淋巴结转移组TIMP-3基因甲基化率分别高于非肝转移组（P〈0．01）、非淋巴结转移组（P〈0．01）;Duck＇s C＋D组甲基化率高于Duck’s A＋B组。大肠癌TIMP-3基因甲基化与TIMP-3蛋白的表达缺失有关（P〈0．01）。结论TIMP-3甲基化是大肠癌中TIMP-3蛋白表达缺失的主要原因,在大肠癌转移中发挥重要的作用,提示预后不良。     

银杏叶提取物EGB761对AS家兔PON-1和ox-LDL的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对动脉粥样硬化家兔对氧磷酶-1(PON-1)和氧化低密度脂蛋白(oxLDL)的影响。[方法]将24只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、EGB761组(n=8)。正常组给予普通饮食,模型组和EGB761组高脂饮食10周。EGB761组从第7周起给予EGB761 50 mg/(kg·d)灌胃4周,正常组和模型组给予等量生理盐水。采用酶免疫吸附法(ELISA法)和生化法检测PON-1的活性和含量,ELISA法检测ox-LDL的含量。[结果]模型组PON-1活性和含量明显降低(P0.05),ox-LDL的含量明显升高,银杏叶提取物组PON-1活性和含量明显升高,ox-LDL明显降低(P0.05)。[结论]银杏叶提取物EGB761降低ox-LDL、抗动脉粥样梗化(AS)的机制可能与其上调PON-1活性和含量有关。     

Wnt信号通路对酒精性肝纤维化中肝星状细胞活化的影响以及整合素连接激酶的调节作用

目的:研究Wnt信号通路对酒精性肝纤维化中肝星状细胞活化的影响以及整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的调节作用。方法:60只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照组和模型组,采用白酒辅以玉米油、吡唑混合食料灌胃的方法制备大鼠酒精性肝纤维化模型,于造模12周后,采用免疫组化法检测大鼠肝组织α-SMA、β-catenin蛋白的表达,并进一步通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肝组织ILK mRNA的表达。结果:正常肝组织中有少量β-catenin、α-SMA蛋白和ILK mRNA的表达,模型组大鼠肝组织中β-catenin、α-SMA蛋白和ILKmRNA的表达明显升高(P<0.01)。β-catenin的表达量与α-SMA的表达呈正相关(r=0.913,P<0.01),ILK的表达量与β-catenin的表达亦呈正相关(r=0.880,P<0.01)。结论:酒精性肝纤维化发生发展过程中,Wnt信号通路在肝星状细胞活化的过程中可能发挥了重要的作用,ILK可能通过调节Wnt信号通路间接发挥了促进肝星状细胞活化的作用。     

血脑屏障与阿尔茨海默病病变的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是导致痴呆的重要原因,进行性认知、记忆及行动能力障碍是其临床特点.研究发现,超过40％的AD患者脑内存在血脑屏障(BBB)通透性增高现象,血管内皮细胞、周细胞损伤甚至死亡是其主要原因;同时血管内皮细胞、周细胞损伤又与痴呆的发生密切相关.本文综述总结AD与BBB的内在联系及作用机制的研究进展,以期为A...     

救心胶囊对缺氧损伤内皮细胞抗氧化损伤能力影响的实验研究

目的观察救心胶囊对缺氧损伤后内皮细胞抗氧化损伤能力的影响,以探讨该复方保护内皮细胞和防治冠心病的作用机制。方法运用内皮细胞(Endothelium Cells,EC)培养技术,建立缺氧损伤模型,并以两种不同的给药方式-无菌中药提取液和载药血清进行分组培养,并观察内皮细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果内皮细胞缺氧损伤后,其SOD活性显著降低,MDA含量明显升高,而中药处理后能有效抑制上述改变。结论救心胶囊能增强细胞的抗氧化损伤能力,具有良好的保护内皮细胞的作用。     

电针对家兔易损斑块模型单核细胞趋化因子-1和斑块内巨噬细胞浸润的影响

目的：探讨电针刺激对家兔易损斑块内巨噬细胞浸润和血清单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的影响。方法：日本大耳白兔27只,随机分为对照组、模型组和电针组,每组9只,采用高脂饲料喂养加球囊拉伤法制备家兔腹主动脉易损斑块模型。对照组以普通饲料喂养,电针组在模型复制成功后行电针治疗,每日1次,连续两周。实验结束后,HE染色观察兔腹主动脉的斑块变化;采用免疫组织化学技术,观察斑块内巨噬细胞浸润的变化;采用ELISA法测定血清MCP-1的水平。结果：电针可减少斑块内巨噬细胞的浸润、降低血清MCP-1的浓度,与模型组相比差异显著。结论：电针可通过降低MCP-1表达和减少巨噬细胞的浸润起到稳定斑块的作用。