四方蒿片剂的HPLC指纹图谱研究

四方蒿Elsholtzia blandaBenth·又名鸡肝散、滇香薷、四棱蒿等,为哈尼族民族药,其叶、花或全草均可入药,用于治疗感冒、痢疾、肝炎等病症[1];主要产于云南南部和东南部、贵州和广西等地,资源丰富。四方蒿的主要成分为黄酮,尤以花序中黄酮含量最高[2,3]。研究证明四方蒿总黄酮有保护心肌细胞的作用,对心肌缺血、急性心肌梗死等有明显的疗效[4-7]。四方蒿片剂由四方蒿花序提取物制得,为控制其质量,作者采用HPLC建立了四方蒿片剂     

鸡肝散药效成分木犀草素在大鼠体内的排泄研究

目的建立RP-HPLC法测定大鼠尿、粪便、胆汁中鸡肝散药效成分--木犀草素的含量,研究木犀草素在SD大鼠中的排泄情况.方法给SD大鼠灌胃鸡肝散提取物后,于不同时间段采集尿样、粪便、胆汁,经处理后,以苷元木犀草素为目标物,分别测定其在不同时间段尿样、粪便、胆汁中的浓度.结果尿样、粪便、胆汁中木犀草素的方法回收率为98.00%～106.00%,提取回收率为85.00%～108.00%,日内及日间精密度均小于10.00%.木犀草素的总累积排泄率约为37% (测得尿中约11%;粪便和胆汁中各约26%).结论建立的大鼠尿、粪便、胆汁中木犀草素的含量测定方法具有灵敏、准确,专属性强等特点.     

药学多学科综合设计性实验的实践

药学实验教学对于培养学生的创新精神和实践能力有很重要的作用,但目前的教学方法存在不少缺陷。以“维生素C注射剂的制备及含量测定”实验为例,开设药剂和药分综合设计性实验。通过近三年的教学实践,使学生全面、立体地了解了药学各学科间的关系,增强了动手能力和综合应用能力。     

银杏叶制剂指纹图谱的研究及其应用

目的建立银杏叶提取物及其制剂的HPLC指纹图谱分析方法.方法应用HPLC-DAD法检测银杏叶提取物和制剂中主要化学成分, 以DiamonsilTMC18(200 mm×4.6 mm, 5 μm)柱为分析柱; CH3CN-0.01 mol·L-1 KH2PO4缓冲液(pH 2)为流动相, 梯度洗脱, 柱温24 ℃.分析测定了不同制剂和银杏叶对照提取物的指纹图谱, 应用相似度计算软件, 对银杏叶对照提取物与各种制剂的整体化学成分信息进行分析.结果来自不同厂家的不同制剂的指纹图谱有差异, 但来自不同厂家不同批次的提取物的指纹图谱差别不大, 同一厂家生产的不同批号的同一种制剂的指纹图谱也十分相似, 这些结果表明不同制剂因制备工艺的不同造成指纹图谱的差异, 但每种银杏叶制剂的指纹图谱非常相似, 说明银杏叶制剂生产工艺稳定, 质量恒定.结论本方法精确、简便、重复性好, 可用于各种银杏叶制剂的质量控制.     

高通量荧光筛选技术在药物相互作用研究中的应用

高通量筛选(high throughout screening，HTS)技术是在长期药物研究经验的积累和科学技术的进步，如分子生物学、分子病理学、分子药理学、微电子技术等学科发展的基础上，形成的药物发现过程的新方法。采用HTS技术评价化合物的生物活性涉及到多个方面的内容，如药理活性、药代动力学性     

鸡肝散药效成分木犀草素在大鼠体内的药代动力学

建立RP-HPLC法测定大鼠灌胃鸡肝散提取物后血浆中木犀草素的含量，并研究木犀草素在大鼠体内的药代动力学行为。大鼠灌胃鸡肝散提取物后，血浆样品经三氯乙酸沉淀蛋白，用RP-HPLC法测定。血浆中木犀草素的线性范围为0.37～47.27 μg·mL^-1；定量限为0.37 μg·mL^-1；方法回收率93%～99%，提取回收率75%～85%，日内及日间精密度均小于5%。鸡肝散提取物在大鼠体内的药代动力学行为符合开放二室模型。经大鼠性别和测定时间两因素方差分析，提示不同性别的大鼠的血药浓度具有显著性差异。通过质谱法鉴定了血浆中代谢物为葡糖醛酸结合物。建立的大鼠血浆中木犀草素的含量测定方法具有灵敏、准确，专属性强等特点，可用于鸡肝散药效成分木犀草素的体内药代动力学研究。     

外消旋普罗帕酮在经诱导的大鼠肝微粒体中N-去丙基化的立体选择性

:采用对照及 β-萘黄酮 (β- NF)或地塞米松(Dex)诱导的大鼠肝微粒体 ,应用 GITC柱前衍生化 ,反相高效液相色谱法研究了消旋普罗帕酮〔(R/S) - PPF〕体外代谢的立体选择性 .实验结果表明 ,在 Dex,β- NF诱导的微粒体中有 N-去丙基普罗帕酮生成。在 β- NF,Dex预处理组 ,(R/S) - PPF低浓度时的经肝微粒体代谢具有立体选择性 ,R(- )对映体的清除大于 S(+)对映体 ,高浓度时的代谢无立体选择性 .R(- )对映体的 Km 值显著低于 S(+)对映体 ,而 Vmax值无显著性差异 .在 Dex预处理组中的立体选择性大于 β- NF组 .在对照组中代谢无立体选择性 ,且 Km,Vmax值均小于β- NF,Dex预处理组。结果提示 ,CYP1 A,CYP3A4亚族对普罗帕酮 (PPF)的 N-去丙基化有贡献 .(R/S) - PPF的N-去丙基化具有浓度依赖性的立体选择性     

利用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达人CYP2E1

目的获得人CYP2E1重组酶,并用该重组酶的特征性探针底物对其进行代谢活性研究.方法以人肝组织RNA为模板,通过RT-PCR得到CYP2E1 cDNA片断,然后与pFastBac质粒连接,得到pFastBac-CYP2E1重组质粒,将其转化E.coli DH 10Bac大肠杆菌,通过转座作用,获得重组Bacmid-CYP2E1,将其转染草地夜蛾细胞(Sf9) 后,产生重组杆状病毒.将该病毒以及分别含有人CYPOR和人CYPb5的病毒共同感染Sf9细胞,收集共表达蛋白,以氯唑沙宗为底物鉴定重组酶的活性.结果利用细菌/杆状病毒系统得到重组人CYP2E1的表达,其对氯唑沙宗的Km值为(72.4±8.7)μmol·L-1,Vmax值为(2.41±0.10)μmol·min-11·g-1蛋白.结论利用杆状病毒系统成功表达了有催化活性的人CYP2E1重组酶,其活性与文献报道值相似.     

氧氟沙星对映体在经不同诱导剂诱导的大鼠肝微粒体中的葡醛酸化代谢(英文)

为评价氧氟沙星 ( OFLX)对映体葡醛酸化代谢的立体选择性 ,采用手性 HPLC法测定大鼠肝微粒体孵育液中 OFLX对映体 .结果显示 :经苯巴比妥 ( PB)和β-萘黄酮 ( BNF)诱导的不同葡醛酸转移酶 ( UDPGT)亚族对 OFLX对映体葡醛酸化代谢有不同的影响 .在所试验的对照 ,PB或 BNF诱导的微粒体中 S- ( - ) -和 R- ( + ) - OFLX之间 ,Km 和Vmax无显著性差异 ;但 PB组中 S- ( - ) -和 R- ( + ) -OFLX的 Km 和 Vmax与对照组或 BNF组相应的对映体比较有显著性差异 ;OFLX对映体之间的 Clint在对照组与 BNF组没有显著性差异 ;而在 PB组则有显著性差异 .另外 BNF组的 Clint较对照组和 PB组分别有显著性差异 .因此 ,经 PB诱导的 UDPGT亚族对 S-和 R- OFLX的 相代谢存在立体选择性 ,并主要是由于其催化部位的差异引起了内在清除率的变化 .     

尿中美芬妥英手性色谱分离单纯形法最优化

应用单纯形法对尿中美芬妥荚(MP)的手性气相色谱分离条件进行最优化。优化结果选定柱温为185℃,载气流速为2.5ml/min。在此条件下测得柱效(以S-MP计)n=936/m,MP两对映体的分离度R为0.96％。并对20名健康志愿者口服消旋体后0～8h内的尿样进行分析测定。