IL-24基因修饰的树突状细胞促进CIK细胞对肺癌细胞的杀伤作用

目的 研究IL-24基因修饰的树突状细胞(DC)与同源细胞因子诱导的杀伤细胞(cyto-kine-induced killer,CIK)共培养后对A549肺癌细胞的杀伤作用及其机制.方法 从健康人外周血单个核细胞中常规诱导DC、CIK细胞,同时抽提重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL-24,Pac I酶切线性化后脂质体转染QBl-293A细胞,收获Ad-IL-24重组病毒.将IL-24基因通过重组病毒导入已负载肿瘤抗原的DC,获得细胞称为DC-IL-24.RT-PCR和ELISA法检测DC中IL-24基因的表达,FCM和ELISA法检测DC表型及分泌细胞因子能力的变化,将DC和CIK细胞混合培养,溶血试验检测CIK细胞产生穿孔素的能力,FCM法检测共培养的DC-CIK细胞对A549肺癌细胞细胞毒活性的变化.结果 获得了高滴度的重组病毒Ad-IL-24并成功将IL-24基因导入DC,在倒置荧光显微镜下可观察到荧光,IL-24可上调Dc表而CD80、CD83、HLA-DR、CD40、CXCR4分子的表达,转染后Dc分泌IL-12、TNF-α和IL-24的能力显著增强,DC-IL-24更能促进CIK细胞产生穿孔素,与同源CIK细胞共培养后对A549肺癌细胞的细胞毒活件明显增强.结论 IL-24基因修饰的DC能增强自体CIK细胞产生特异性抗肿瘤免疫,其机制与IL-24能促进DC表型成熟,分泌Th1型细胞因子,维持DC活化状态,进而促进CIK细胞活化密切相关.     

骨保护蛋白对类风湿疾病相关骨吸收的作用

骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)是由成骨细胞(osteoblast)表达、分泌的TNF受体家族一成员,它对调节骨代谢有作用。作为诱饵受体,OPG能与其配体RANKL以高亲和力结合,阻止RANKL与受体RANK的结合,从而抑制破骨细胞参与的骨吸收。OPG对免疫系统也有重要的调节作用。RANKL缺陷小鼠表现出严重的免疫学异常和骨硬化(osteopetrosis)。活化的T细胞能表达RANKL mR-NA,其分泌RANKL的量受许多细胞因子的调节:一些促进炎症和骨吸收的细胞因子(诸如TNF-α、IL-1和IL-17)可以提高其产生,进而诱导破骨细胞生成(osteoclastogenesis);相反,这一过程可以被OPG、IL-4和IL-10(他们具有抗炎症效应和抑制破骨细胞形成作用)抑制。类风湿性关节炎滑膜中的活化T细胞也表达RANKL;在特定条件下(尤其当他们与M-GSF和RANKL共培养时),滑膜细胞(synoviocyte)可以分化成破骨细胞样细胞。因此,类风湿性关节炎中可以见到的骨侵蚀(bone erosion)可能是RANKL/RANK系统被活化T细胞活化的结果。这为用OPG来阻断这一机制以改善RA病人的症状提供了理论依据。     

老人

一个晴朗的周日,和朋友去50多公里外的一个山间水库钓鱼。聆听着山间鸟虫们的呜叫,享受着山谷里怡人的芳香,渔获根本不重要了,心情真好!     

HLA-DR4基因亚型在骨髓移植中的应用研究

骨髓移植供、受体的ＨＬＡ相合程度是决定移植成败的关键因素之一。ＨＬＡＤＲ４亚型在各人种中的频率均较高,且与骨髓移植后ＧＶＨＤ（ｇｒａｆｔｖｅｒｓｕｓｈｏｓｔｄｉｓｅａｓｅ,移植物抗宿主病）的发生有关〔１３〕。为探讨ＨＬＡＤＲ４基因亚型在骨髓移植中的意义,设计合成了ＨＬＡＤＲ４等位基因引物〔４〕,建立巢式ＰＣＲＳＳＰ分型方法,并对７５例临床标本进行了分析。材料与方法研究对象：来我院拟进行骨髓移植的患者及其家属,其中正常无血缘关系个体４１例,患者３４例,包括１例无血缘关系的供、受体。引…     

新霉素耐药基因（Neo^R）的整合与表达并不改变人乳癌细胞（ …

目的：通过对比ＭＤＡ－Ｎｅｏ＾Ｒ与ＭＤＡ人乳癌细胞的生物学特征,阐明原核标志基因ｅｏ＾Ｒ的长期稳定整合与表达是否对乳癌细胞原有的生物学特性产生影响。方法;对已建立证实表达Ｎｅｏ＾Ｒ基因〉６个月的７株ＭＤＡ－Ｎｅｏ＾Ｒ的细胞系进行Ｇ４１８抗性,表面抗原,细胞倍增时间,细胞周期,肿瘤细胞集落形成及裸鼠体内成瘤能力的检测。     

造血干细胞移植中HLA-II类基因分型影响因素的探讨

目的: 为了准确地进行造血干细胞移植供-受体的HLA - II 类配型,对HLA - II 类基因分型实验的影响因素进行了探讨.方法:采用美国莱姆达公司提供的微量SSPTM HLA-II类PCR-SSP分型试剂盒对400例造血干细胞移植供-受体进行基因分型.结果:采用0.5 %EDTA抗凝的血标本与肝素抗凝的血标本相比,前者的扩增效果好.DNA终浓度为25～200 ng/μl,最佳浓度为100 ng/μl,A260/A280比例在1.65～1.80之间.PCR反应参数是影响反应的重要因素之一.DNA Taq酶的使用量和活性将直接影响反应结果.D-MIX管应保存在-65℃,避免反复冻融,否则将使反应带变弱.结论:HLA-II类基因分型标本的处理和反应条件的优化是影响基因分型效果的因素.     

新型重组IL-6 D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白复性及纯化

目的：对高效表达的重组IL-6 D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白进行包涵体的分离、变性与复性以及纯化。方法：对表达菌体进行超声破碎、洗涤、氧化还原法变性及复性，经离子交换层析。结果：工程菌HB101／pE01T的表达产物是以包涵体形式存在，菌体的破碎以高渗蔗糖溶液进行预处理后，再超声破碎效果最好；包涵体的洗涤则先用Triton-X-100洗2次，再用8mol／L尿素洗涤一次效果更优；最佳变性条件为在7mol／L盐酸胍中加入0．065mmol／L的DTT和0．2mol／L的盐酸精氨酸；最佳复性奈件为在10℃复性保持24h，蛋白浓度保持在30～80μg/ml，并需加入0．2mol／L盐酸精氨酸；利用谷胱甘肽的氧化还原法，当氧化型谷胱甘肽与还原型谷胱甘肽的浓度比在2：1时所获得的活性成分得率最高；利用强弱离子交换结合的方法能获得纯度为95％的目的蛋白，所得融合蛋白可与IL-6及PEA抗体相结合并能特异性地杀伤高表达IL-6R的人多发性骨髓瘤细胞。结论：本研究获得重组IL-6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白包涵体的分离、变性与复性条件和一条能获得大量高纯度该融合蛋白的纯化路线。     

重度子痫前期伴发代谢综合征的临床特点分析

目的:探讨重度子痫前期(s-PE)伴发代谢综合征(MS)的临床特点.方法:2006年12月至2012年4月江苏省人民医院妇幼分院共收治s-PE患者246例,其中伴MS者80例(代谢组),未伴MS者166例(对照组).比较两组患者的孕期体重指数(BMI),发病孕周、终止妊娠孕周、临床体征、生化指标、并发症及母婴结局.结果:代谢组患者的BMI、水肿、胸水、腹水、脂肪肝发生率、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿酸(UA)、24h尿蛋白定量、肌酐(Cr)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)水平、早产及新生儿窒息发生率均显著高于对照组(P＜0.05);而血清高密度脂蛋白(HDL)显著低于对照组(P＜0.05).结论:s-PE伴发MS者脂肪肝发生率较高,糖脂代谢异常较重,易发生肝肾功能损伤,且早产及新生儿窒息发生率高.     

手术治疗63例胸腰椎爆裂骨折的临床分析

目的探讨手术治疗胸腰椎爆裂骨折的临床疗效和应用价值。方法 2006～2010年笔者所在医院脊柱外科共收集胸腰椎爆裂性骨折伴发脊髓损伤患者63例,根据患者情况选用后路手术内固定治疗。结果 63例患者经过后路手术内固定治疗后临床症状得到了缓解,没有出现新的神经症状。所有患者手术后伤椎前缘高度较术前明显恢复,矫正（8.6±1.1）mm,后凸角度平均矫正（15.1±1.3）°。对患者随访8~24个月,发现63例患者发生不同程度的矫正度丢失,其中伤椎前缘高度平均丢失（0.6±0.1）mm,矫正角平均丢失（4.9±0.4）。结论根据患者胸腰椎体损伤的程度、脊髓的波及状况、椎管内的占位情况,行后位切开复位加椎弓根部内固定,能有效的降低手术的并发症、维持较好的矫正度、保证了远期疗效,最终改善患者预后,值得临床推广。     

开颅夹闭术和血管内介入治疗前循环动脉瘤疗效的对比研究

目的 探究开颅夹闭术与血管内介入治疗前循环动脉瘤的临床效果.方法 随机选取我院2008年2月至2011年2月之间开颅夹闭术治疗的50例前循环动脉瘤患者为手术组和同期血管内介入术治疗的50例前循环动脉瘤患者为介入组,观察两组的临床效果.结果 手术组和介入组术后并发症发生率、死亡率和优良率比较差异无统计学意义(P＞0.05);手术组复发率低于介入组的复发率,但是两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);手术组住院时间明显长于介入组,两组比较差异有统计学有意义(P＜0.05).结论 临床中对于前循环动脉瘤患者给予开颅夹闭术与血管内介入术治疗均具有较好的应用效果,临床中可以依据医师操作的熟练度和患者的病情状况进行合理地选取.