Gi2／Gq蛋白在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达

目的 观察重症急性胰腺炎（severe acute panereatitis,SAP）大鼠胰腺组织Gi2和Gq蛋白表达量的改变,探讨在SAP发病过程中血小板活化因子（platelet activating factor,PAF）的细胞信号转导机制.方法 Wistar雄性大鼠60只,随机分为阴性对照组和SAP模型组（SAP组）.以5%牛磺胆酸钠逆行注入主胰管制成SAP模型,阴性对照组开腹后仅翻动十二指肠并触摸胰腺数次关腹.制模后于相应时相点处死动物,取血取组织,ELISA方法检测血浆PAF含量,Western印迹法检测胰腺组织Gi2/Cq蛋白质的动态变化.结果 SAP组Gi2和Gq蛋白表达量均较阴性对照组显著增加（P＜0.05）.结论 PAF可能通过Gi2和Gq蛋白,经cAMP-PKA和IP3-Ca2＋途径完成细胞信号转导,导致炎性反应延续并放大.     

肠安康对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织炎性因子表达的影响

肠安康胶囊由黄芪、黄连、金银花等药组成,具有健脾益气、清热燥湿、活血化瘀的功效,临床治疗溃疡性结肠炎（UC）有效。实验研究证明,该药对乙酸和三硝基苯磺酸（TNBS）导致的大鼠UC有显著的保护作用。本研究用肠安康胶囊治疗大鼠溃疡性结肠炎,观察其对于炎性细胞因子浓度的影响,了解肠安康胶囊的作用机制。     

缺血预处理抑制大鼠胰腺移植缺血再灌注胰腺细胞凋亡：活性氧与线粒体DNA修复酶的作用

背景：在胰腺移植过程中冷、热缺血均可导致移植胰腺缺血再灌注损伤,所导致的腺泡上皮细胞凋亡是造成移植胰功能不全的重要因素之一,缺血预处理是一种有效的内源性保护方式,其机制研究一直是器官移植的热点。 目的：观察缺血预处理（IPC）对大鼠胰腺缺血再灌注损伤时的细胞凋亡的影响,探讨线粒体DNA修复酶OGG1和氧化应激在其中的变化规律及可能机制。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-9/2009-4在武警医学院生理学与病理生理学教研室完成。 材料：健康雄性SD大鼠50只,其中20只为供体,10只为假手术组,另20只糖尿病造模后分为缺血再灌注组和缺血预处理组,每组10只。 方法：假手术组（Sham）只行开、关腹手术。缺血再灌注组（IR组）和缺血预处理组（IPC）行异位全胰十二指肠移植术。I/R组对应供体大鼠于获取供胰前以4℃ UW液灌洗20 min;IPC组对应供体大鼠于获取供胰前阻断腹主动脉5 min,再灌注5 min,共2次。供胰均控制热缺血时间为15 min,冷缺血（4℃ UW液中保存）时间为180 min。 主要观察指标：再灌注后12 h检测血浆淀粉酶、血糖浓度及Caspase-3,-9活化水平,流式细胞法检测腺泡细胞凋亡率,罗丹明123法检测线粒体膜电位,二氯荧光素法检测线粒体过氧化氢产生速率,高效液相色谱法检测线粒体DNA中8-oxodG含量,荧光定量PCR法检测OGG1 mRNA的表达,Western-blotting法检测细胞色素C释放、磷酸化Akt及线粒体OGG1蛋白表达水平。 结果：与IR组比较,IPC组线粒体膜电位、OGG1 mRNA、线粒体OGG1蛋白及磷酸化Akt蛋白表达均显著升高（18.75±2.09 vs 23.79±2.52,143.7±18.4 vs 268.1±20.3,35.29±7.86 vs66.81±8.90,58.5±6.1 vs189.4±19.5,均P<0.05）。血浆淀粉酶、血糖、线粒体过氧化氢产生速率、线粒体DNA8-oxodG含量、Caspase-3,-9活化水平、腺泡凋亡率及细胞色素C释放均显著降低（3972.40±275.43 vs 2546.95±214.78,12.3±1.6 vs 8.7±1.8,6.94±1.03 vs 4.40±0.72,0.0283±0.0057 vs 0.0190±0.0034,5.59±0.41 vs 2.65±0.37,4.80±0.15 vs 2.19±0.31,36.8±5.7 vs 22.3±3.2,100±0.0 vs 43.5±5.9,均P<0.05）。 结论：缺血预处理可降低线粒体氧化应激,提高Akt磷酸化水平,从而上调OGG1表达,减少线粒体DNA氧化损伤,抑制腺泡细胞凋亡,减轻移植胰缺血再灌注损伤。     

犬重症急性胰腺炎血浆内毒素和炎性介质的变化及血小板活化因子受体拮抗剂的干预

 目的动态观察重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)后血浆内毒素(Lipopplysaecharide,LPS)、血小板．拮化因子(PlaIelet-activating factor,PAF)、磷脂酶A2(Phospholipase A2,PIA2)和中性粒细胞弹性蛋白酶(Neutrophil elastase,NE)的变化,以及一种新型PAF受体拮抗剂-E 5880的干预效果。方法选健康杂种犬28只,体重10～15 kg,雌雄不限,随机分为5组：假手术组(n=5),SAP组(n=6),二甲亚砜(DMSO)组(n=5),SAP+E 5880预防组(n=6)和SAP+E 5880治疗组(n=6)。用5％牛磺胆酸钠混合液诱导SAP组,以0.9％NaCl磷酸盐缓冲液或DMSO取代5％牛磺胆酸钠混合液诱导假手术对照组和DMSO对照组。SAP+E 5880预防组在SAP诱导前30 min静推E 5880,剂量10 mg／kg。SAP+E 5880治疗组在SAP诱导后6h静推E 5880,剂量10 mg／kg,此后按5 mg／kg每12 h静推1次。结果SAP导致血浆LPS、PAF、PLA2、NE水平明显升高。预防或治疗性给予E 5880均可显著降低SAP后LPS、PAF、PEA2、NE水平,且血浆PAF水平的变化与血浆LPS、PLA2、NE水平呈显著正相关(P＜0.01)。结论SAP可引起LPS、PAF、PEA2、NE等炎性介质大量释放,而这些炎性介质正是介导SAP后全身性炎症反应甚至多器官功能损害的重要机制;预防或治疗性应用E 5880可明显降低血浆LPS、PAF、PLA2、NE水平,从而保护SAP后因这些炎性介质介导的胰腺外脏器损伤。     

银杏苦内酯B对重症急性胰腺炎大鼠血浆TNFα的影响

 目的 观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血浆中肿瘤坏死因子α(TNFα)的水平变化,探讨银杏苦内酯B(BN52021)对SAP的治疗作用.方法 选用Wistar大鼠45只,随机分成SAP模型组(SAP,n=15),BN52021治疗组(BN,n=15)和阴性对照组(NC,n=15).前两组以5%牛磺胆酸钠逆行注入主胰管制成SAP模型,制模15 min后,SAP组经股静脉以0.5 ml/100 mg注射生理盐水;BN组以BN52021(5 mg/kg)代替生理盐水静注;NC组仅做剖腹术.制模后1 h,6 h和12 h分别采血,应用ELISA技术测定血浆TNFα水平.结果 在1 h时相点,SAP组血浆TNFα水平(420.67±262.22 pg/ml)与BN组(403.88±177.92 pg/ml)、NC组(369.62±39.73 pg/ml)相比,均不具有显著性差异(P＞0.05);在6 h、12 h时相点,SAP组血浆TNFα水平(856.33±207.25 pg/ml,961.56±415.49 pg/ml)较NC组(369.14±16.28 pg/ml,416.43±26.54 pg/ml)明显升高(P＜0.05);BN组(415.15±88.08 pg/ml,692.06±69.31 pg/ml)较SAP组明显降低(P＜0.05).结论 实验证明SAP大鼠血浆TNFα水平明显升高,BN52021对SAP大鼠具有明显的治疗效果,使其血浆TNFα水平显著下降.     

急性胰腺炎促炎因子和抗炎因子变化的动态观察

目的：探讨促炎细胞因子和抗炎细胞因子在急性胰腺炎（AP）发病过程中动态变化的意义。方法：应用ELISA法检测48例病人血液中促炎细胞因子（TNFα、IL-1β、IL-6、IL-8）和抗炎细胞因子（IL-10、IL-1 ra)。结果：AP病人血液中促炎细胞因子和抗炎细胞因子在早期持续显著升高（与正常对照组相比P＜0.05),其后逐渐下降,并与临床症状变化的时相一致。结论：促炎细胞因子和抗炎细胞因子的动态变化可能对急性胰腺炎的发生发展具有重要作用。     

银杏苦内酯B治疗大鼠急性坏死性胰腺炎量效关系的实验研究

目的探讨银杏苦内酯B(BN52021)治疗大鼠ANP的最佳量效关系。方法70只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(SO组),ANP组,二甲基亚砜对照组(DMSO组),BN520212.5mg、5mg、10mg/kg体重治疗组(BN1、BN2、BN3组),善宁20μg/kg体重治疗组(SS组)共7组。胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备ANP模型。SO组、DMSO组和BN治疗组分别于术后15min股静脉注射等量生理盐水、0.5%DMSO和不同浓度的BN52021,SS组皮下注射善宁。各组分别于制模后6h取血检测血清淀粉酶和磷脂酶A2(PLA2)含量,记录腹水量,取胰腺组织行病理学检查和检测血小板活化因子受体(PAF-R)mRNA表达。结果ANP组和DMSO组血清淀粉酶、PLA2、腹水量、胰腺病理分值较SO组显著升高(P<0.05),各治疗组较ANP组显著降低(P<0.05),且BN2组血清淀粉酶、PLA2含量的降低又较BN1、BN3和SS组更显著(P<0.05)。ANP组胰腺组织PAF-RmRNA表达较SO组显著降低(P<0.05),各治疗组较ANP组显著升高(P<0.05),而各治疗组间无显著差异。结论静脉注射BN520215mg/kg体重治疗ANP大鼠具有最佳的量效关系。     

氧化苦参碱对脂多糖诱导的胰腺星状细胞NOD样受体蛋白3活化的影响

目的 研究氧化苦参碱（OM）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠胰腺星状细胞株（PSCs）NOD样受体蛋白3（NLRP3）活化的影响。方法 通过设置不同剂量（0、2.5、5、10、20、40 μg/mL）的LPS并设置相同剂量（10 μg/mL）的LPS刺激LTC14细胞不同时间（0、1、3、6、9、12 h）,利用Western blotting检测技术,考察LPS引起炎性小体活化的量效关系;使用OM、Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）抑制剂AG490干预LPS诱导的LTC14细胞株后,通过Westernblotting技术检测Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3（JAK2/STAT3）信号通路中相关分子以及NLRP3炎性小体相关蛋白表达的变化。结果 与对照组比较,LTC14细胞接受不同浓度的LPS刺激后JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1、白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白表达呈显著增高趋势;与对照组比较,LTC14细胞接受相同浓度LPS刺激不同时间后JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1、IL-1β蛋白表达呈显著增高趋势;与LPS组对比,OM和LPS共同处理组、AG490和LPS共同处理组JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1及IL-1β的蛋白表达显著降低。结论 LPS呈一定的时间-剂量关系激活LTC14细胞JAK2/STAT3信号通路及NLRP3炎性小体;OM可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路起到抑制NLRP3炎性小体活化的作用。     

银杏苦内脂B对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺组织NF-kB p65、IkBαmRNA表达的影响

目的观察NF—kBp65、IkBαmRNA在急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠胰腺组织中的表达以及银杏苦内脂B（BN52021）对其表达的影响。方法180只Wistar大鼠随机分为对照组（NC组）、ANP模型组（ANP组）、BN52021治疗组（BN组），每组大鼠分别在术后1h、2h、3h、6h、12h和24h6个时间点处死，抽血测定血淀粉酶含量，取胰腺组织行病理学检查，RT—PCR法检测NF—kB p65、IkBαmRNA表达。结果血清淀粉酶和病理学改变符合ANP。BN52021能降低ANP大鼠的血清淀粉酶含量和改善胰腺的病理损害。ANP组和BN组NF—kB p65mRNA均呈双峰改变，第1峰在1h，第2峰分别在24h和12h，6h时降至最低。ANP组NF—kB p65mRNA表达在2h、3h、12h和24h较NC组显著增加（P〈0．05或0．001），仅在1h时较BN组有显著差异（P〈0．041），其他时间点无显著差异；但较NC组各时点显著升高（P〈0．05或0．001）。ANP组IkBαmRNA表达仅在24h点较NC组明显增加（P=0．000），BN组在1h、6h和12h较ANP组显著增加（P〈0．01），在1h、12h和24h也较NC组显著增加（P〈0．01）。结论NF—kBp65mRNA在ANP大鼠胰腺组织表达上调，IkBαmRNA仅在造模后24h时表达上调。BN52021可能通过上调IkBαmRNA的表达，破坏NF-kBp65mRNA和IkBαmRNA的平衡，从而发挥其治疗作用。     

带膜镍钛记忆合金支架在胃镜直视下治疗食管狭窄的临床意义

【目的】回顾性分析带膜镍钛记忆合金支架在胃镜直视下治疗食管狭窄的疗效及并发症的防治。【方法】术前充分准备,术中行食管狭窄扩张术后,在胃镜直视下准确置入带膜镍钛记忆合金支架,术后观察其对吞咽困难的治疗效果及并发症的防治。【结果】87例患者均顺利置入带膜镍钛记忆合金支架,吞咽困难症状得到缓解或消失,近期疗效显著,也提高了患者的生存质量,并延长了生存时间;主要并发症为胸骨后疼痛和胃食管反流,无大出血和穿孔等严重并发症发生。【结论】带膜镍钛记忆合金支架在胃镜直视下治疗食管狭窄是安全有效的。