MMP2、TIMP2、bFGF在大鼠肺鳞癌癌变过程中的动态表达

目的 观察诱发大鼠肺鳞癌癌变过程中基质金属蛋白酶（MMP2）其及抑制剂（TIMP2）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)的动态表达和DNA指数（DI）的变化，探讨上述指标与肺癌发生发展及侵袭转移的关系。方法 用3－甲基胆蒽（3－methylcholanthrene,MCA)及二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN)在左肺叶支气管灌注诱发大鼠肺鳞状细胞癌。第15－270天分批处死动物，取左肺组织。应用免疫组织化学S－P法检测大鼠肺鳞癌癌变各阶段组织的MMP2、TIMP2、bFGF的蛋白表达，在Feulgen染色切片上测量DI值。结果 随大鼠肺鳞癌的发生发展，MMP2、bFGF的表达均逐渐增强，DI值也逐渐增高，但TIMP2的表达增强不明显。不典型增生、原位癌、早期浸润癌阶段，bFGF阳性系数差异有显著性（P＜0.05)，并且原位癌与有远处转移的浸润癌相比，bFGF蛋白表达有极显著性意义（P＜0.01)。原位癌与早期浸润癌相比MMP2表达（P＜0.05)，早期浸润癌与有远处转移的浸润癌之间MMP2表达（P＜0.05)。浸润癌与对照组相比TIMP2的表达（P＜0.01)。大鼠肺鳞癌癌变中TIMP2的表达与MMP2、bFGF的表达呈负相关（P＜0.05)。MMP2的表达与bFGF的表达呈正相关（P＜0.01)。MMP2和bFGF的表达与DNA异倍 体呈正相关（P＜0.01)，并且MMP2与大鼠肺鳞癌晚期发生转移相关。结论 新生血管形成是大鼠肺鳞癌发生发展的重要机制，基底膜（BM）的过度降解破坏是大鼠肺鳞癌侵袭转移的关键。bFGF与肿瘤血管生成、肿瘤的浸润扩散密切相关。MMPs/TIMPs之间的相互作用及平衡状态是恶性肿瘤侵袭转移分子生物学机制中的重要环节。     

一种可同时显示三种粘液的粘液套染法

目的 :探讨一种能在同一张切片中同时显示硫酸化酸性粘液、非硫酸化酸性粘液及中性粘液的粘液染色法。方法 :将高铁二胺 (HID)、爱先蓝 (AB)及过碘酸雪夫氏反应 (PAS)三种粘液染色法结合起来 ,按一定顺序 ,对14 7例胃粘膜肠化及胃癌标本中的粘液进行套染 ,并提出HID AB(pH2 .5 ) PAS粘液套染法。结果 :硫酸化粘液呈棕黑色 ,一般酸性粘液呈蓝色 ,中性粘液呈红色。在同一张切片中三种粘液颜色有明显反差 ,背景清晰。结论 :HID AB(pH2 .5 ) PAS粘液套染法是一种便捷、实用、值得推广的粘液染色法     

低氧及一氧化氮对SW480细胞缺氧诱导因子-1α、VEGF及iNOS 表达的初步研究

目的：观察一氧化氮(NO)对低氧培养的人结肠腺癌细胞株SW480中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法：运用免疫细胞化学检测HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白表达,Westernblot检测HIF-1α蛋白表达。原位杂交法检测HIF-1αmRNA表达。结果：免疫细胞化学染色图像分析结果显示：低氧组细胞HIF-1α、VEGF和iNOS蛋白表达水平显著高于常氧组(P<0.01,P<0.01,P<0.05)和低氧＋genistein（三羟基异黄酮）组（P<0.01,P<0.05,P<0.05）。低氧条件下,SNP（硝普钠）显著抑制HIF-1α、VEGF蛋白的表达,但对iNOS表达无明显影响;NOC5（NO发生剂）诱导HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白的表达;NO抑制剂L-NAME(N-硝基精氨酸甲酯)则抑制3者的表达。Westernblot结果显示：低氧培养条件下,HIF-1α呈强表达,给予genistein能显著抑制其表达;而给予SNP和L-NAME后,蛋白表达量减少,给予NOC5,则蛋白表达增强。原位杂交结果显示：常氧组、低氧组及低氧＋genistein组、低氧＋SNP组、低氧＋NOC5组、低氧＋L-NAME组HIF-1αmRNA表达A值组间均无显著差异。结论：低氧诱导SW480细胞HIF-1α蛋白表达量增高,从而上调VEGF和iNOS表达。低氧条件下,NO供体SNP抑制SW480细胞HIF-1α蛋白及VEGF表达,而另一种供体NOC5则促进HIF-1α表达,两种供体对HIF-1表达的影响可能存在不同的机制。     

自发性纵隔气肿并椎管内积气一例

患儿　男,２岁。１周前发热,Ｔ３９．５℃,第２天起咳嗽,痰少,无发热。因颈、胸部突发肿胀来诊。查体：患儿哭闹,颈、胸、左腋下肿胀,触诊有捻发感,双肺呼吸音减弱,未闻干湿性罗音。Ｘ线检查：胸部平片示左上纵隔、颈部、胸壁多发气肿,右肺上叶含气不全,中、下叶充气过度。ＣＴ检查：平扫见双侧胸壁软组织内,包括皮下、肌间隙弥漫性分布大量低密度气体影。纵隔内亦见大量低密度气体影充注纵隔各组织间,以胸腺旁为甚,张力高,压迫肺组织。右上肺、左肺均充气不良,右中下肺充气过度,密度减低,体积增大。各肺主支气管通畅,肺…     

干化学酶法检测阴道分泌物诊断阴道炎的价值

目的：评价干化学酶法检测阴道分泌物诊断阴道炎的价值。方法选择阴道分泌物标本978份,分别采用干化学酶法、常规镜检法进行检测,比较两种方法对阴道分泌物清洁度分级正确率,乳酸杆菌、念珠菌、滴虫及细菌性阴道炎（ BV）的检出符合率。结果干化学酶法对常规镜检清洁度Ⅰ～Ⅱ度和Ⅲ～Ⅳ度的分级正确率分别为63．1％、59．7％（χ^2＝5．83,P＜0．05）。相对于常规镜检法,干化学酶法对乳酸杆菌、念珠菌检出符合率分别为99．3％、96．3％（χ^2分别为3．60、0．45,P均＞0．05）,对滴虫检出符合率为97．1％（χ2＝25．14,P＜0．05）,对BV的检出符合率为99．8％（χ^2＝4．00,P＜0．05）。结论干化学酶法检测阴道分泌物五项指标具有较高的灵敏度,对妇科病筛查具有较好的应用价值。     

早期限饲对肉鸡脂质过氧化和抗氧化酶活性长期影响

目的：观察早期限饲（出雏后两周隔天饲喂）对肉鸡脂质过氧化作用和抗氧化酶活性产生的长期影响，并通过与后期限饲（屠宰前两周隔天饲喂）比较，观察不同阶段限饲对肉鸡血清、肝脏、胸肌、腓肠肌丙二醛浓度、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响。方法：实验主要于2005—04／12在南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室完成。实验分组：选取1日龄健康快三黄商品肉鸡100羽随机分为2组，对照组60羽，早期限饲组40羽。饲养至50日龄，从对照组随机选取20羽作为后期限饲组。实验处理：①早期限饲组，1-14日龄进行隔日限饲，以后自由采食。②后期限饲组，1～49日龄自由采食，50～63日龄进行隔日限饲。③对照组，全程自由采食。实验评估：记录每周体质量，检测14日龄对照组、早期限饲组，63日龄对照组、早期限饲组和后期限饲组血清、肝脏、胸肌、腓肠肌丙二醛浓度、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果：100羽实验动物均进入结果分析。①14日龄早期限饲组肉鸡血清、肝脏、胸肌和腓肠肌丙二醛浓度、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性与对照组相比差异无显著性。②63日龄时早期限饲组血清丙二醛浓度和谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著高于对照组（P〈0．05），肝脏超氧化物歧化酶活性显著低于对照组（P〈0．05）；后期限饲组血清丙二醛浓度以及超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著高于对照组（P〈0．05），而肝脏丙二醛浓度、胸肌超氧化物歧化酶活性显著低于对照组（P〈0．05），腓肠肌各项指标与对照组相比差异无显著性。后期限饲组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于早期限饲组（P〈0．05）。后期限饲组肝脏丙二醛浓度显著低于早期限饲组，超氧化物歧化酶活性显著高于早期限饲组（P〈0．05）。结论：早期及后期限饲均能增强63日龄肉鸡体内整体水平脂质过氧化作用和抗氧化酶活性，早期限饲对肉鸡脂质过氧化作用和血清抗氧化酶活性的即时影响表现不明显，但其影响可以持续到后期。     

47例软组织颗粒细胞瘤临床病理分析

目的回顾性分析47例软组织颗粒细胞瘤(GCT)的临床病理特征并行增殖活性检测。方法收集1975至2008年武汉大学附属医院病理科GCT存档资料47例,分析其临床及组织病理学特征并随访,应用免疫组化方法行S-100、CD68、NSE及Ki-67染色。结果 GCT好发于舌部,女性多见。镜下观察所有肿瘤由多边形瘤细胞组成,胞质中有丰富的嗜酸性颗粒,且S-100、CD68及NSE染色均为阳性。24例良性GCT呈膨胀性生长,其余20例良性及3例细胞不典型性病例均为侵袭性生长。少数肿瘤细胞Ki-67染色阳性。随访的30例中1例肿瘤细胞明显呈不典型性者复发并死亡,1例细胞典型性者复发后组织学呈不典型性,1例细胞典型性者复发两次后组织学呈恶性,27例无复发。结论大多数软组织GCT为良性,少数具有潜在恶性,应注意随访。少数肿瘤细胞Ki-67阳性提示该肿瘤具有较低的增殖活。     

非小细胞肺癌组织中Skp2的表达及其与p27kip1和Ki-67蛋白表达的关系

目的:探讨Skp2的表达在非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)发生发展中的作用,及其与p27kip1和Ki67蛋白表达的关系。方法:应用免疫组化SP法检测Skp2、p27kip1和Ki67三种蛋白在60例NSCLC和20例正常支气管黏膜上皮组织中的表达。结果:NSCLC组织中Skp2蛋白表达的阳性率为48.33%(29/60),显著高于正常支气管黏膜上皮组织中的表达,P=0.000。Skp2的表达与肿瘤的组织学类型、肿瘤细胞的分化程度、TNM分期、淋巴结转移和患者吸烟与否显著相关,P值分别为0.038、0.005、0.019、0.010和0.002,但与患者的年龄及性别无关,P值分别为0.833和0.281。NSCLC组织中Skp2表达与p27kip1表达呈显著负相关,P=0.001;而与Ki67表达呈显著正相关,P=0.027。结论:Skp2在NSCLC组织中表达是上调的,可能是通过作用于细胞周期调控蛋白p27kip1,加速了对p27kip1泛素化依赖的蛋白降解,使其表达及代谢发生异常,导致细胞周期失控并促进细胞异常增殖,从而参与了NSCLC的发生和发展。     

光叶番荔枝提取物抗肿瘤作用研究

目的：研究光叶番荔枝石油醚,氯仿和乙醇提取物对小鼠移植性内瘤S180和小鼠肝癌H22瘤体生长的抑制作用,方法：称取定量的光叶番荔枝提取物,用1％CMC－Na研磨配制成所需浓度的混悬液。将制备的肿瘤细胞液,以0．2mL/只的量接种于小鼠右前肢腋部皮下,24h后将已接种的小鼠随机分组。各组均连续给药7天,停药后1－3天将小鼠拉颈处死,剥取瘤块称重,计算抑瘤率。结果：光叶番荔枝石油醚,氯仿和惭醇提取物对小鼠移植性肉瘤S180和小鼠肝癌H22均有不同程度的抗肿瘤活性,其中以光叶番荔枝石油醚可溶部分和93％乙醇提取物抑瘤效果最好,其对小鼠移植性肉瘤S180和小鼠肝癌H22的抑瘤率分别可达51．4％和63．0％,结论：光叶番荔枝石油醚,氯仿和乙醇提取物具有较显著的抗肿瘤作用。