分泌性中耳炎中细胞因子的研究进展

分泌性中耳炎(Secretory otitis media,SOM)是临床常见的一种疾病,目前认为咽鼓管功能障碍、中耳局部感染、变态反应等为其主要病因.随着研究的进一步深入,发现细胞因子(cytokine,CK)与其密切相关,影响着疾病的发生、发展及转归.CK是主要由免疫细胞分泌的、能调节细胞功能的小分子多肽,在免疫应答过程中,细胞因子对于细胞间相互作用、细胞的生长和分化有重要调节作用.目前发现存在于SOM中的CK有白细胞介素(interleukin,IL)-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12和肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、转化生长因子(TGF)-β、粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF).本文就分泌性中耳炎中主要的细胞因子的研究进展作一综述.     

难治性变应性鼻炎手术治疗的进展

变应性鼻炎的患病率呈现逐年快速上升的趋势,鼻内镜外科手术成为治疗难治性变应性鼻炎的重要辅助手段。本文对治疗难治性变应性鼻炎的手术进展进行综述,综合分析与评价不同的手术方式,为难治性变应性鼻炎患者提供精准、安全、高效的治疗方案。     

EGCG对两株耐药肿瘤细胞的细胞毒增敏作用及抑瘤作用研究

目的:研究EGCG对人耐药肝癌细胞BEL7404/Adr和耐药口腔癌细胞KBV200的细胞毒增敏作用及对裸鼠移植瘤的抑瘤作用。方法:MTT法检测药物对体外培养细胞的毒性作用,采用BEL7404/ADR或KBV200细胞种植于裸鼠皮下,建立耐药肿瘤模型,观察用药后对裸鼠体重、抑瘤率、病理改变以及RTPCR和免疫组化法分别检测瘤组织mdr1和P糖蛋白的表达。结果:EGCG在100mg/L以下剂量对两株耐药肿瘤细胞的抑制率均小于10%,EGCG与抗肿瘤药物联合应用可明显提高抗肿瘤药物的细胞毒作用;体内与抗肿瘤药物联合应用对两种肿瘤抑瘤率明显高于单用抗肿瘤药物组,mdr1mRNA和Pgp的表达下降。结论:EGCG与抗肿瘤药物联合应用可增强化疗药物对耐药肿瘤细胞BEL7404/Adr和耐药口腔癌细胞KBV200的细胞毒作用,机制可能与降低MDR1mRNA表达、降低Pgp表达有关。     

薏苡仁提取物对鼻咽癌细胞作用的研究

目的探讨薏苡仁提取物对鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、TW03和C666—1细胞体外培养情况下的抑制作用。方法制备薏苡仁醇提和水提混合提取液,并在此基础上制备含药血清。在倒置显微镜下观察其作用于鼻咽癌细胞后细胞形态学的改变。运用MTT法检测药物提取物及含药血清抑制细胞增殖的情况。结果薏苡仁可抑制CNE1、CNE2、TWO3和C666-1细胞的增殖,其作用具有时间和浓度依赖性。结论薏苡仁提取物在体外实验中具有抗鼻咽癌细胞增殖的作用。     

60CO照射对豚鼠听力及耳蜗螺旋神经节细胞Caspase表达的影响

目的探讨60 CO照射后豚鼠听损伤及与耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cell,SGC)Caspase3、Caspase8、Caspase9表达的关系。方法选择白化豚鼠40只,随机分为对照组和放射组。对照组8只不实施60 CO照射行ABR检查后处死;放射组32只豚鼠右耳耳颞部一次性给予60 CO 70Gy照射,于照射后第1、4、7、14天行ABR检查后,每个时间点各处死8只豚鼠,行耳蜗中轴切片HE染色及免疫组织化学染色,观察SGC形态变化及Caspase3、Caspase8、Caspase9的表达。结果 HE染色显示放射组SGC出现萎缩改变,照射后第4、7、14天ABR反应阈分别为25.0±11.72、47.5±11.90、55.00±7.07dB nHL,与对照组(11.66±2.58dB nHL)比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。放射组SGC的Caspase 3、Caspase8、Caspase 9的阳性表达比对照组强,照射后第1、4、7、14天SGC的Caspase3平均光密度值分别为0.10±0.02、0.11±0.02、0.14±0.01、0.10±0.01,与对照组(0.07±0.01)比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。照射后第1天(0.12±0.01)、4天(0.23±0.04)、7天(0.11±0.01)、14天(0.21±0.03)SGC的Caspase8平均光密度值与对照组(0.05±0.02)比较差异均有显著统计学意义(P<0.01)。照射后第4、7、14天SGC的Caspase9平均光密度值分别为0.22±0.03、0.35±0.02、0.29±0.02,与对照组(0.12±0.01)比较差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论 60 CO照射导致豚鼠的听损伤可能与耳蜗SGC的萎缩有关,SGC的萎缩可能与Caspase 3、Caspase8、Caspase 9在SGC的表达上调有关。     

鼻咽癌中白细胞介素-10、白细胞介素-12检测及其意义

目的 检测鼻咽癌患者白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)及白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)浓度.方法 用酶联免疫法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测43例鼻咽癌患者血清IL-10及IL-12浓度,并用22例健康成年人血清作为对照.结果 鼻咽癌组IL-10浓度明显高于对照组,鼻咽癌组IL-12浓度明显低于对照组,IL-10浓度在晚期T分期组(T3/T4)明显高于早期T分期组(Ⅰ/Ⅱ)(P<0.01)、晚期临床分期组(Ⅲ/Ⅳ)明显高于早期临床分期组(Ⅰ/Ⅱ),但在不同性别、年龄组及有无淋巴结转移组浓度差异无统计学意义(P>0.05).而IL-12在晚期T分期组(T3/T4)明显低于早期T分期组(Ⅰ/Ⅱ)(P<0.01)、晚期临床分期组(Ⅲ/Ⅳ)明显低于早期临床分期组(Ⅰ/Ⅱ),但在不同性别、年龄组及有无淋巴结转移组浓度差异无统计学意义(P>0.05).且IL-10及IL-12浓度呈负相关关系.结论 鼻咽癌中高浓度的IL-10可能抑制IL-12的产生,帮助肿瘤细胞免疫逃避,损害机体肿瘤免疫,从而促进肿瘤发展.     

血管内皮生长因子C、D在鼻咽癌组织中的表达及其意义

目的：探讨血管内皮生长因子C、D（vascular endothelial growth factor C,D;VEGF-C,VEGF-D）在鼻咽癌中的表达及其意义。方法：采用免疫组化法和RT-PCR法检测57例鼻咽癌组织中VEGF-C及VEGF-D的表达,用RT-PCR的方法检测29例足够量同时提取RNA和制作蜡块的鼻咽癌组织中VEGF-C及VEGF—D表达。结果：鼻咽癌组织中,免疫组化检测VEGF—C、VEGF—D的阳性率分别为59．6％（34／57）、29．8％（17／57）,RT—PCR检测VEGF—C、VEGF-D的阳性率分别为89．6％（26／29）及65．5％（19／29）,VEGF-C的表达与鼻咽癌的分期鼻咽癌组织中,淋巴结转移组（N1-N3）、晚期T分期组（T3／T4）以及晚期临床分期组（Ⅲ／Ⅳ）的VEGF-C表达明显高于无淋巴结转移组（NO）、早期T分期组（T1／T2）或者早期临床分期组（Ⅰ／Ⅱ）（Pd0．05）,但是不同年龄、性别组表达无显著差异（P〉0．05）。而VEGF-D的表达在有无淋巴结转移,不同T分期、临床分期、年龄及性别组无明显差异。结论：在鼻咽癌中VEGF-C可能对肿瘤的淋巴转移及病情的发展起到促进作用。     

美金刚拮抗阿米卡星对豚鼠螺旋神经节细胞毒性的实验研究

目的通过圆窗龛局部给药,探讨美金刚对阿米卡星致豚鼠螺旋神经节细胞毒性的拮抗作用。方法将听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测结果小于40dBSPL的花色豚鼠共60只,随机分为4组,每组15只。Ⅰ组:空白对照组;Ⅱ组:单纯阿米卡星给药组(肌肉注射阿米卡星);Ⅲ组:人工外淋巴液(artificial perilymph,APL)+阿米卡星给药组(左耳圆窗龛注人APL60μl后,肌肉注射阿米卡星);IV组:美金刚+阿米卡星给药组(左耳圆窗龛注入溶于APL的美金刚5mg/ml,60μl后,肌肉注射阿米卡星)。阿米卡星注射量为400mg/kg/d,连续注射5天,停药14天后,每组动物行ABR阈值检测,将动物处死,取出每组动物左耳蜗。每组随机取6只通过免疫组织化学染色观察耳蜗螺旋神经节caspase3表达情况。剩下6只行原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay,TUNEL)法检测螺旋神经节细胞凋亡率。结果给药前,各组动物ABR阈值检测结果均小于40dBSPL。给药后,各组动物左耳ABR阈值结果为:Ⅰ组:37.08±3.34dB SPL,Ⅱ组:90.42±5.42dBSPL,Ⅲ组:91.17±5.37dB SPL,IV组:78.75±6.78dB SPL。免疫组织化学染色显示,Ⅱ组、Ⅲ组动物耳蜗螺旋神经节caspase3表达较Ⅰ组升高(P<0.01)。IV组动物耳蜗螺旋节caspase3表达较Ⅱ组、Ⅲ组降低(P<0.05),较Ⅰ组升高(P<0.01)。TUNEL法检测螺旋神经节细胞凋亡率:Ⅱ组、Ⅲ组动物耳蜗螺旋神经节细胞凋亡率较Ⅰ组明显升高(P<0.001)。IV组动物耳蜗螺旋神经节凋亡率较Ⅱ组、Ⅲ组降低(P<0.01),较Ⅰ组升高(P<0.001)。结论 (1)美金刚经圆窗龛局部给药后肌肉注射阿米卡星,豚鼠ABR阈值低于单纯肌肉注射阿米卡星ABR阈值。(2)美金刚经圆窗龛局部给药后肌肉注射阿米卡星,螺旋神经节caspase3表达较单纯肌肉注射阿米卡星减少。(3)美金刚经圆窗龛局部给药后肌肉注射阿米卡星,螺旋神经节凋亡较单纯肌肉注射阿米卡星减少。美金刚经圆窗龛给药对阿米卡星螺旋神经节细胞毒性有一定拮抗作用。     

大剂量60Co放疗后内耳形态学改变及Caspase3的表达

目的:探讨一次性大剂量To放疗后内耳的损伤及Caspase3的表达.方法:白化豚鼠55只,随机分为对照组和放疗组,对照组5只(10耳)为未进行放疗的正常豚鼠,放疗组50只,右耳为照射耳,于放疗后1、4、7、14、30 d处死(每个时问点10只).做耳蜗中轴切片HE染色及Caspase3免疫组织化学染色.在每个时间点分别取2只耳蜗做基底膜的扫描电镜.结果:放疗可引起内耳损伤.放疗组不同时间点螺旋神经节细胞Caspase3的光密度值与对照组比较差异均有显著性(P<0.01).放疗后第4、7天Corti器中Caspase3的光密度值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).放疗后第14、30天血管纹中的Caspase3的光密度值与对照耳比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:放疗可引起内耳的损伤,Caspase3在内耳的表达上调可能与细胞损伤有关.     

分泌性中耳炎咽鼓管功能动态观察的临床意义

目的探讨分泌性中耳炎的咽鼓管功能状态和原因及对治疗的意义.方法动态观察分泌性中耳炎51耳的咽鼓管功能.用鼻内窥镜检查咽鼓管咽口,根据咽鼓管功能状态行咽鼓管吹张术或扩张术以及局部用药治疗.结果51耳中咽鼓管功能异常36耳,正常15耳.正常组中咽鼓管咽口充血狭窄或肿胀裂缝状8耳,异常组咽鼓管咽口充血狭窄或肿胀裂缝状32耳,两者差别有显著性(P＜0.05),咽鼓管功能异常与咽鼓管咽口病变有关;咽鼓管吹张术或扩张术和局部用药对分泌性中耳炎有效.结论咽鼓管咽口病变影响咽鼓管的功能,咽鼓管功能检查对治疗分泌性中耳炎有指导作用.