实时荧光定量PCR检测原发性肝癌中CDK4基因的表达

目的：应用实时荧光定量PCR法检测原发性肝细胞癌中CDK4基因的表达。方法：提取手术切除人肝癌和癌旁组织总RNA并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织及癌旁组织中cDK4的表达水平。结果：20例肝细胞癌标本中有18例肿瘤组织中CDK4基因表达明显高于癌旁肝组织，其中7例高出4倍以上。结论：实时荧光定量PCR可以准确定量测定基因的表达；CDK4基因在肝细胞癌的发生、发展中可能起重要作用。     

转化生长因子β1在大鼠肝再生过程中表达变化的实验研究

本研究旨在通过建立大鼠肝再生模型 ,观察转化生长因子 β1(TGF β1)在整个肝再生过程中表达变化 ,为进一步研究其在肝再生过程中的生物学作用提供实验依据。材料与方法1.大鼠肝再生模型建立 :选取雄性S D大鼠 12 0只 (由第二军医大学实验动物中心提供 ) ,体重 2 0 0～ 2 5 0g ,随机分为两组 :肝切除手术组 (PH)和假手术对照组 (SO) ,每组按照术后 2 ,6 ,12 ,2 4 ,30 ,4 8,72 ,12 0 ,16 8和 2 4 0h不同时间点分为 10个亚组 ,每个亚组 6只大鼠 ,所有大鼠术前 12h禁食 ,6h禁饮 ,1%戊巴比妥钠 (用量 4 0mg/kg)腹腔注入麻醉大鼠 ,按照Pan…     

上臂复合组织缺损的显微外科修复

【摘要】目的探讨通过短缩肱骨将创伤后的上臂复合组织缺损简化为“组织断裂”进行再植修复的手术方法和疗效。方法对5例严重血管、神经、肌肉、肱骨等组织缺损的上肢复合性外伤患者,通过短缩、固定肱骨使组织缺损简化为“组织断裂”进行修复,对部分遗留创面行二期植皮修复。1例短缩并固定肱骨后肱动脉及伴行静脉仍有缺损者采用自体浅静脉桥接修复,余4例血管、神经均直接端端吻合。结果术后患肢均未发生血管危象,患肢及植皮全部存活。术后随访11～60个月,5例患者肘关节最大屈曲度110°,上臂屈伸肌力均达Ⅳ级以上,前臂及手部屈伸肌力均达Ⅲ＋级以上;根据《中华医学会手外科学会上肢断肢再植功能评定试用标准》,疗效优2例、良2例、差1例。结论通过短缩、固定肱骨后一期修复神经、血管等组织的方法治疗上臂复合组织缺损可简化手术程序,减少手术创伤,缩短手术时间,降低手术难度,最大程度缩短术后神经恢复时间及减少神经信息丢失,为肢体功能恢复创造良好条件。     

虫草活力素对大鼠慢性支气管哮喘模型气道重塑作用初探

目的对虫草活力素（简称虫草）在大鼠支气管哮喘（简称哮喘）模型气道重塑中的作用及相关机制进行初步探讨。方法 50只Wister大鼠[6～8周龄,（200±20）g],随机数字表法分为阴性对照组（A）、慢性哮喘单纯模型组（B）（卵清白蛋白系统致敏和反复激发）、慢性哮喘＋虫草50mg/kg治疗8周组（C）、慢性哮喘＋布地奈德（BUD）8周治疗组（D）及慢性哮喘＋BUD联合虫草8周治疗组（E）。肺组织切片HE染色观察病理变化并检测气道管壁厚度,采用免疫组织化学法检测气道转化生长因子β1（TGF-β1）表达水平,应用逆转录PCR法检测肺组织A2a腺苷受体（A2aAR）mRNA表达。数据统计采用ANOVA检验进行组间分析,Mann-Whitney检验进行组内两两比较,Spearman等级相关分析。结果①HE染色显示所有药物干预组较单纯模型组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及黏膜肺组织水肿等炎症表现明显减轻,以D和E组最为明显;②5组气道管壁厚度依次分别为（9.89±2.09）、（21.72±3.16）、（14.94±1.96）、（12.29±2.75）和（12.25±2.32）μm2/μm,F=31.37,P〈0.0001,所有药物干预组气道壁厚度均高于对照组（C组、D组和E组与A组比较后的P值分别为0.0001、0.0524、0.0524）,且低于单纯模型组（C组、D组和E组与B组比较后的P值均〈0.0001）,差异有统计学意义,C组气道壁较D组和E组增厚,差异有统计学意义（P值分别为0.0232和0.0147）;③5组TGF-β1表达强阳性率分别为（2.08±1.63）%、（29.37±5.08）%、（12.30±3.26）%、（10.78±3.35）%及（7.43±2.84）%,F=86.45,P〈0.0001,所有药物干预组TGF-β1蛋白表达均高于对照组（C组、D组和E组与A组比较后的P值均〈0.0001）,且低于单纯模型组（C组、D组和E组与B组比较后的P值均〈0.0001）,差异有统计学意义;E组较C组的蛋白表达有统计学意义下降（P=0.0052）;④5组肺组织A2aARmRNA表达相对强度依次为（0.35±0.06）、（0.27±0.10）、（0.52±0.07）、（0.24±0.05）及（0.47±0.08）,F=26.46,P〈0.0001,C组和E组A2aARmRNA表达高于A组（P值分别为0.0001及0.0007）、B组（P值分别为0.0002及0.0003）和D组（P值均〈0.0001）,差异有统计学意义,D组表达低于A组,差异有统计学意义（P=0.0003）;⑤所有大鼠支气管壁厚度与气道TGF-β1蛋白表达存在正相关（r=0.80,P〈0.01）,而C组大鼠肺组织A2aARmRNA表达和TGF-β1蛋白表达呈负相关（r=-0.68,P=0.03）。结论虫草对哮喘模型的气道重塑具有一定的改善作用,其机制可能通过增加慢性哮喘模型大鼠肺组织A2aARmRNA转录,抑制气道TGF-β1的生成,从而减轻气道重塑,且虫草与糖皮质激素联合应用对于降低TGF-β1的表达具有潜在协同作用。     

过表达miR-411对宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的 探讨过表达miR-411对宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制.方法 以正常宫颈上皮永生化细胞End1/E6E7为对照细胞,qRT-PCR检测宫颈癌Caski、SiHa和C-33A细胞miR-411表达.MTT法、Transwell小室及流式细胞术检测转染miR-411 mimics 48 h的SiHa细胞增殖...     

脑钠肽对呼吸困难的诊断价值

目的探讨血清脑钠肽（BNP）检测水平在呼吸困难鉴别诊断中的价值。方法选取在我科住院并且经过各种检查及治疗已经明确诊断的心源性呼吸困难患者52例和肺源性呼吸困难患者98例,分成两组并比较两组患者在呼吸困难发作时血清脑钠肽（BNP）的检测水平。结果心源性呼吸困难组患者的BNP值为（1235pg/ml±938pg／ml）、肺源性呼吸困难组患者的BNP值为（64pg／ml±48pg／ml）,两组BNP值水平比较有显著性差异（P〈0．01）。结论血清脑钠肽（BNP）检测水平对于心源性与肺源性呼吸困难的鉴别诊断中具有很高的价值。     

HCMV活动性感染与尿路上皮癌的相关性研究

目的分离和鉴定尿路上皮癌患者的肿瘤组织和抗凝血标本中人巨细胞病毒(HCMV),结合临床资料分析比较HCMV活动性感染与尿路上皮癌发生发展及其复发的相关性。方法采集33例经病理检测确诊为尿路上皮癌患者的组织和血标本,进行如下处理:分别采用细胞培养病毒分离法进行病毒分离;PCR法检测患者的抗凝血及组织DNA标本中HCMV UL55和UL83基因;IFA法检测抗凝血标本中HCMV pp65抗原;ELISA法检测HCMV IgG及IgM抗体;记录分析结果,确定尿路上皮癌患者HCMV活动性感染率。结果在33份抗凝血标本中,分离到1株临床分离株,该标本经盲传3代出现典型HCMV特征性细胞病变效应(CPE),经鉴定为HCMV。HCMV UL55和UL83基因、HCMV pp65抗原血症及HCMV IgM抗体检测均为阳性的有6份,因此可以判定在33例尿路上皮癌患者中,HCMV活动性感染者有6例,活动性感染率为18.2%(6/33)。结合患者的临床资料进一步分析发现,尿路上皮癌患者复发及病理分级均与HC-MV活动性感染相关,且HCMV活动性感染者其病理分级程度升高。结论结合临床资料分析发现,尿路上皮癌复发及病理分级程度升高均与HCMV活动性感染有关。     

三峡库区模拟生态环境和人为因素对血吸虫病流行的影响及防治对策研究

目的研究三峡成库后生态环境变化对血吸虫病流行的影响,为制定防治方案提供科学依据.方法在三峡库区中段和尾端160 m和180 m水位高程,模拟成库后灌溉区和淤积区类似条件,投放湖北肋壳钉螺和四川光壳钉螺,观察其生长繁殖1年;用间接凝血试验(IHA)抽样筛查来往于疫区流动人群中潜在传染源,粪便检查血吸虫卵;了解耕牛等生畜引进情况;调查重庆市历史疫情报告和当地医院诊断的血吸虫病病例;调查影响钉螺输入的因素.结果肋壳钉螺和光壳钉螺成活率仅少数月份在50%以下,多数月份在80%左右,各实验区发现钉螺交配数量较少,相对以3-6月为多,同时发现活幼螺;来往疫区流动人员血清抗体检查157人,未发现阳性,发现1例正在治疗的病例(血清抗体和病原学检查阴性);1989-2003年,发现有记载的输入性血吸虫病例9例;血吸虫病区有大量造纸原料和花草树木进入库区.结论三峡成库后,生态环境发生变化,存在血吸虫病流行的潜在性危险.