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目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,优化目的产物表达条件并对表达产物免疫原性进行鉴定。方法:采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL21-OmpLl/2融合基因,并用常规基因工程方法建立其原核表达系统。采用SDS—PAGE及Bio—Rad凝胶图象分析系统,检测目的重组蛋白rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2表达量。采用免疫双扩散试验及WesternBlot,鉴定rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2的免疫原性。结果:获得了序列正确的lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统E.coli BL21DE3^pET42a-lipL32/1-lipL21-ompL1/2。表达条件优化后的rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2产量为37.78mg/L,是优化前的3.7倍。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2兔抗血清免疫双扩效价为1:4。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2抗血清能识别rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2以及rLipL32/1、rLipL21、rOmpL1/2。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2能与问号钩体56601株全菌兔抗血清以及黄疸出血群、流感伤寒群、波摩那群、秋季群问号钩体感染患者血清出现阳性杂交信号。结论:成功地构建了lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,表达产物具有良好的抗原性和交叉免疫反应性,可作为研制通用型问号钩体基因工程疫苗及通用型钩体病血清学检测的抗原。 相似文献
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目的观察自拟狼疮方辅助强化免疫调节方案治疗狼疮性肾炎疗效及对肾功能、凝血功能指标的影响。方法狼疮性肾炎患者100例以随机数字表法分为对照组与观察组,分别给予强化免疫调节方案单用和在此基础上加用自拟狼疮方辅助治疗,比较两组患者临床疗效,治疗前后主要证候积分、24 h尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、免疫球蛋白G(Ig G)、补体C3、补体C4、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)及抗双链DNA(ds-DNA)水平。结果观察组患者临床治疗总有效率为94.00%,显著高于对照组的72.00%(P0.05);两组治疗后面部或指趾红斑、五心烦热、腰膝酸软、眩晕耳鸣、自汗或盗汗及水肿积分均显著低于治疗前,观察组均低于对照组(P0.05);两组治疗后24 h尿蛋白定量、BUN及Scr水平均显著低于治疗前,观察组均低于对照组(P0.05);两组治疗后Ig G、补体C3及补体C4水平均显著改善,观察组改善程度大于对照组(P0.05);两组治疗FIB、D-D及ds-DNA水平均显著低于治疗前,观察组均低于对照组(P0.05)。结论自拟狼疮方辅助强化免疫调节方案治疗狼疮性肾炎可有效缓解临床症状体征,改善肾脏功能,调节免疫相关指标,减轻血液粘稠状态,并有助于下调ds-DNA水平。 相似文献
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目的 获取中国男性健康膝关节的解剖参数范围,并验证健康膝关节统计学形状模型(statistical shape model, SSM)在几何外形上的有效性,为基于膝关节SSM的假体设计提供依据。方法 采集112例健康男性膝关节CT影像,建立三维膝关节模型,每例模型都单独作为目标模型,剩余模型作为训练集进行主成分分析(principal component analysis, PCA),将得到的SSM向着目标模型进行拟合预测,得到SSM拟合模型。在样本模型和SSM拟合模型上分别标记出相同的解剖测量点,并得出17个线性参数和3个角度参数。对解剖参数值采用独立样本t检验和Mann-Whitney U检验进行统计学检验,若得出的P值均大于0.05,则证明SSM在几何外形上的有效性。结果 解剖参数的定性和定量对比分析的结果显示,线性参数值的平均偏差均小于6 mm,角度参数值均小于2.5°;统计学检验的结果显示所有解剖参数的P>0.05,证明膝关节SSM拟合模型与真实健康模型在几何外形上不具有统计学差异。结论 获得了健康膝关节解剖参数的参考范围,并验证了膝关节SSM模型在外形上与真实健康模型... 相似文献
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自经典的Bassini疝修补术创立至今的一百余年中,腹股沟疝手术的修补方法及材料均有很大的进展及变化。但是文献关于这一常规手术中未能找到疝囊的处理方法报道较少,本次研究拟就术中疝囊寻找困难时有关的临床策略作一探讨。 相似文献
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目的:基于儿童膝关节MRI图像建立正常膝关节三维实体模型和球囊完全撑开膝关节的三维有限元模型,采用有限元法分析两种球囊撑开器(分开设计/一体化设计)对膝关节的生物力学影响。方法:使用医学建模软件建立儿童膝关节有限元模型,模拟儿童膝关节镜手术过程。建立两种球囊撑开器模型,对球囊模型施加不同的压力,探究分开设计时3种不同形状球囊和一体化设计时不同短轴尺寸球囊与膝关节软骨相互作用的应力分布情况,获得撑开方式的最优设计。结果:当撑开器与膝关节镜分开设计时,球状球囊对软骨的峰值应力影响较小;当撑开器一体化设计时,短半轴3.0 mm逐渐增大尺寸,环状球囊的应力峰值变化较小且软骨上的应力峰值较小,环状球囊短半轴取3.0 mm是一种较优的尺寸。结论:球囊撑开器可以有效撑开一定的膝关节间隙,撑开器一体化设计相比分开设计在术中对膝关节影响较小。本研究为球囊撑开器中球囊几何结构的设计提供理论依据,提高了半月板手术治疗的安全性。 相似文献
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问号钩端螺旋体病人血清中LipL21抗体检测 总被引:1,自引:0,他引:1
寻找钩体属特异性保护抗原,对于研制通用型钩体疫苗及实验室诊断试剂盒均有重要价值。Cullen等首先报告了致病性问号钩体均具有属特异性lipL21脂蛋白基因。我们也曾证实我国15群15型问号钩体参考标准株均含有序列保守的lipL21基因。已知钩体病免疫保护作用主要依赖血清抗体为主的体液免疫。我们采用显微镜凝集试验(MAT)检测了156份钩体病人血清的凝集效价,并建立rLipL21-IgM/IgG-ELISAs对血清标本中LipL21的IgG和IgM型抗体进行了检测。 相似文献
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目的观察蔷薇科植物果核油性提取物初提液和提纯液体外抗病原真菌和细菌的作用.方法以二性霉素B、阿莫西林、庆大霉素为对照,分别采用二倍平皿稀释法和试管法测定油性提取物初提液和提纯液对假丝酵母菌、毛癣菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌临床菌株的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC).结果初提液和提纯液对79株假丝酵母菌菌株的MIC90分别为1.25%和2.5%(V/V)、对34株毛癣菌的MIC90分别为0.62%~1.25%和1.25%~2.5%(V/V).初提液和提纯液对38株金黄色葡萄球菌、20株大肠埃希菌的MIC90均分别为0.31%和0.62%(V/V).0.31%初提液作用15min、0.62%提纯液作用30min可杀灭白假丝酵母菌7374株和红色毛癣菌6180株.0.16%初提液作用5min、0.31%提纯液作用15min可杀灭金黄色葡萄球菌ATCC25923株和大肠埃希菌ATCC25922株.结论较低浓度的蔷薇科植物果核油性提取物初提液和提纯液即有体外抑制和杀灭常见皮肤和粘膜感染病原真菌和细菌的作用,具有成为高效外用消杀剂的前景. 相似文献