小鼠可溶性ST2基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的:克隆小鼠可溶性ST2基因并构建其真核表达载体。方法:从小鼠肥大细胞株P815中提取总RNA,逆转录为cDNA,用热启动PCR技术,扩增小鼠可溶性ST2基因全长编码区,经双酶切后,克隆入pcDNA3.1载体中,构建真核表达载体pcDNA3.1-mST2,然后进行酶切鉴定和序列分析。结果:小鼠可溶性ST2基因的PCR产物和重组载体经凝胶电泳和酶切鉴定、测序分析证实,其序列与GenBank中数据一致。小鼠可溶性ST2基因的全长编码序列为1 011 bp,编码336个氨基酸。结论:用热启动PCR技术能方便、准确地获得目的基因片段。成功地克隆小鼠可溶性ST2基因并构建了其真核表达载体,为进一步进行小鼠可溶性ST2蛋白的表达和功能研究奠定了基础。     

Toll样受体2配体对刀豆蛋白A诱导小鼠肝脏损伤的保护作用

目的：研究Toll样受体2配体（Pam3CSK4）对刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠免疫性肝损伤的干预效果及机制。方法：尾静脉注射ConA（15mg／kg）诱导小鼠肝损伤模型,在ConA注射前24h腹腔注射Pam3CSK4。检测血清谷丙转氨酶（ALT）和γ-干扰素水平,并观察肝组织的病理改变。结果：与ConA模型组比,PamCSK4预处理组血清ALT水平明显降低（P〈0．01）,肝脏病理损伤明显减轻,血清γ-干扰素水平明显下降（P〈0．01）。结论：Pam3CSK4对ConA诱导小鼠肝损伤具有保护作用,该作用可能与γ-干扰素水平的下调有关。     

醛同酮和血管紧张素-Ⅱ在肝硬化腹水患者血清中变化的探讨

目的探讨慢性肝病患者肾素-血管紧张素-醛固酮系统的变化及其与腹水形成的关系。方法53例乙型肝炎患者中,慢性肝炎中度32例,肝硬化代偿期10例,肝硬化伴腹水11例,分别检测血清血管紧张素-Ⅱ（AT-Ⅱ）和醛固酮含量。结果慢性肝炎中度、肝硬化代偿期和肝硬化伴腹水患者血清AT-Ⅱ分别为（53．2±21．3）pg／ml,（50．9±12．3）pg／ml,（276．5±247．6）pg／ml;血清醛固酮分别为（246．2±93．7）pg／ml,（271．3±61．3）pg／ml,（567．5±71．2）pg／ml。结论慢性肝炎和肝硬化患者血浆AT-Ⅱ和醛固酮均见升高,但以肝硬化伴腹水患者为显著,AT-Ⅱ和醛固酮与腹水的形成有关。     

三联疗法治疗慢性荨麻疹

荨麻疹是由皮肤黏膜小血管扩张及渗透性增加而引起的局限性风疹块。病因复杂，大多数患者找不到病因，临床上单用一种抗组胺药难以达到临床疗效。我科．2000年3月～2002年3月应用西替利嗪片（商品名：雪町，天心堂药业有限公司生产）、雷尼替丁片及卡介苗多糖核酸（商品名：斯奇康注射液，长沙九芝堂生物制药有限公司生产）治疗慢性荨麻疹60例，总有效率为96．6％，现总结如下：     

人IL-32β基因的克隆和序列分析

目的克隆人IL-32β基因编码区并对其序列进行分析。方法人外周血单个核细胞经PHA-P刺激12小时后,提取总RNA,用RT-PCR扩增IL-32β基因并将目的基因克隆至pGEM-Teasy载体,转化E.coliJM109后,用菌落PCR筛选阳性克隆并进行双酶切鉴定和序列测定。结果构建的重组载体中含有人IL-32β基因的全长序列,与NCBI公布的序列一致。结论获得IL-32β基因的cDNA,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。     

提高医学免疫学实验教学效果的几点体会

实验教学是基础医学教学过程中的一个重要环节,是基本理论与实践技能、抽象思维与感性认识相结合的过程,在人才培养中,具有其他教学环节所不可替代的作用。医学免疫学是生命医学的前沿学科之一,是医学科学的重要基础课,作为一门实践性和应用性很强的学科,目前医学学科的各个领域都在广泛应用免疫学的实验方法和技术。医学生了解和掌握免疫学常用技术对其今后从事临床及科研工作极为重要。     

蛇毒抗栓酶治疗脑血栓74例临床观察

<正> 蛇毒抗栓酶为中国医科大学研制成功,1984年用于临床,1986年我科引进这一治疗技术,使我地区脑血栓治愈率显著提高,现将治疗体会介绍如下: 临床资料一、临床用药应用蛇毒抗栓酶(简称蛇毒组)和低分子右旋醣酐加维脑路通(简称低右组)对照方法。     

B16黑色素瘤皮内移植瘤模型的建立

背景与目的： 建立B16黑色素瘤细胞(简称B16细胞)皮内移植瘤模型。 材料与方法： 制备商品源B16细胞悬液,按每只C57BL鼠接种0.1 ml (3×105个)B16细胞于后肢外侧皮内;分离、培养移植瘤源B16细胞,倒置显微镜下观察细胞形态。 结果： 移植瘤出现时间为(9.6±1.2)d,致瘤率为100％;皮内注射B16细胞18 d内,肿瘤形态呈圆形或类圆形,边缘清楚;移植瘤源原代B16细胞多为圆形、类圆形或短梭形,商品源B16细胞为梭形或不规则形;HE染色表明移植瘤内有大量B16细胞。 结论： B16细胞皮内移植瘤模型易于对肿瘤生长的观察和测量,是早、中期肿瘤研究的合适模型之一。     

志贺氏菌常见菌单克隆抗体的制备和应用

本文利用杂交瘤技术,参照现抗原表,建立了一组能稳定分泌抗志贺氏菌常见菌型的单克隆抗体杂交瘤细胞系共42株,从中选用了包括抗福氏菌群全部型和群抗原抗志贺氏菌Ⅰ、Ⅱ型及宋内氏菌的单克隆抗体细胞系19株。用这组单克隆抗体组成的小套试剂盒,经以实验室标准菌种及4个省市地方菌种验证。结果表明完全可以代替传统的诊断血清,用于志贺氏菌的检验。另外表明,抗福氏志贺氏菌型群抗原的单克隆抗体还可进一步用于该菌抗原关系的分析。