利用CRISPER/Cas9技术构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠

目的：通过 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑技术构建卵磷脂胆固醇脂酰转移酶（lecithin-cholesterol acyltransferase， LCAT）基因敲入C57BL/6小鼠并与肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠配繁得到肝脏特异性敲入Lcat基因C57BL/6小鼠模型。 为Lcat基因在肝脏相关代谢疾病发生机制的研究提供动物模型。方法：利用CRISPR/Cas9技术构建Lcat基因敲入小鼠；利用肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠与Lcat基因敲入小鼠交配得到肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠；通过PCR法鉴定小鼠的基因型 ；利用实时荧光定量 PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）和 Western blot 技术验证 Lcat 基因的 mRNA 水平和蛋白水平。 结果：PCR结果显示肝脏特异性敲入Lcat基因的小鼠模型构建成功；qPCR结果显示Lcat基因在肝脏中特异性高表达；WB结果显示，与对照组小鼠相比，LCAT蛋白在肝脏特异性敲入Lcat的小鼠肝脏中有明显更高的表达。结论：成功构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠，为在动物水平探索Lcat基因在肝脏相关代谢疾病中的功能及相关发病机制提供研究平台。     

核糖核苷酸还原酶M2在小脑髓母细胞瘤中的功能及机制

目的：探讨核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在小脑髓母细胞瘤中的功能和机制。方法：分析GEO数据库中髓母细胞瘤患者的生存和RRM2表达水平的关系。通过免疫组化并结合数据库分析RRM2在小脑髓母细胞瘤和正常小脑组织中的表达。分别通过CCK-8细胞增殖实验、Transwell实验、流式细胞术检测RRM2对小脑髓母细胞瘤细胞系Daoy和D283的增殖、迁移、细胞周期和凋亡的调控作用。通过转录组测序(RNA-seq)探索下游分子机制。采用配对t检验和独立样本t检验进行统计学分析。结果：通过GEO数据库分析发现高表达RRM2的髓母细胞瘤患者相较于低表达组的总生存期更短、预后更差(P<0.05)。免疫组化及数据库分析结果显示RRM2在小脑髓母细胞瘤中的表达明显高于正常小脑组织(P<0.05)。与对照组比较，CCK-8细胞增殖实验、Transwell实验提示过表达RRM2促进肿瘤细胞增殖和迁移(P<0.05)，敲低RRM2减少肿瘤细胞增殖和迁移(P<0.05)；过表达RRM2能够明显增加S期的细胞比例(P<0.05)，且明显减少细胞凋亡(P<0.05)。RNA-se...     

海军某批亚丁湾护航舰艇官兵人格特征及应对方式的相关分析

目的 探讨某批亚丁湾护航舰艇官兵的人格特征和应对方式的相关性。方法 2021年6月采用艾森克人格问卷简式量表中国版（Eysenck personality questionnaire-r short scale Chinese,EPQ-RSC）和应对方式评定量表（coping style questionnaire,CSQ）对刚参加完某批亚丁湾护航任务的某驱逐舰上的157名舰艇官兵进行问卷调查，并对数据进行分析。结果 应对方式各因子中，舰艇官兵解决问题和求助得分显著高于中国军人常模，自责、幻想、退避和合理化因子得分显著低于中国军人常模（均P<0.01）。人格特征中神经质维度与应对方式各维度得分两两显著相关，外-内倾维度与应对方式中解决问题、求助、自责维度得分两两相关，精神质维度与应对方式中解决问题、求助维度得分两两显著相关，掩饰维度与应对方式中自责、幻想、退避、合理化维度得分两两相关（均P<0.05）。回归分析结果显示，舰艇官兵人格特征是其应对方式的重要影响因素。官兵精神质水平正向显著预测合理化应对（β=18.050,P<0.01），外-内倾水平正向预测解决问题应对（...