谈血液透析内瘘穿刺的体会

<正> 几年来,随着医学的不断发展,使血液透析这门科学也在原有基础上得以发展。由当初主要治疗尿毒症,很快又扩大到其它的领域。 血液透析疗法尽管优点很多,但在平时工作中能否正确掌握好这门技术,也是非常重要的。血液透析效果的好坏,透析时间的长短,其关键之一就是透析中血液通路,也称血管通路,即血液引出来,进入体外循     

采用二氧化硅微球法回收DNA的实验研究

目的：探讨一种以二氧化硅微球为载体从琼脂糖凝胶中高效回收DNA片段的方法。方法：用3mol/L NaI溶胶液将琼脂糖凝胶溶解后与一定量的二氧化硅微球一起孵育，充分洗涤干燥后以双蒸水洗脱DNA，通过凝胶成像系统计算DNA回收率。结果：①用二氧化硅微球从凝胶中回收DNA时溶胶液的pH值对回收效率影响最大，最佳pH值为5．0-5．5；二氧化硅微球大小、用量、溶胶液的浓度、洗液的浓度及酸碱度也会对回收效率产生影响。②DNA片段大小也可影响回收效率，500bp以上片段的回收效率在80％以上，而500bp以下则为50％～70％。结论：以二氧化硅微球为载体可以简便、高效、快速地从琼脂糖凝胶中回收目的DNA片段。     

绞股蓝总皂苷及其不同提取物对实验性高血压大鼠的降压作用

目的 研究绞股蓝总皂苷和绞股蓝不同提取物对大鼠血压的影响。方法 将大鼠分为9组,除空白对照组外,高血压模型组、绞股蓝总皂苷对照组、绞股蓝总皂苷干预组(绞股蓝总皂苷180 mg/kg、 360 mg/kg、720 mg/kg,低、中、高剂量组)、总提取物组、乙酸乙酯提取物组和正丁醇提取物组的大鼠均被喂养高脂高糖饲料和饮用糖盐水(糖4%、盐1%)和果糖水(6%)。绞股蓝总皂苷对照组、绞股蓝总皂苷干预组、总提取物组、乙酸乙酯提取物组和正丁醇提取物组的大鼠均给予相应剂量的药物灌胃。给药8周后处死大鼠,测定大鼠血清中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果 与空白对照组相比,高糖高脂饮食能明显使大鼠血压的增高[收缩压增高(34.9±9.8)%,舒张压增高(17.9±8.5)%],差异有统计学意义(P<0.05)。与高血压模型组相比,绞股蓝总皂苷对照组收缩压降低(39.7±6.9)%、舒张压降低(36.7±7.3)%,血压显著性降低(P<0.05)。与空白对照组相比,绞股蓝总皂苷对照组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组收缩压、舒张压相差不大(P>0.0...     

非典型腺细胞在宫颈细胞学筛查中的应用价值

通过分析宫颈细胞学筛查试验中非典型腺细胞(AGC)病例的组织学结果,讨论AGC诊断的临床应用价值及管理方法。对我院2015年1—6月宫颈细胞学筛查试验中报告为AGC的病例中实施宫颈多点活组织检查、子宫颈电热圈环切术（loop electrosurgical excision procedure,LEEP）、宫颈锥切、宫颈搔刮、分段诊刮、子宫全切术后等组织学结果进行统计分析。我院2015年1—6月宫颈细胞学筛查试验中诊断为AGC病例共108例,92例有组织学检查结果,16例失访。以组织学检查结果报告为上皮非典型增生及以上病变作为阳性结果进行归纳分类。35例组织学检查结果阴性,其中慢性宫颈炎17例,子宫内膜炎4例,宫颈息肉5例,子宫内膜息肉3例,子宫内膜增生6例。57例组织学检查结果阳性,其中宫颈上皮内瘤样变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）12例（CINⅠ4例,CINⅡ～Ⅲ 8例且3例累及腺体）,宫颈鳞状细胞癌1例,宫颈腺上皮内瘤样病变（cervical glandular intraepithelial neoplasia,CGIN）7例,子宫内膜癌17例,宫颈腺癌13例,卵巢腺癌5例和输卵管腺癌2例。AGC与多种癌及癌前病变密切相关,有重要的临床诊断价值。提示对于宫颈细胞学筛查报告为AGC的患者进行定期追踪随访和规范的临床诊疗是非常必要的。     

SCL基因在白血病和正常骨髓基质细胞中的表达

目的初步了解干细胞白血病(SCL)基因在白血病和正常骨髓基质细胞中的表达情况.方法通过长期体外培养扩增骨髓基质细胞,运用RT-PCR-ELISA检测SCL基因的表达.结果 SCL表达于绝大多数CML、AML、CLL患者骨髓基质细胞中,部分正常骨髓基质细胞也表达SCL基因.结论 SCL可能与白血病和正常的骨髓基质细胞的造血调控作用有关.     

MUC1/Y胞外段在大肠杆菌中的表达和鉴定

目的：获得MUC1／Y胞外段重组蛋白，研究其生物学功能，为肿瘤治疗提供实验依据。方法：利用RT—PCR从MCF7细胞中获得MUC1／Y胞外段编码基因，将其克隆到原核表达载体pET-32a中，并在BL21（DE3）大肠杆菌中进行表达；以亲和层析法对MUC1／Y重组蛋白进行纯化；利用纯化的MUC1／Y蛋白免疫家兔制备MUC1／Y多克隆抗体，然后对乳腺癌组织进行组化染色。结果：在大肠杆菌BL21（DE3）中成功表达了分子量为30000的Trx—MUC1／Y融合蛋白，经镍亲和层析一步纯化所获得的蛋白质纯度〉90％，用Trx-MUC1／Y融合蛋白免疫家兔获得的抗血清对乳腺癌组织的初步组化检测证明MUC1／Y融合蛋白具有很好的生物学活性。结论：成功表达并纯化了具有生物学活性的MUC1／Y胞外段重组蛋白。     

脂质体介导哺乳动物细胞转染的改良方法

目的：提高脂质体介导的细胞转染效率.方法：在传统的脂质体生化转染过程中,介入了简单的物理转染技术,并应用有限稀释克隆技术和共聚焦荧光显微镜检测技术,对转染细胞进行了早期克隆筛选,用流式细胞术对转染细胞表达GFP的阳性率进行检测.结果：流式细胞术检测显示,通过改良法获得转染pcDNA3-GFP-PSA质粒的B16、RM1和EL4细胞,表达报告蛋白GFP的阳性百分率（26%、24%和40%）高于传统法转染的细胞（16%、16%和18%）.改良法转染的B16、RM1和EL4经过克隆筛选、液氮冻存、水浴复苏和体外连续培养2周后,外源基因报告蛋白GFP表达的阳性百分率分别为77%、69%和83%.在转染流程上,通过改良法获得单克隆转染细胞株的时间明显缩短.结论：改良的脂质体转染方法结合细胞克隆技术,能在最短时间内获得高表达外源基因的转染细胞株.     

慢性粒细胞白血病病人TCRζ链表达特点

目的： 建立实时定量PCR方法检测TCRζ链表达水平的方法，了解慢性粒细胞白血病（CML）外周血TCRζ链表达水平。方法: 采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR，相对定量检测30例CML患者和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRζ链表达情况，以β2微球蛋白基因（β2M）作为内参，根据相对定量公式：2-△△Ct计算CML病人与正常人TCRζ链表达差异倍数。结果: 成功建立SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR检测TCRζ链表达检测技术。18例CML患者TCRζ链出现表达低于正常人，而12例CML患者TCRζ链出现表达高于正常人。结论: CML病人中TCRζ链表达水平可分为表达下调（60%）和表达上调(40%)2组，提示部分CML病人的细胞免疫缺陷可能与其TCRζ链表达下调有关。     

小儿重症肌无力血清乙酰胆碱受体抗体的测定及其临床意义

为研究小儿重症肌无力(MG)血清乙酰胆碱受体抗体(AchRab)的含量改变及其临床意义。采用固相酶联免疫吸附法检测血清AchRab的含量。结果MG患儿血清AchRab阳性率为81%,明显高于健康对照组和非MG病人组(P<0.01)。MG患儿治疗后血清AchRab的含量明显低于治疗前,其阳性率分别为55%和81%(P<0.05)。结果提示AchRab的测定可作为MG患儿早期诊断和疗效观察的指标。     

Er∶YAG激光对牙体硬组织切割效率及表面形态的影响

目的 观察Er∶YAG激光不同频率和照射时间对牙体硬组织切割效率和表面形态的影响.方法 80个牙釉质样本和80个牙本质样本分别按照射时间10s和20 s,使用随机数字表法分为两组(n=40),每组再分为5个亚组(n=8),分别用频率为10、15、20、25、30 Hz Er∶ YAG激光对每个样本进行照射,体视显微镜测量牙釉质和牙本质凹坑直径、深度,扫描电镜观察牙釉质和牙本质表面形态.结果 Er∶ YAG激光频率10～20 Hz、照射时间10s及20 s时,牙釉质和牙本质凹坑的直径、深度随频率增加和照射时间延长而增加(P＜0.05);Er∶ YAG激光频率25 ～30 Hz、照射时间10s及20 s时,牙釉质和牙本质凹坑的直径、深度随频率增加和照射时间延长出现缓慢增加的趋势(P＞0.05).扫描电镜下观察,牙釉质和牙本质表面形态发生了一定的变化,Er∶ YAG激光频率为25 ～30 Hz时,牙釉质和牙本质表面出现裂纹、熔融等热损伤现象.结论 Er∶ YAG激光适宜的频率和照射时间不仅可以获得牙体硬组织良好的切割效率,而且不会引起牙体硬组织表面形态热损伤.