LightCycler实时荧光定量PCR不同计算模式对检测结果的影响

实时荧光定量聚合酶链反应 (ｆｌｕｏｒｓｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ＦＱ ＰＣＲ)融基因扩增、分子杂交和光化学技术为一体 ,在单管封闭的条件下 ,实现了对ＰＣＲ扩增产物的实时动态检测和自动结果分析 ,从根本上解决了ＰＣＲ扩增产物的污染和不能定量的问题 ,并通过探针杂交进一步提高了特异性[1] 。但由于仪器在软件设计上的不同要求 ,致使相同标本在不同模式下计算的定量结果千差万别。现以ＬｉｇｈｔＣｙ ｃｌｅｒ荧光定量ＰＣＲ仪为例 ,分析如下。1　材料与方法1 1　材…     

扩张型心肌病自主神经功能及昼夜变化

目的 研究扩张型心肌病(DCM)自主神经功能及昼夜变化。方法 采用临床病例对照,DCM组31例与正常人31例根据性别、年龄配对,运用动态心电图和计算机数据处理技术,结合心率变异(HRV)长时程时域分析与昼夜6个时点频域分析,观察平均心动周期、24小时全部正常心动周期的标准差(SDNN)、低频(LF)与高频(HF)功率、LF/HF比值等指标的变化。结果 (1)DCM患者24小时平均心动周期较对照组短,昼夜平均心动周期差减小(P<0.01);DCM组SDNN为93.78±45.06ms,正常人149.72±31.32ms,差异有显著意义(P<0.01)。(2)DCM组患者各时点的LF、HF均较对照组降低。对照组白天LF明显高于HF,DCM组LF稍高于HF,但LF/HF值升高;对照组夜间HF高于LF,但DCM组LF高于HF,LF/HF值升高。结论 DCM患者自主神经功能受损,交感神经及迷走神经活性降低,昼夜节律异常,交感-迷走神经功能平衡失调。夜间交感神经功能相对亢进,可能是夜间恶性心律失常及猝死的原因。     

心律失常心电图研究 致心律失常右室发育不良的心电图新概念——Epsilon波的特性及其临床意义

1977年Ｆｏｎｔａｉｎｅ首次报道致心律失常右室发育不良 (ａｒｒｈｙｔｈｍｏｇｅｎｉｃｒｉｇｈｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｄｙｓｐｌａｓｉａ ,ＡＲＶＤ) ,它是一种遗传性疾病 ,右室心肌被脂肪浸润及纤维组织所替代 ,致使右室弥漫性扩张、室壁变薄变形、肌小梁排列紊乱、收缩运动减弱 ,疾病发展到晚期 ,左心室也可受累 ,最终导致右室或双室衰竭 ,预后恶劣 ,年死亡率达 2 .5 %。 1995年世界卫生组织 (ＷＨＯ) /世界心脏病联盟 (ＷＨＦ)把该病归咎于致心律失常右室心肌病 (ａｒｒｈｙｔｈｍｏｇｅｎｉｃｒｉｇｈｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｃ…     

X线机启动保护电路的分析和检修

Ｘ线机启动保护电路的分析和检修解放军２３４医院李德印，张善江，吴祥故障现象：北京医用射线机厂生产的Ｆ９９—１Ａ型５００ｍＡＸ线机按下手闸后，Ｉ台点片摄影不曝光，而Ｉ台普通透视和Ｉ台摄影工作正常。初步查看，点片时，控制台内高压预上闸不工作，因而主可控硅...     

六味地黄丸对去卵巢ApoE~(-/-)AS小鼠动脉粥样硬化的作用及机制研究（英文）

目的探讨六味地黄丸(LWDHF)对更年期动脉粥样硬化的影响,阐明雌激素受体β和热休克蛋白27磷酸化在其中的作用。方法 HE染色观察ApoE-/-小鼠动脉损伤情况,免疫组织化学法检测血管内HSP27磷酸化水平。MTT法和流式细胞术分别检测VSMC增殖和细胞周期。通过伤口愈合实验和F-actin染色观察VSMC迁移。Western blot检测HSP27、pHSP27、cyclin D1、蛋白磷酸酶2和ERβ的表达。分别采用ERβsiRNA和ERαshRNA转染研究它们在LWDHF效应中的作用。结果 LWDHF改善了去卵巢ApoE-/-AS小鼠的动脉损伤,抑制了HSP27的磷酸化,并增加了PP2A和ERβ的表达。在体外实验中,1×10-7 mol/L浓度的血管紧张素Ⅱ明显诱导VSMC增殖和迁移,增加cyclin D1的表达和S期细胞数,但12μg/mL浓度的LWDHF可以明显抑制上述作用。进一步机制研究表明LWDHF通过ERβ上调PP2A的表达,抑制HSP27磷酸化,而抑制VSMC增殖和迁移。结论 LWDHF可以减轻更年期动脉粥样硬化,且通过调节ERβ抑制HSP27磷酸化,抑制VSMCs的增殖迁移。这些发现为LWDHF作为动脉粥样硬化的潜在治疗提供了新的理论基础。     

六味地黄丸对去卵巢ApoE-/-AS小鼠动脉粥样硬化的作用及机制研究

目的 探讨六味地黄丸（LWDHF）对更年期动脉粥样硬化的影响,阐明雌激素受体β和热休克蛋白27磷酸化在其中的作用。方法 HE染色观察ApoE-/-小鼠动脉损伤情况,免疫组织化学法检测血管内HSP27磷酸化水平。MTT法和流式细胞术分别检测VSMC增殖和细胞周期。通过伤口愈合实验和F-actin染色观察VSMC迁移。Western blot检测HSP27、pHSP27、cyclin D1、蛋白磷酸酶2和ERβ的表达。分别采用ERβ siRNA和ERα shRNA转染研究它们在LWDHF效应中的作用。结果 LWDHF改善了去卵巢ApoE-/-AS小鼠的动脉损伤,抑制了HSP27的磷酸化,并增加了PP2A和ERβ的表达。在体外实验中,1×10-7 mol/L浓度的血管紧张素Ⅱ明显诱导VSMC增殖和迁移,增加cyclin D1的表达和S期细胞数,但12 μg/mL浓度的LWDHF可以明显抑制上述作用。进一步机制研究表明LWDHF通过ERβ上调PP2A的表达,抑制HSP27磷酸化,而抑制VSMC增殖和迁移。结论 LWDHF可以减轻更年期动脉粥样硬化,且通过调节ERβ抑制HSP27磷酸化,抑制VSMCs的增殖迁移。这些发现为LWDHF作为动脉粥样硬化的潜在治疗提供了新的理论基础。     

Liguzinediol对普罗帕酮诱导的急性心衰大鼠心功能的影响

目的：观察川芎嗪衍生物（Liguzinediol）对普罗帕酮诱导的急性心力衰竭大鼠心脏的保护作用及机制。方法：静脉注射普罗帕酮复制大鼠急性心力衰竭模型,给予不同剂量的Liguzinediol（5.0、10.0、20.0 mg/kg）及阳性药西地兰（Digilanid C 0.045 mg/kg）,用RM6240多道生理信号采集处理系统记录给药0、5、10、20、40、60、90、120 min时左心室内压最大上升/下降速率（±dp/dtmax）、左心室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）、平均收缩压（mean systolic pressure,MSP）、平均舒张压（mean diastolic pressure,MDP）和心率（heart rate,HR）的变化;Western blot、q?PCR检测钙离子（Ca2+）转运相关蛋白表达并探索其作用机制。结果：Liguzinediol 5.0、10.0和20.0 mg/kg均能有效升高模型大鼠+dp/dtmax、?dp/dtmax、LVSP、MSP、MDP和HR。Western blot和q?PCR结果显示Liguzinediol可增加钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ（Ca2+/calmodulin?dependent protein kinaseⅡ,CAMKⅡ）及其磷酸化蛋白P? CAMKⅡ、肌浆网Ca2+?ATP酶（sarcoplasmic reticulum Ca2+?ATPase2a,SERCA2a）和磷酸化受磷蛋白（P?phospholamban,P?PLN）的表达,而兰尼碱受体2（ryanodine receptor 2,RyR2）和FK506结合蛋白12.6（FK506 binding protein 12.6,FKBP12.6）表达无显著差异。结论：Liguzinediol可明显改善急性心衰大鼠的血流动力学指标,其作用机制可能是通过调控CAMKⅡ改变细胞内Ca2+浓度来增强心肌收缩力,改善心衰。     

经房室结双径路1∶2传导引起的双重性心室反应1例

广义的室上性心动过速既包括房室折返及房室结折返性室上性心动过速,也包括心房颤动、心房扑动、房性心动过速等。本文报道一例室上性心动过速,其发生机制不同于上述类型,而是由于一次窦性激动经房室结双径路两次顺传激动心室,这种情况连续发生就会导致两倍于心房率的心室率,表现为窄QRS波群心动过速,现报道如下。     

内镜下电凝与钛夹联合注射血凝酶治疗重症消化性溃疡出血的疗效比较

目的探讨内镜下电凝与钛夹联合注射血凝酶治疗重症消化性溃疡出血的疗效及安全性。方法 68例重症消化性溃疡出血患者随机分为电凝组与钛夹组各34例,均采取联合内镜下注射血凝酶治疗,比较两组治疗疗效及并发症发生情况。结果电凝组即时止血率97.06%,术后1周之内再出2例,止血成功率94.12%;钛夹组即时止血率100.00%,术后1周之内再出1例,止血成功率97.06%,两组比较差异无显著性(P>0.05)。电凝组1例止血失败转为外科手术治疗,2例患者术后再出血采用内镜下再次注射止血后成功;钛夹组在术后3 d时1例患者出现呕血,内镜检查发现钛夹脱落,再次内镜下钛夹治疗后止血成功,两组患者治疗期间均无穿孔等并发症发生。结论内镜下电凝与钛夹联合注射血凝酶治疗重症消化性溃疡出血均能起到良好止血效果,且并发症少,安全性高。     

丹皮酚通过雌激素受体α调控巨噬细胞表型转换

目的基于雌激素受体α(ERα)研究丹皮酚对巨噬细胞表型转换的影响。方法利用100μg·L^-1脂多糖(LPS)和20μg·L^-1γ-干扰素(IFN-γ)联用复制巨噬细胞M1极化模型。ELISA实验观察丹皮酚对白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响。进一步用Western blot检测巨噬细胞M1表型标志物一氧化氮合酶iNOS、CD86和M2表型标志物精氨酸酶-1(Arg-1)、CD163的表达,并利用阻断剂和shRNA干扰的方法验证丹皮酚的效应是否通过ERα实现。结果ELISA结果表明丹皮酚可降低模型组TNF-α、IL-1β和MDA的含量,升高IL-10和SOD的含量。Westernblot结果显示,丹皮酚可降低模型组iNOS、CD86的蛋白表达,升高Arg-1、CD163的蛋白表达。ERα选择性阻断剂MPP和ERαshRNA均能降低丹皮酚的药效,ERβ选择性阻断剂PHTPP对丹皮酚的效应没有明显改变。结论丹皮酚可通过ERα诱导巨噬细胞向M2型转化,改善动脉粥样硬化。