食管癌组织Survivin表达及其与Bcl-2表达相关性研究

目的:研究Survivin在食管癌发生、发展中的作用及其与预后、Bcl-2表达的关系。方法:应用免疫组化SP法检测Sur-vivin和Bcl-2在30例正常食管黏膜组织、106例食管癌组织中的表达。结果:Survivin在食管癌组织中的阳性表达显著高于正常食管黏膜组织,P=0.000;食管癌浸润浆膜层组的Survivin阳性表达明显高于浸润肌层组,P=0.013;食管癌伴淋巴结转移组的Survivin阳性率显著高于无淋巴结转移组,P=0.011;Bcl-2阳性组的Survivin阳性表达明显高于Bcl-2阴性组,P=0.000;Sur-vivin阴性表达的食管癌病例术后5年生存率显著高于Survivin阳性表达的食管癌病例,P=0.043。结论:Survivin可作为食管癌的诊断标志,检测食管癌组织中Survivin的表达可作为判断食管癌转移及预后的参考指标。在食管癌组织中Survivin的表达与Bcl-2的表达密切相关,Survivin和Bcl-2在食管癌的发生、发展过程中起协调作用。     

长链非编码RNA ZNF667-AS1在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其DNA甲基化状态的研究

 目的 检测长链非编码RNA ZNF667-AS1在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）中的表达及甲基化状态。方法 应用qPCR和MSP法检测DNA甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC处理前后食管癌细胞系（Kyse170、Eca109、TE1和TE13）、ESCC及相应癌旁正常组织中ZNF667-AS1基因的表达,及其CpG岛三个区域的甲基化状态。结果 在5-Aza-dC处理后的四株细胞系中,ZNF667-AS1基因的表达均增高,且其CpG岛三个区域甲基化程度均降低。ZNF667-AS1基因在ESCC组织中的表达显著低于相应癌旁正常组织,且该基因CpG岛远端启动子区及第一外显子区甲基化率在ESCC与相应癌旁正常组织中的差异均具有统计学意义（均P<0.05）。ESCC组织中CpG岛近端启动子区甲基化率显著高于相应癌旁正常组织,并与组织分化程度、TNM分期密切相关,ZNF667-AS1基因CpG岛近端启动子区发生甲基化的ESCC组织中,低表达例数高于高表达例数,差异具有统计学意义。结论 ZNF667-AS1基因在食管癌细胞系和ESCC组织中的低表达与ESCC的发生发展密切相关,且其近端启动子区的高甲基化状态可能是导 致其表达沉默的机制之一。     

大鼠肾小管上皮细胞的分离鉴定及其增殖活力分析

目的：建立一种大鼠肾小管上皮细胞的分离鉴定方法,分析所获得细胞的增殖活力,为肾损伤等肾脏疾病的体外分析实验提供理论基础和技术支持。方法：采用Ⅱ型胶原酶消化法分离肾小管节段,并用Percoll密度梯度离心法进一步纯化肾小管,常规条件下对肾小管节段进行贴壁培养,待细胞爬出后,用免疫组织化学方法检测细胞角质素-18（CK-18）的表达情况,采用流式细胞术对第0、1和2（P0、P1、P2）代细胞的CK-18表达情况进行分析,用CCK-8方法检测各代细胞的增殖活力。结果：肾小管节段培养24 h后,可见细胞从节段内爬出;培养72 h后,细胞呈铺路石样密集生长。随着传代进行,P0、P1和P2代细胞CK-18的表达效率分别为95.9%、91.5%和76.8%,肾小管上皮细胞逐渐死亡,P2代细胞较P1代细胞增殖活力明显减弱(P<0.05),同时培养体系中杂细胞增多。结论：该方法经济可靠、简便易行,但是所分离的肾小管上皮细胞只可在体外传代2次,不能长期培养,仅P0、P1代细胞可供体外分析实验使用。     

高糖对大鼠下颌骨成骨细胞葡萄糖摄取的影响

目的：探讨高糖对胰岛素诱导的下颌骨成骨细胞葡萄糖摄取和葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter1,GLUT1）表达的影响。方法：分离培养大鼠下颌骨成骨细胞,分别予以5.5mmol/L、16.5mmol/L浓度葡萄糖和胰岛素干预,采用氟-18（F-18）标记的脱氧葡萄糖（18F-FDG）测定成骨细胞的葡萄糖摄取,采用Western印迹法检测GLUT1表达水平。采用SPSS13.0软件包对数据进行方差分析和t检验。结果：高糖培养时,成骨细胞的葡萄糖摄取无明显变化,但GLUT1的表达增加35%（P〈0.01）,胰岛素的应用对葡萄糖摄取无明显影响,但明显使GLUT1的表达下调33%（P〈0.01）。结论：高糖能够引起成骨细胞对胰岛素的敏感性下降,诱导成骨细胞产生胰岛素抵抗。     

Van⁃clear环保透明脱蜡剂在不同宫颈病变组织HE染色、蛋白及基因表达检测中的应用

目的：对比环保透明脱蜡剂Van?clear与传统透明脱蜡剂二甲苯在不同宫颈病变组织HE染色、P16及Ki67蛋白表达、hTERC基因表达检测效果的差异,探讨Van?clear的实用价值。方法：收集2016年1月至2018年7月于汕头市中心医院病理送检的宫颈炎标本42例、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）Ⅰ标本53例、CINⅡ标本61例、CINⅢ标本56例、宫颈癌标本48例,每例标本同一病变区域切取2块样本,随机分为A、B组。A组使用二甲苯制作石蜡切片260张;B组使用Van?clear制作石蜡切片260张。两组切片分别进行苏木素?伊红（hematoxylin eosin,HE）染色、P16和Ki67蛋白免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）染色、人端粒酶核糖核酸组分（human telomerase RNA component,hTERC）基因荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测,分析两组切片HE染色优良率、P16及Ki67蛋白、hTERC基因表达阳性率的差异。结果：① A、B组切片HE染色、IHC染色均达到行业质控标准;②A、B组切片HE染色优良率分别为98.08%、99.23%,两组间优良率的差异无统计学意义（χ2=1.30,P=0.25）;③IHC染色阳性率比较：A、B组切片相对应的不同宫颈病变组织中P16、Ki67蛋白阳性率差异均无统计学意义（均P＞0.05）;④hTERC基因阳性率比较：A、B组切片相对应的不同宫颈病变组织中hTERC基因表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）,且两组间荧光显微镜下图像无明显差异。结论：Van?clear作为一种新型环保透明脱蜡剂,在不同宫颈病变组织HE染色、P16及Ki67蛋白表达、hTERC基因表达检测效果与传统透明脱蜡剂二甲苯相当,且绿色环保,建议在临床推广使用。     

外用Nr-CWS治疗高危型HPV持续感染及宫颈癌前病变合并高危型HPV感染的效果

目的：探究外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架(Nr-CWS)治疗高危型HPV持续感染及宫颈癌前病变合并高危型HPV感染的效果。方法：选取2020年3月—2021年5月我院收治的116例宫高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染及宫颈癌前病变合并HPV感染患者作为观察对象,并根据患者的意愿将其分为试验组、对照组A、对照组B以及空白组,各29例。试验组采取外用Nr-CWS治疗,对照组A采取保妇康栓置于阴道治疗,对照组B采取重组人干扰素α-2b置于阴道治疗,空白组不予处理。对比组间患者临床疗效及不良反应情况。结果：停止治疗3个月后,试验组有效率与HPV转阴率显著高于其他3组(P<0.05);停止治疗6个月后,试验组HPV转阴率显著高于空白组(P<0.05),试验组、对照组A及对照组B有效率均显著高于空白组(P<0.05)。治疗期间,组间出现腰痛、白带异常、下腹坠胀及特殊气味等不良反应情况对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：外用Nr-CWS治疗高危型HPV持续感染及宫颈癌前病变合并高危型HPV感染,临床疗效显著,患者可耐受,值得推广。     

云克联合白芍总苷治疗类风湿关节炎的临床研究

目的观察云克(~(99)Tc-MDP)联合白芍总苷治疗类风湿关节炎的临床疗效及辅助检测指标的变化。方法选取2017年3月至2019年3月该院中西医结合科住院57例类风湿关节炎患者随机分为观察组30例和对照组27例。观察组采用~(99)Tc-MDP联合白芍总苷治疗,对照组采用甲氨蝶呤联合羟氯喹治疗。观察治疗前、后类风湿关节炎疾病活动性评分(DAS28评分)改善程度、按美国风湿病学会(ACR)类风湿关节炎疗效标准ACR50和ACR70达标率,以及红细胞沉降率、C-反应蛋白、类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体、骨密度变化。结果两组患者治疗后DAS28评分改善程度、红细胞沉降率、C-反应蛋白、类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体、骨密度均较治疗前有明显改善,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后骨密度、抗环瓜氨酸肽抗体优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后ACR70达标率优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后不良反应发生情况与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ~(99)Tc-MDP联合白芍总苷可明显改善类风湿关节炎临床症状和辅助检查指标,安全性高。     

金天格胶囊对骨质疏松性骨折大鼠BGP、TRACP表达的影响

目的：研究一种新的国家一类中药金天格胶囊对骨质疏松性骨折大鼠骨代谢因子的影响。方法建立绝经后骨质疏松性骨折大鼠模型,给予雌激素及不同浓度的金天格胶囊灌胃,并于灌胃治疗5周后,采用酶联免疫吸附法（ ELISA）测定骨钙素（BGP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）的表达。结果模型组大鼠的BGP、TRACP的阳性表达明显升高（P＜0．05）;中、低剂量的金天格胶囊可使大鼠的BGP、TRACP的阳性表达明显下降（ P＜0．05）,而高剂量金天格胶囊的干预效果不显著（ P＞0．05）。结论金天格胶囊对PMOP大鼠具有降低BGP、TRACP的分泌,促进骨折愈合的作用。     

脂联素对胎儿生长发育影响的研究进展

脂联素(adiponectin,ADP)是近年来发现由脂肪组织分泌的一种蛋白质类激素,在细胞葡萄糖和脂肪酸等能量代谢过程中发挥重要的调节作用,并参与细胞增殖肥大和免疫功能的调控,具有增强胰岛素敏感性、降低三酰甘油和血糖水平、保护心血管内皮