反义RNA技术对抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因表达的研究

目的:应用反义RNA技术抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因的表达,探索采用该技术干预肝癌的可行性。方法:制备人POLD1基因的反义RNA表达质粒,同时建立空白对照组与阴性对照组,由此将实验分为阴性对照组(转染空载体的SMMC-7721细胞)、空白对照组(肝癌细胞SMMC-7721)和实验组(转染人POLD1基因反义RNA表达质粒的肝癌SMMC-7721细胞)3组。MTT实验分析细胞增殖变化,并在转染SMMC-7721细胞48h后,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测POLD1基因的表达。结果:MTT实验显示,与空白对照和阴性对照组相比,转染了反义RNA的实验组细胞增殖受到明显抑制。在转染后24～72h,实验组吸光度24h为0.306 7±0.015 4,48h为0.459 2±0.033 2,72h为0.567 1±0.061 1,与空白和阴性对照组相比,P值均<0.05。实时荧光定量PCR实验显示,实验组POLD1的mRNA表达明显下调为0.142 5±0.020 5,阴性对照组为1.017±0.188,空白对照组为1.00±0.00(F=26.5,P<0.05),说明POLD1基因表达受抑制。蛋白质印迹实验显示,POLD1基因蛋白水平(p125)变化趋势与mRNA相同,均为下调,其中实验组为0.222 3±0.009 7,阴性对照组为0.237 9±0.005 9,空白对照组为0.235 4±0.003 4(F=1 365.754,P值均<0.05),说明反义RNA可抑制p125蛋白表达,结论与基因水平趋势一致。结论:针对POLD1基因设计的反义RNA体外抑制了肝癌细胞SMMC-7721的增殖,这与POLD1在基因和蛋白水平的表达下调有关。     

人肝癌SMMC-7721细胞中POLD1基因CDS突变的检测

目的检测人肝癌细胞株SMMC-7721中POLDl基因CDS的突变情况,以期从DNA复制最关键酶的编码基因POLDl的突变为干预细胞恶性增殖提供新的思路。方法设计人POLDl基因CDS特异性引物,以人肝癌细胞株SMMC．7721总RNA为模板进行RT—PCR扩增,将扩增产物纯化后加入“腺嘌呤”并与T载体连接,将连接产物进行测序,与数据库中的序列进行比对。结果成功扩增了人肝癌细胞中POLDl基因的CDS片段。SMMC．7721细胞中POLDl基因的CDS存在11个碱基替换,1个碱基缺失。结论人肝癌细胞SMMC-7721中POLDl基因的CDS发生了突变,进而导致其编码的氨基酸序列发生改变。     

药用植物学教学中 《中国植物志》的应用

〈中国植物志〉是研究中国现有种子植物和蕨类植物的重要工具,是鉴定植物种类不可缺少的专著.结合药用植物学的教学,引进〈中国植物志〉的学习,在实验课和野外实习中将〈中国植物志〉作为重要鉴定工具,通过系统的教学模式,使药学专业学生在药用植物学学习中熟练掌握〈中国植物志〉的使用,为以后的工作和研究奠定良好的基础.     

78例乳腺癌患者的围手术期护理措施及效果分析

目的评价我院乳腺癌患者围手术期中的护理措施及临床效果,旨在减轻患者痛苦,提高护理质量。方法选择我院行乳腺癌根治术的78例患者的临床资料及护理过程进行回顾性分析。结果 78例患者术后均康复出院,其中1例出现精神抑郁症状,经及时心理疏导结合药物治疗后康复。1例出现患侧肢体轻度功能障碍,考虑原因为未能坚持肢体功能锻炼引起。结论乳腺癌患者在手术及放化疗等综合治疗的基础上,采取积极有效的围手术期疾病护理及心理干预,纠正了患者不良心理状态,并加速的患者术后的康复,提高了其生活质量。     

盐酸罗哌卡因复合舒芬太尼在无痛分娩中的应用效果分析

目的探讨盐酸盐酸罗哌卡因联合舒舒芬太尼注射液在无痛分娩应用的临床效果。方法对我院2011年1月至2012年5月收治的96例孕妇,分为两组,每组各48例,对照组产妇采用自然分娩无任何镇痛,观察组为自愿接受无痛分娩,采用静脉给予盐酸盐酸罗哌卡因注射液联合舒舒芬太尼注射液进行镇痛,比较两组产妇的临床治疗效果。结果盐酸盐酸罗哌卡因联合舒舒芬太尼分娩镇痛,能明显缩短产程,降低剖宫产率,提高新生儿Apgar评分,减少产后出血。结论盐酸盐酸罗哌卡因联合舒舒芬太尼注射液硬膜外镇痛疗效确切,操作简便,对母婴影响小,值得临床广泛推广和应用。     

躯体形式障碍患者生活质量及社会支持状况的调查分析

目的调查躯体形式障碍患者的生活质量及社会支持状况,分析生活质量与社会支持的相关性。方法采用世界卫生组织生活质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)、社会支持评定量表(SSAS)对60例躯体形式障碍患者和60名正常者进行测评。结果患者组WHOQOL-BREF评分在生理领域、心理领域、社会关系领域、环境领域、总的生活质量、总的健康状况及总分均显著低于健康对照者,即躯体形式障碍患者生活质量较健康对照者差,差异性非常显著(P<0.01)。患者组在客观社会支持、主观社会支持和社会支持利用度、总分均低于对照组。患者组生活质量总分及生理领域、环境领域3个维度与社会支持总分及各维度分均呈显著正相关(P<0.05或0.01)。结论躯体形式障碍患者的生活质量明显下降,社会支持度及生活质量均显著低于正常人群,应引起人们的普遍关注。     

睡眠障碍患儿脑内神经递质的研究现状

睡眠是人体最重要的生理活动之一,儿童处于生长发育的关键时期,良好的睡眠可提高机体免疫力,与神经系统发育、学习及记忆功能密切相关.而睡眠医学中,儿童神经科常见的睡眠障碍问题,常常作为共患病的发生,对儿童对认知、情感、生长发育等多方面造成损害.睡眠障碍的病理生理改变主要为神经递质的改变.神经递质分为兴奋性和抑制性两类,当其...     

氯化两面针碱通过Rb/E2F途径抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖作用机制研究

氯化两面针碱(Nitidine chloride,NC)是从芸香科植物两面针根部提取的一种天然生物碱,具有很好的抗肿瘤活性,在体外能抑制鼻咽癌,肺癌等细胞的增殖。研究表明NC可导致细胞周期G2/M期阻滞,并诱导细胞凋亡。E2F/RB在细胞周期调控中起重要作用,它们与CyclinD1、CDK4、CyclinE、CDK2构成复杂的反馈调控网路,调节细胞从G1期到S期的过渡,推动了细胞周期的转变。另外,研究表明E2F是重要的转录因子,参与了基因的转录调控。研究肝癌细胞SMMC-7721经两面针碱处理后RB/E2F通路的相关分子水平变化,以及氯化两面针碱在RB/E2F途径抑制肝癌细胞增殖,参与细胞凋亡作用的机制。应用CCK8方法测定NC对SMMC-7721细胞存活率的影响;Annexin-V和碘化丙碇(propidium i-odide,PI)双染法检测细胞凋亡和坏死情况;RT-PCR检测不同剂量NC对E2F、RB mRNA表达影响;WB检测E2F蛋白含量的变化。结果显示NC可抑制肝癌细胞增殖,降低细胞存活率,促进细胞凋亡,明显降低细胞中E2F、RB mRNA和E2F蛋白的表达,并呈浓度依赖性。NC通过作用于E2F/RB调控通路,抑制了E2F/RB的表达,参与了细胞的增殖抑制和诱导了细胞凋亡。     

腹腔镜脾切除术患者的心理护理

目的研究腹腔镜脾切除术患者的心理护理模式。方法对腹腔镜脾切除术患者实施相应护理措施的同时,通过对40例腹腔镜脾切除术患者心理状态进行评估,运用护理心理学方法对患者进行心理护理。结果所有的研究对象情绪稳定,心态良好,均能够积极配合医生护士顺利完成手术治疗及术后护理。结论科学有效的心理护理是顺利开展腹腔镜脾切除术的重要保障。     

卵巢癌相关肿瘤标志物的研究进展

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,其病死率最高,且发病率呈上升趋势.由于卵巢癌发病隐匿,早期症状不明显,并缺乏有效的早期诊断方法,以致超过70%的患者确诊时已属晚期,临床疗效和预后不佳[1].提高患者生存率的关键是早发现、早诊断、早治疗.肿瘤标志物检测在恶性肿瘤的早期诊断、病情监测及治疗指导中有重要价值,已成为肿瘤患者常用的检查指标.现将卵巢癌相关肿瘤标志物的研究进展作一综述.