反向前列腺特异性膜抗原增强子启动子调控重组质粒的构建及增强子调控活性的比较

目的 探讨前列腺特异性膜抗原（PSMA）启动子和增强子调控目的基因表达的前列腺细胞特异性,了解增强子增强转录效率的能力。方法 采用PCR方法从前列腺癌细胞DNA中分别扩增PSMA增强子序列．将其按不同方向亚克隆到含有报告基因——绿色荧光蛋白（GFP）的重组质粒载体pEGFP—PSMAPPro脂质体介导基因转染不同癌细胞并观察GFP在所转染的细胞的表达情况。结果 成功构建质粒pEGFP—PSMAE-P和pEGFP-PSMAE（r）-P,质粒转染结果显示PSMA表达阳性的LNCaP细胞中存在GFP的特异有效表达,增强子序列能使基因转录效率提高30倍,不同方向的增强子序列在增强转录效率方面具有同样效应。结论 反向PSMA增强子启动子调控GFP表达的重组质粒的构建证明该调控序列具有前列腺细胞特异性,增强子具有增强启动子转录效率的功能且没有方向性。     

兔急性脊髓损伤后磁刺激运动诱发电位与病理变化的相关性

目的观察兔急性脊髓损伤后经颅磁刺激运动诱发电位（transcranial magnetic stimulation motor evoked pontentials，TMS-MEP）的变化规律，并与脊髓病理变化相比较，探讨其相关性。方法将日本大耳兔32只随机分为4组，每组8只。A组为对照组，B、C、D组为实验组（脊髓损伤组）。然后对每组动物分别于麻醉后、暴露脊髓后、伤后5min、30min、1h、6h、1d、3d、7d检测TMS-MEP，对所得波形数据进行统计学分析。于伤后1d、3d、7d采用后肢的Tarlov分级行运动功能评分。以损伤部位为中心切取脊髓标本，行HE染色光镜、电镜观察。结果随着脊髓损伤的加重，MEP的潜伏期逐渐延长，波幅在逐渐减小，病理显示白质纤维脱髓鞘越重，神经细胞损伤数目越多，MEP的潜伏期延长和波幅降低越明显。结论经颅磁刺激运动诱发电位与脊髓病理变化有明显的相关性，TMS-MEP对脊髓损伤十分敏感，能客观地检测脊髓运动功能，反映脊髓损伤程度。     

树舌多糖抗肿瘤机制的研究

采用免疫组化方法研究树舌多糖对小鼠HepA瘤细胞Rb基因、p16基因和TNF -α表达的影响 ,阐明中药多糖的抗肿瘤作用机制。实验表明 :树舌多糖组瘤重减轻 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 1) ;树舌多糖组小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;树舌多糖组p16基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;树舌多糖组TNF -α表达增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :树舌多糖通过增强抑癌基因 -Rb基因、p16基因及TNF -α的表达活性 ,即在基因表达水平上抑制肿瘤的生长     

基于CT影像组学模型鉴别腺性膀胱炎与膀胱癌

目的探讨基于CT的影像组学模型对腺性膀胱炎(CG)与膀胱癌的鉴别诊断效能。方法回顾性分析经病理证实的40例CG (CG组)和70例膀胱癌(膀胱癌组),均于术前接受盆腔平扫和三期增强CT扫描。分别在平扫、动脉期、静脉期及延迟期CT图像上勾画三维容积感兴趣区(VOI),提取影像组学特征。将按7∶3随机将患者分入训练集与测试集。对各期CT影像组学特征数据行归一化处理,以最小冗余最大相关法(mRMR)、最小绝对收缩和选择算法(LASSO)及5折交叉验证进行特征降维;采用多因素Logistic回归分析建立影像组学模型。以受试者工作特征(ROC)曲线评价各模型的诊断效能,采用Delong检验评价其效能差异,以决策曲线分析评估模型临床应用价值。采用Hosmer-Lemeshow检验和校正曲线评估模型拟合度。结果分别基于平扫、动脉期、静脉期、延迟期影像组学特征建立了模型1、2、3、4,各纳入4、7、5及6个特征;其鉴别诊断CG与膀胱癌的曲线下面积(AUC)均0.80,且Delong检验表明不同模型间AUC值差异无统计学意义(P均0.05)。模型2在测试组的AUC=0.939,高于其他模型。决策曲线分析表明,模型2用于临床鉴别CG与膀胱癌的净获益最高,Hosmer Lemeshow拟合优度检验显示模型2预测结果与实际结果差异无统计学意义(训练集:χ~2=8.75,P=0.36;测试集:χ~2=4.72,P=0.79);校正曲线显示模型2的拟合效果较好。结论基于各时相盆腔CT影像组学模型均可用于辅助临床鉴别诊断CG与膀胱癌,其中基于动脉期影像组学模型的诊断效能最高。     

前列腺特异性膜抗原启动子增强子调控重组质粒的构建及鉴定

目的探讨前列腺特异性膜抗原(PSMA)启动子和增强子调控目的基因表达的前列腺细胞特异性，了解增强子增强转录效率的能力。方法采用PCR方法从前列腺癌细胞DNA中分别扩增PSMA启动子和增强子序列，先后克隆到含有报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的质粒载体，脂质体介导基因转染不同癌细胞并观察GFP在不同细胞的表达情况。结果成功构建质粒pEGFP—PS—MAPro和pEGFP-PSMAEP，转染结果显示PSMA表达阳性的LNCaP细胞中存在GFP的有效表达，且pEGFP—PSMAEP的调控转录能力较pEGFP—PSMAPro强20倍。结论PSMA启动子增强子调控GFP表达的重组质粒的构建证明该调控序列具有前列腺细胞特异性，增强子能够明显增强启动子的转录效率，增加了目的基因的表达水平。PSMA启动子和增强子的共调控可以保证基因表达的强度和细胞特异性，为前列腺癌基因靶向性治疗研究提供实验依据。     

肺癌细胞株A549光动力学实验结果的定量分析*

背景：目前光动力学癌症治疗的基础与临床研究均依赖于经验或定性模型,并缺乏准确有效的光学方法以监测及提高疗效。 目的：定量分析光动力数学模型在细胞试验中的应用结果,探讨光动力学疗法治疗计划系统的可能性。 方法：将人肺腺癌细胞株A549,3 W/633 nm半导体二极管激光器,血卟啉衍生物光敏剂Photosan3,采用底部澄清黑色96孔板进行常规细胞培养,严格避光状态下进行光敏剂处理及激光照射,设定标准曲线及对照组,计算不同光功率处理后的细胞残存率;数学模型基于时间域速率方程组方法建立。 结果与结论：光敏剂浓度为12 g/L、采用20,30,40,50 mW 4个光照功率、0~20 J/cm2 11个光照能量,组合而成4条细胞残存率曲线,显示激光功率相同情况下,随光照能量增加,细胞残存率下降,且相同能量下,激光功率越高,细胞残存率越高;通过数学模型模拟计算,设定入射光子量ρ为8.0×105,光敏剂初始浓度[S0]i为4.0×1010,初始单态氧浓度[O3]¬i为5.9×1017,在此参数设定下,模拟的曲线与实际测得曲线最为相近,显示随着入射激光子量增加,细胞残存率逐渐增加,在相同入射光子量之下,细胞残存率随能量增加而下降的趋势。实验结果首次清楚地表明了定量描述光动力学疗法细胞模型的可行性,证实了光动力治疗数学模型与细胞试验的吻合性,表明此模型可以较准确反映细胞试验的结果。     

无创纯氧正压通气治疗急性中重度一氧化碳中毒

我院自2004年11月—2006年4月收治16例急性中重度一氧化碳(CO)中毒患者,给予无创纯氧正压通气治疗,报告如下。     

单向活瓣支架肺减容术治疗绵羊肺气肿模型的病理学观察

目的:观察自制单向活瓣支架行纤维支气管镜介入肺减容术(BILVR)的疗效及支架对于周围气道壁的损伤情况,探讨此方法的安全性和有效性。方法:对9只肺气肿绵羊模型和1只健康绵羊经纤维支气管镜在靶位支气管植入活瓣支架,8周后观察支架远端肺组织病理学改变,6个月后观察支架周围支气管的病理学和超微病理学的改变。结果:术后8周观察大体标本示支架远端肺组织萎陷,光学显微镜示支架远端肺泡腔萎陷。健康绵羊支架放置6个月光学显微镜示支架周围未发现肉芽组织增生及血栓形成。透射电镜示支架周围支气管黏膜上皮细胞排列整齐,杯状细胞增生。结论:自行研制的单向活瓣支架组织相容性好,经纤维支气管镜肺减容术治疗晚期肺气肿可达到肺萎陷的目的。     

儿童多发性骨髓瘤伴乳糜胸及葡萄状细胞1例

多发性骨髓瘤(MM)大都发生于老年人,而伴有乳糜状胸水者尚未见报道。我院收治1例,伴乳糜胸水,在骨髓及胸水中含大量葡萄状细胞。现报告如下。患儿男,11岁。4年前因骑车不慎摔跤后经常腰疼、发热(38～39℃),活动时加重。2年来发作频繁,且腰部活动受限。4月前自觉胸部有震水感,伴右侧胸疼,但无咳嗽、咯痰。门诊曾诊断“结核性胸膜炎骨结核”。接受抗痨治疗无效,于1985年10月住     

汉中市人民医院2002-2004年围产儿出生缺陷状况分析

目的：分析汉中市人民医院2002—2004年围产儿出生缺陷的发生率及其变化；探讨减少出生缺陷的相应的措施。方法：按照《中国出生缺陷监测方案》进行监测工作，并将结果进行统计学处理。结果：3年共监测围产儿3118例，检出缺陷儿26例．出生缺陷发生率为83．4／10^4，发生率各年段呈明显下降趋势；性别和城乡出生缺陷的发生率有显著差异性。结论：坚持开展孕产妇系统管理．重视围婚期保健，加强农村妇女的三级预防，是进一步减少出生缺陷的关键。